Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

МИКРОБНЫЙ ПЕЙЗАЖ ПОЛОСТИ РТА У ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ ПАРКИНСОНА

Рувинская Г.Р. 1 Залялова З.А. 2
1 ГБОУ ДПО «Казанская государственная медицинская академия» Минздрава России
2 ГБОУ ВПО «Казанский государственный медицинский университет» Минздрава России
Проведен анализ микробиоценоза полости рта у 85 пациентов с болезнью Паркинсона. Показано качественное и количественное отличие состава микрофлоры у первичных пациентов с БП и у пациентов БП, получающих леводопу. Плотность высеваемости стрептококковой и стафилококковой флоры достоверно ниже с биотопов мягкого зубного налета при назначении препаратов леводопы. Частота и плотность высеваемости Candida albicans на дорсальной поверхности языка при леводопотерапии имеет обратную тенденцию - достоверно выше по сравнению с первичными пациентами. При анализе доминирующей условно-патогенной микрофлоры пародонтальных карманов показано, что чаще всего встречаются бактерии рода Tannerella forsythensis (обсемененность в 73,6% случаях), высеваемость Prevotella intermedia и Porphyromonas gingivalis составила 63,2%, Acinobacillus actinomycetemcomitans – 60,5%, реже всего высевалась Treponema denticola– в 55,3%, которая имела тенденцию к ассоциациям из 3-5 бактерий. Выявлена положительная корреляционная зависимость между «глубиной пародонтального кармана» и «частотой выявляемости пародонтопатогенных штаммов», r=0,785., однако не прослеживается между «степенью гигиены полости рта» и наличию в микробиоценозе этих представителей условно-патогенной микрофлоры.
болезнь Паркинсона
леводопотерапия
пародонтопатогенные штаммы микроорганизмов
доминирующая условно-патогенная микрофлора
микробный пейзаж полости рта
1. Афиногенов Г.Е., Афиногенова А.Г. Микробные биопленки РАН. Обзор литературы. // Профилактика todаy. – 2014. апрель (№ 17) – С. 17-22.
2. Гаврилова О.А. Микроэкология полости рта и ее роль в эпиопатогенезе стоматологических заболеваний у детей с хроническим гастродуоденитом: принципы комплексного лечения и профилактики: Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора медицинских наук/ О.А.Гаврилова. – Тверь, 2010. – 48 с.
3. Литвиненко И.В. Болезнь Паркинсона /И. В. Литвиненко. – М.: Из-во Миклош, 2006. – 216 с.
4. Рувинская Г.Р., Залялова З.А. Особенности стоматологической курации пациентов с болезнью Паркинсона // Российский стоматологический журнал. – 2012. - №6. – С. 30-32.
5. Рувинская Г.Р., Залялова З.А. Диагностическая ценность определения уровня микроэлементов в ротовой жидкости пациентов с болезнью Паркинсона // Врач-аспирант. – 2013. - №1.1 (56). – С.187-192.
6. Рувинская Г.Р, Мухамеджанова Л Р., Баязитова Л.Т. Анализ количественного и качественного состава микробиоценоза различных биотопов ротовой полости у пациентов с болезнью Паркинсона. // Вестник Чувашского университета. – 2014. - №2. – С. 335-342.
7. Chondrogiorgi M Dopamine agonist monotherapy in Parkinson's disease and potential risk factors for dyskinesia: a meta-analysis of levodopa-controlled trials./M. Chondrogiorgi, A.Tatsioni, H. Reichmann, S. Konitsiotis // Eur J Neurol. 2014 Mar; 21(3): 433-40.
8. Kishi M Prediction of periodontopathic bacteria in dental plaque of periodontal healthy subjects by measurement of volatile sulfur compounds in mouth air./ M/ Kishi, Y. Ohara-Nemoto, M.Takahashi, K. Kishi, S. Kimura, F.Aizawa, M.Yonemitsu//Arch Oral Biol. 2013 Mar;58(3):324-30.
9. Timmerman M. F Risk factors for periodontitis/M. F. Timmerman // International J. Dental Hygiene. – 2006. – Vol. 4, № 1. – P. 2-7.
Одним из распространенных хронических прогрессирующих заболеваний, занимающее второе место по распространенности среди всех нейродегенеративных заболеваний, является болезнь Паркинсона (БП) [3]. Известно, что БП характеризуется медленным течением, для  патогенеза этого заболевания  характерно нарушение функции дофаминергических нейронов, обеспечивающих контроль за движениями. Базисным препаратом, возмещающим дефицит дофамина, является препарат леводопа [7], назначающийся не всем пациентам БП, а только когда клинические моторные проявления приобретают  дезаптирующий характер. Несмотря на то что диагноз базируется на обнаружении специфических двигательных нарушений, с увеличением продолжительности заболевания усиливаются как моторные, так и немоторные симптомы, которые могут быть как проявлением собственно БП, так и быть ассоциированы с побочном действием  леводопотерапии. Это - сиалоррея, бруксизм, дисфагия, непроизвольные жевательные движения, ригидность жевательной мускулатуры и т.д., которые, усиливаясь, на более поздних стадиях болезни становятся ведущими в дезадаптации и снижении качества жизни. Результаты наших ранних работ, где изучалась распространенность стоматологических заболеваний при БП [4], показали, что при БП в 100% характерны  воспалительно-деструктивные заболевания пародонта. Сложившуюся ситуацию мы могли  объяснить тем, что таким пациентам затруднительно осуществлять гигиенический уход за полостью рта из-за тремора, ригидности и брадикинезии верхних конечностей, постуральных нарушений. Неудовлетворительное гигиеническое состояние полости рта всегда ведет к накоплению мягкого зубного налёта, формированию зубной бляшки. Также ранее проведёнными исследованиями показано, что отдельные представители микрофлоры полости рта могут находиться в так называемом «флотирующем состоянии». Но это состояние временное, затем идет этап формирования биоплёнки [1].

