Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

Язык вследствие своих анатомических особенностей – наличия сосочков, складок, является наиболее оптимальным местом для локализации микробов. Количество постоянных видов микроорганизмов, формирующих биопленку биотопа, относительно невелико, но спектр всегда разнообразный [1, 7, 8]. Известно, что при зубочелюстных аномалиях и деформациях наблюдается повышение концентрации условно-патогенных микроорганизмов [10], а наличие на поверхности зубов несъемной ортодонтической аппаратуры способствует аккумуляции зубных отложений, ухудшению гигиены полости рта [2, 4, 10], что объясняется сложной конструкцией аппаратуры [2, 5] и ухудшением естественного очищения зубов [5, 9]. Ухудшение гигиены полости рта при наличии брекет-системы сопровождается изменением микробиологического статуса, при котором на фоне увеличения общей микробной массы усиливается патогенетическая активность микрофлоры [3]. В результате происходит изменение качественного и количественного состава микрофлоры полости рта [3], что может приводить к развитию различных стоматологических заболеваний [2, 4, 10]. В настоящее время нет сведений о частоте встречаемости и количественном составе микроорганизмов на слизистой оболочке спинки языка у пациентов, находящихся на различных этапах ортодонтического лечения. Актуальным является выявление закономерностей изменений микробиоценоза полости рта у пациентов с несъемной ортодонтической аппаратурой.

Цель исследования: оценка качественного и количественного состава микроорганизмов на слизистой оболочке спинки языка у пациентов с зубочелюстными аномалиями и деформациями до установки брекет-системы, а также через шесть и двенадцать месяцев после установки.

Материалы и методы исследования

Для выполнения цели исследования проведено комплексное стоматологическое обследование 32 детей и подростков в возрасте 12–18 лет (18 – мальчиков, 14 – девочек), которые находились на лечении несъемной ортодонтической аппаратурой в ортодонтическом отделении клиники ГБОУ ВПО Тверская ГМА Минздрава России.

Для оценки гигиенического состояния полости рта детей использовался индекс гигиены Брекета Улитовского [6]. Изучение спектра и количества микроорганизмов проводили на поверхности слизистой оболочки спинки языка до постановки брекет-системы, а также через 6 и 12 месяцев после фиксации. Материал с поверхности языка получали стерильным ватным тампоном с площади 1 см2, для чего заранее изготавливали из проволоки матрицу указанной площади. За два часа до сбора материала пациенты не принимали пищу, не чистили зубы и не обрабатывали полость рта антисептическими средствами. Ватные тампоны помещали в специальную транспортную среду и доставляли в бактериологическую лабораторию в течение 1 часа. Микробиологические исследования материала проводились с использованием классических бактериологических методов на базе бактериологической лаборатории Тверской государственной медицинской академии.

Для комплексного изучения аэробной и анаэробной микрофлоры посевы производили как на отечественные питательные среды, так и на среды американской фирмы BBL®, включающие желточно-солевой агар (ЖСА) для выделения стафилококков, среду Эндо для энтеробактерий, Sabouraud Dextrose Agar (BBL®) для культивирования дрожжевых грибов, Schaedler Agar (BBL®) с кровью и среду MRS Agar (BBL®) для выделения анаэробных бактерий.

Культивирование микроорганизмов проводили соответственно в аэробных, анаэробных и микроаэрофильных условиях в термостате при температуре 37 ºС в течение 24–48 часов. Количество бактерий в lg КОЕ/мл определяли путем подсчета колониеобразующих единиц на 1 см2 с поверхности языка. После инкубации определяли культуральные, морфологические, тинкториальные свойства микроорганизмов и наличие изменений свойств питательных сред вокруг колоний (на кровяных Schaedler Agar учитывали гемолитическую, на ЖСА – лецитиназную активности). Идентификацию энтеробактерий осуществляли с помощью идентификационных систем EnterotubeII и Oxi/FermTube (BBL). Определение вида анаэробов проводили на API системах французской фирмы bioMérieux (API 20 A), стрептококков – (API 20 Strept), стафилококков – (API 20 Staph),  дрожжевых грибов – API AUX.