При хронических воспалительных заболеваниях пародонта при высокой патогенности возбудителя и слабых или недостаточных природных механизмах противоинфекционной защиты хозяина из-за какого-либо патологического процесса, развитие патологического биотопа может быть следствием развития самого инфекционного процесса.  При этом тяжесть  местного повреждения тканей способны определить условия для участия не только облигатно-, но и условно-патогенной микрофлоры [1].

Целью настоящего исследования явилось проведение микробиологического анализа полости рта у пациентов с болезнью Паркинсона.

Материалом исследования явился биоматериал 85 образцов мягкого зубного налёта, налёта с дорсальной поверхности языка, вестибулярной поверхности альвеолярного отростка в различных  (фронтальных и дистальных) участках челюстей, пародонтальных карманов.

Для микробиологического исследования биоматериал взят у 47 пациентов с БП (в возрасте от 55 до 81 года). Пациенты, которые включались в исследование, находились на диспансерном наблюдении в РКД ЦЭПиБТ (Республиканский клинико-диагностический центр экстрапирамидной патологии и ботулинотерапии) МЗ Республики Татарстан. Пациенты были ранжированы на группы. В группу №1 (в количестве 15 человек) вошли первичные пациенты БП, которым препараты леводопы не назначались. Группу №2 (в количестве 32 человека)  составили пациенты БП, принимающие препараты леводопы. У пациентов группы №1, брали мазок с дорсальной поверхности языка (N=8) и с пришеечной области зубов (N=7). У пациентов группы №2 брали мазок-отпечаток с дорсальной поверхности языка (N=17), с пришеечной области зубов (N=15). Забор материала осуществлялся натощак. Биоматериал собирали 2 стерильными одноразовыми тампонами, культивировали на плотные и полужидкие питательные среды в различных условиях (аэробных и анаэробных).  Использовался 5% кровяной агар, среда Сабуро, Блаурокка, стрептококковый селективный и желточно-солевой агары, а также MRS агар и тиогликолевая среда. Верифицировали микроорганизмы морфологически, биохимически, биологически, количество полученных колоний микроорганизмов обозначали как КОЕ/там (было обследовано всего 47мазков-отпечатков). Полученные результаты были статистически обработаны, применяли пакет программ SPSS 13, критерий Стьюдента использовали для проверки нормальности распределений (различия считались достоверными при р<0,05).

Биоматериал для определения условно-патогенных микроорганизмов в бактериозе  полости рта при БП был взят у 38 пациентов с БП (18 мужчин, 20 женщин). Всем пациентам был диагностирован хронический генерализованный пародонтит (ХГП) различной степени тяжести (легкой, средней, тяжелой): определялся гигиенический индекс Грина-Вермильона, PI Russel для выражения тяжести деструктивного процесса (пародонтальный индекс по Расселу).

Забор материала для исследования осуществлялся также натощак: с: пародонтальных карманов, вестибулярной поверхности альвеолярного отростка (фронтальные и дистальные участки) как верхней, так и нижней челюсти. Для этого брали стерильный абсорбционный штифт, помещали биоматериал в пробирку Eppendorf, содержащей комплект реагентов для выделения ДНК (Проба Рапид, ДНК-Технология, Россия) и выделяли пародонтопатогенные штаммы (Аcinobаcillus аctinomycetemcomitаns, Treponema denticola, Tannerella forsythensis, Prevotella intermedia, Porphyromonas gingivalis) методом ПЦР  и электрофореза (использовались 1,6 % агарозный гель; тест-системы MicroDent, "HаinDiаgnosticа", Германия). Статистическую обработку полученных результатов проводили в программе SPSS-14.0 для Windows с применением параметрических и непараметрических методов.

Результаты исследования

В результате обследования состояния полости рта и тканей пародонта у пациентов в группе №1 клинически  диагностирован у 42% хронический генерализованный катаральный гингивит (тяжёлой степени тяжести) и ХГП  (легкой степени тяжести), а у 58% пациентов  - ХГП средней и тяжёлой степени тяжести.

При определении микробиологического анализа (количественного  и качественного состава) бактериоза различных биотопов ротовой полости у лиц с БП выявлен умеренный рост пиогенного, ß-гемолитического стрептококка серогруппы А (дорсальная поверхность языка -  3,8 lg КОЕ/там, частота встречаемости - 62, 5%; мягкий зубной налет - 3,5  lg КОЕ/там при частоте встречаемости - 57,14%). Стрептококки зеленящие были верифицированы  в количестве 4,4 lg КОЕ/там  (при частоте 62,5%) на поверхности языка и в зубном налете в количестве 4,8 lg КОЕ/там (при частоте 71,42%) (р<0,05). Отметим, что бактерии рода Streptococcuss являются доминирующей микрофлорой микробиоценоза полости рта, как области мягкого зубного налета, так и дорсальной поверхности языка.

Также в этой группе отмечен рост стафилококковой флоры.: в зубном налете - 4 lg КОЕ/там (при частоте встречаемости - 42,85%), а в 14,3% обнаруживался стафилококк эпидермальный - 5 lg КОЕ/там (р<0,05). В отличие от дорсальной поверхности языка, где в 37,5% также обнаруживается стафилококк в 3 lg КОЕ/там (р<0,05), а эпидермальный не верифицирован вообще.

Cаndidа albicans высеяны на поверхности языка в12,5% с плотностью 2 lg КОЕ/там, а  в зубном налете высеяны с большей плотностью 4 lg КОЕ/там и у большего количества пациентов - 57,14%  (р<0,05).

В отличие от грибов рода Cаndidа, клебсиелла чаще отмечалась на дорсальной поверхности языка (у 25% пациентов), чем в биосубстрате мягкого зубного налета  (у 14,3% пациентов) (р<0,05). Эта же тенденция прослеживалась и у Neisseriа flаvа. А анаэробы микробного пейзажа - бифидобактерии - на  дорсальной поверхности языка высевались у 12,5% пациентов в  2 lg КОЕ/там,  в мягком же налете больше - в 28,57%  случаев  при  3 lg КОЕ/там, (р<0,05).

В группе № 2 (пациенты с БП, принимающих препараты леводопы) - в результате обследования их состояния полости рта и тканей пародонта  у 84,4%, был диагностирован ХГП средней и тяжелой степени тяжести, что достоверно (р<0,05) выше, чем у первичных пациентов. Полная  вторичная адентия  в этой группе обследованных наблюдалась у 15,6% пациентов.

В данной группе больных,  как в мягком зубном налете, так и на поверхности языка, были верифицированы те же виды представителей микрофлоры: стафилококки, стрептококки, клебсиеллы, энтерококки, синегнойная палочка, но в меньшей степени обсеменённости (до 1,2-1,4 раз).