Данные экспериментов обрабатывались с помощью прикладной программы “STATISTICA” (StatSoftRussia) и BIOSTAT.

Результаты исследования и их обсуждение

Во время лечения несъёмной ортодонтической аппаратурой было установлено, что у 21 % детей и подростков до установки аппаратуры была выявлена хорошая гигиена полости рта, у 7 % – неудовлетворительная; через шесть месяцев у 19 % наблюдалась неудовлетворительная, а у 9 % – хорошая; через 12 месяцев исследования у 17 %  – хорошая, 11 % – неудовлетворительная.

До начала ортодонтического лечения в мазке со слизистой оболочки спинки языка у детей и подростков, имеющих различные виды зубочелюстных аномалий и деформаций, в 100 % случаев были выявлены микроорганизмы Streptococcus spp. и Peptostreptococcus spp; в 67 % обнаружены бактерии рода Staphylococcus, в 33 % – Peptococcus и семейства Enterobacteriaceae. Распространенность представителей нормальной микрофлоры полости рта, Lactobacillus spp., составила 43 %. Частота встречаемости Staphylococcus aureus выявлена в 33 % случаев (рис.1).

 

Рис. 1. Спектр и частота встречаемости микроорганизмов спинки языка у подростков 12–18 лет, находящихся на лечении несъемной аппаратурой (р<0,05)

Через 6 месяцев лечения доминантные виды микроорганизмов в мазке со спинки языка (рис. 1) были представлены бактериями рода Streptococcus и Peptostreptococcus в 100 % случаев, что соответствует показателям до начала лечения. Частота встречаемости бактерий Lactobacillus spp. увеличилась на 15 %, составив 58 %, а бактерий рода Peptococcus и семейства Enterobacteriaceae уменьшилась на 19 %, составив по 14 %. Распространенность непатогенных представителей рода Staphylococcus уменьшилась с 38 % до 29 %, а патогенных бактерий, Staphylococcus aureus – с 19 % до14 %. У пациентов через полгода от начала лечения появились условно-патогенные грибы рода Candida (43 %).

Через 12 месяцев от начала лечения частота встречаемости Streptococcus spp. и Peptostreptococcus spp. не изменилась (100 %). Распространенность непатогенных бактерий рода Staphylococcus (50 %) и семейства Enterobacteriaceae (34 %) увеличилась на 20 %, а грибов рода Candida уменьшилась с 43 до 34 %. Частота встречаемости Lactobacillus spp. (50 %), Porphyromonas spp. (17 %) и Peptococcus spp. (17 %), Staphylococcus aureus (17 %) осталась практически неизменной (рис.1).

Рис. 2. Количество микроорганизмов в мазке со спинки языка у подростков 12–18 лет, находящихся на лечении несъемной аппаратурой (р<0,05)

До начала ортодонтического лечения количество доминантных видов микроорганизмов соответствовало высоким цифрам: Peptostreptococcus spp. – 6,2 lg КОЕ/см2, Streptococcus spp. – 5,3 lg КОЕ/см2. Менее распространенные бактерии также имели высокие количественные показатели: Peptococcus spp. – 5,1 lg КОЕ/см2, Staphylococcus aureus – 4,2 lg КОЕ/см2. Количество бактерий рода Lactobacillus соответствовало низким цифрам, составив 2,7lg КОЕ/см2 (рис. 2).

Через 6 месяцев лечения большое количество микроорганизмов (рис. 2) приходилось на бактерии рода Porphyromonas, Peptostreptococcus и Streptococcus (6; 5,8; 5 lgКОЕ/см2 соответственно), а также семейства Enterobacteriaceae (6,4 lg КОЕ/см2). В меньшем количестве (≤ 4,5 lg КОЕ/см2) высевались бактерии рода Lactobacillus, Staphylococcus, Staphylococcus aureus, Peptococcus. и грибы рода Candida (2,28 lg КОЕ/см2).