Интересная разница в контаминации прослеживалась при  анализе обсемененности стафилококками: золотистый  и гемолитический  стафилококки в налете прослеживались в количестве 2 lg КОЕ/там только у 13,4% пациентов, в отличие от больных из группы №1 (там стафилококки встречались у 42,85% пациентов с более высокой плотностью) (р<0,05). И на  поверхности языка. где у 23,5% пациентов  стафилококки отмечались с плотностью 2 lg КОЕ/там  (р<0,05),  можно проследить ту же разницу по сравнению с группой №1 с первичными пациентами. Стафилококк эпидермальный не верифицирован в этой группе пациентов ни в микробиоценозе мягкого зубного налета, ни дорсальной поверхности языка.

Однако в изотопе зубного налета в небольших плотностях (1,5lg КОЕ/там) наблюдалась кишечная палочка, клебсиелла, нейсерии и только у 13,4% пациентов, на языке эти микроорганизмы прослеживалось у 17,64% пациентов, плотность которых составила 1,7 lg КОЕ/там. По сравнению с группой №1 отмечается та же динамика - уменьшение уровня колонизации.

Увеличение степени высеваемости отмечается в этой группе пациентов среди стрептококковой микрофлоры: ß-гемолитический, пиогенный стрептококки встречались в  зубном налете у 66,7% пациентов при 3,4 lg КОЕ/там, (р>0,05). (в группе №1 - 57,14% с аналогичной плотностью). И на поверхности языка стрептококки были в таком же количестве, но с меньшей встречаемостью (у 58,8% пациентов, в группе №1 - 62,5%). Зеленящие  стрептококки также встречаются реже, как в зубном налете (у 26,7 % пациентов, в отличие от  группы №1 71,42%), так и в микробиоценозе языка (35,3% и 62,5% соответственно), а  плотность  одинакова.

У 26,7% пациентов с плотностью 2,25 lg КОЕ/там наблюдалась Cаndidа: albicans в биотопах зубного налета (в группе №1 этот показатель составил 57,14% при  4 lg КОЕ/там), а у 41,18%  с плотностью 2,85 lg КОЕ/там рост Cаndidа: albicans выявлен в биотопах дорсальной поверхности языка (группа №1 - 12,5% при 2 lg КОЕ/там). Анаэробы типа бифидобактерии составили  плотность 2-2,25 lg КОЕ/там в зубном налете у 28,7% пациентов,  на языке  у 29,4% пациентов (группа №1 - 3 lg КОЕ/там у 28,57%  в мягком налете,  на  налете языка - у 12,5%   в количестве 2 lg КОЕ/там).

В результате исследования выявлено, что в группе обследованных больных №2 в биосубстрате мягкого зубного налета достоверно снизилась высеваемость Cаndidа albicans, и достоверно снизилась их плотность. Мы это можем объяснить тем, что при назначении препаратов левадопы уменьшается тремор и дискинезия конечностей [8], и гигиенический уход за полостью рта становится более адекватным.. Однако на дорсальной поверхности языка картина колонизации Cаndidа  другая: встречается она  достоверно чаще у 41,18%, с плотностью  2,85 lg КОЕ/там.  Может быть, это связано как с тем, что у данного контингента обследованных нет навыков гигиенического ухода за поверхностью языка, так и с особенностями состава потребляемой пищи (преобладание большого количества углеводов, молочнокислых продуктов в рационе) [6].

Исследуя уровень доминирующих условно-патогенных микроорганизмов полости рта у пациентов с БП, клинически было установлено, что у 8 пациентов диагностируется ХГП лёгкого течения (глубина пародонтального кармана - 2,4±0,6 мм, индекс Грина-Вермильона составил в среднем 1,9±0,4 балла, PI Russel 1,8±0,7 балла). Это составило 21,1% от всех обследованных пациентов, у них пародонтопатогенные штаммы выделены не были.

У 11 пациентов выявлен  ХГП средней степени тяжести (глубина пародонтального кармана - 4,8±1,3 мм, индекс Грина-Вермильона в среднем 2,1±0,9 балла, PI Russel - 3,6±1,2 балла). В этой группе наблюдались следующие особенности колонизации  пародонтопатогенными штаммами бактерий. В 10,5 % случаев (4 пациента) были выделены 2 условно-патогенных вида организмов (Tannerella forsythensis с Prevotella intermedia), в 18.4% (7 пациентов) - 3 вида организмов (Аcinobаcillus аctinomycetemcomitаns, Tannerella forsythensis, Treponema denticola, или же Tannerella forsythensis, Prevotella intermedia и  Porphyromonas gingivalis,).  Отметим, что Tannerella forsythensis у данных обследованных встречалась всегда.  В 7,9% (3 пациента) верифицировались 4 вида патогенных микроорганизмов,  в 42,1% (у 16 пациентов) определены все 5 видов пародонтопатогенных организмов. Клинически  пациентам из этой группы был поставлен диагноз ХГП тяжёлого течения (глубина пародонтального кармана в среднем 6,9±2,1 мм, индекс Грина-Вермильона составил 3,3±1,0 балла,  PI Russel - 3,6±0,9 балла). Более того, у обследованных из двух последних групп  зондировались фуркационные дефекты костной ткани как 2, так 3 классов, в основном в области моляров верхней и нижней челюсти. Итак, анализ качественного состава пародонтопатогенного биоценоза полости рта у пациентов БП определил доминирующую микрофлорой пародонтального  кармана - это бактерии Tannerella forsythensis (встречались почти у 73,6% пациентов). Степень высеваемости Porphyromonas gingivalis и Prevotella intermedia - 63,2%, а Аcinobаcillus аctinomycetemcomitаns - 60,5%. Treponema denticola высевалась у 55,3% пациентов и только в ассоциациях из 3-5 бактерий.

В результате исследования микробного пейзажа биотопов полости рта установлено, что у первичных пациентов с БП и леводопу получающих пациентов с БП микрофлора отличается, как качественно, так и количественно. Микробная контаминация полости рта пациентов, как только они  начинают принимать леводопу, уменьшается. Но необходимо отметить, что не получено корреляционной зависимости между степенью гигиены полости рта и наличию в микробиоценозе некоторых представителей условно-патогенной микрофлоры. С одной стороны, при назначении леводопотерапии у пациентов БП уменьшается тремор, ригидность, гипокинезия, что способствует нормализации гигиенического ухода за полостью рта; меняется компонентный состав потребляемой пищи, она становится разнообразной, в т.ч. и по консистенции, что, безусловно, активирует жевательную мускулатуру, нормализуется слюноотделение, меняется микроэлементный состав слюны [5]. Но раннее проведёнными исследованиями различными авторами показано, что существует зависимость, причем достоверная, между гигиеническим уровнем полости рта и картиной микробного пейзажа области пародонтальных карманов [2, 9]. Нами же выявлена сильная положительная корреляционная зависимость только между «глубиной пародонтального кармана» и «частотой выявляемости пародонтопатогенных штаммов», r=0,785. Несмотря на то, что мы регистрировали неудовлетворительный и плохой уровень гигиены полости рта у всех пациентов, включенных в исследование, частота выявляемости вышеуказанных штаммов   пародонтопатогенной микрофлоры при этом была разной. В данном случае, все-таки имеет значение условия анаэробиоза, всегда возникающие при наличии ХГП 2-3 степени с глубокими пародонтальными карманами, что является необходимой средой для вегетирования  пародонтопатогенов [1, 8]. Данные, полученные нами в результате работы, необходимо использовать для обоснования назначения антибиотиков широкого спектра действия при лечении хронического генерализованного пародонтита, в том числе пациентов,  отягощенных БП.

Рецензенты:

Кабирова М.Ф., д.м.н., профессор кафедры терапевтической стоматологии с курсом ИПО ГБОУ ВПО «Башкирский государственный медицинский университет» Минздрава России, г. Уфа;

Ксембаев С.С., д.м.н., профессор кафедры детской стоматологии Казанского государственного медицинского университета, г. Казань.


Библиографическая ссылка

Рувинская Г.Р., Залялова З.А. МИКРОБНЫЙ ПЕЙЗАЖ ПОЛОСТИ РТА У ПАЦИЕНТОВ С БОЛЕЗНЬЮ ПАРКИНСОНА // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 3. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=17411 (дата обращения: 20.05.2022).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074