За 6 месяцев лечения увеличилось количество бактерий семейства Enterobacteriaceae в 3 раза (с 2,2 до 6,4 lg КОЕ/см2), а также бактерий Staphylococcus spp. на 1,2 порядка (с 3,3 до 4,5 lg КОЕ/см2). Уменьшилось количество патогенных стафилококков, Staphylococcus aureus (с 4,2 до 2,18 lg КОЕ/см2) и бактерий рода Peptococcus на 2 порядка (с 5,1 до 3,4 lg КОЕ/см2). Количество других микроорганизмов было соизмеримо с данными до установки аппаратуры.

За год лечения от момента постановки несъемной ортодонтической аппаратуры количество Porphyromonas spp., Peptostreptococcus spp. и Streptococcus spp. осталось прежним (рис. 2). Количество бактерий рода Staphylococcus (3,3 lg КОЕ/см2) и семейства Enterobacteriaceae (2,6 lg КОЕ/см2) стало соответствовать показателям до начала лечения, а бактерий рода Peptococcus – превышать первоначальные значения (6,4 lg КОЕ/см2). Значительно снизилось количество патогенного Staphylococcus aureus с 4,2 до 1,4 lg КОЕ/см2. Незначительно уменьшилось содержание бактерий рода Lactobacillus (2,4 lg КОЕ/см2) и грибов рода Candida (1,8 lg КОЕ/см2).  За 12 месяцев лечения впервые появились Enterobacter sakazakii (17 % – 4,4 lg КОЕ/см2), Veillonella spp. (17 % – 4,3 lg КОЕ/см2) и Neisseria spp. (34 % – 4 lg КОЕ/см2). 

Заключение

Было установлено, что в течение двенадцати месяцев лечения зубочелюстных аномалий и деформаций несъемной ортодонтической аппаратурой происходит изменение микробиоценоза спинки языка в сторону увеличения условно-патогенной микрофлоры, что соответствует дисбиотическим изменениям в полости рта.

У всех пациентов доминантными микроорганизмами слизистой оболочки спинки языка на протяжении года ортодонтического лечения были бактерии рода Streptococcus и Peptostreptococcus, выделяющиеся в количестве 5–6 lg КОЕ/см2. Качественные и количественные характеристики Staphylococcus spp. варьировали на протяжении всего периода наблюдения, но к концу лечения частота встречаемости непатогенных стафилококков не превышала 50 %, а количество стало соответствовать показателям до начала лечения (3,3 lg КОЕ/см2). Частота встречаемости Staphylococcus aureus составила 20 %, а количество значительно снизилось до 1,4 lg КОЕ/см2. В течение 12 месяцев лечения несъемной ортодонтической аппаратурой появились условно-патогенные грибы рода Candida c постепенным снижением частоты встречаемости с 43 до 34 % и количества до 1,8 lg КОЕ/см2, а с другой стороны, увеличилась распространенность (50 %) и количество (3 lg КОЕ/см2) представителей нормофлоры – Lactobacillus spp. Частота встречаемости других микроорганизмов не превышала 30 %.

Анализ данных свидетельствует о том, что качественный и количественный состав микрофлоры спинки языка подвергается дисбиотическим изменениям. В связи с этим необходимо разработать схему ведения ортодонтических пациентов для предотвращения развития осложнений на протяжении всего периода лечения.

Рецензенты:

Стрельников В. Н., д.м.н., профессор кафедры ортопедической  стоматологии Тверской ГМА, г. Тверь;

Червинец В.М.,  д.м.н., профессор, зав. кафедрой микробиологии и вирусологии Тверской ГМА, г. Тверь.