Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Терентьева Н.Е. 1 Илиев К.И. 1 Кобелева Т.А. 1 Сичко А.И. 1

---

1 ГБОУ ВПО «Тюменская Государственная медицинская академия» Министерства здравоохранения Российской Федерации

Приведены результаты исследований по установлению оптимальных условий анализа новой лекарственной формы «Пасказоль», изготовленной на основе протекторного, обладающего противомикробным действием геля «Тизоль», обеспечивающего ее стерильность и длительный срок хранения. Предложен высокочувствительный (открываемый минимум составляет 0,617 мкг/мл) спектрофотометрический метод, позволяющий анализировать натрия пара-аминосалицилат при длине волны 300 нм с относительной ошибкой ±1,43 %. Приведены методики количественного определения фармакологически активного вещества в мазе «Пасказоль» способом калибровочного графика и сравнения со стандартом. В качестве объемного метода предложено нитритометрическое титрование, позволяющее количественно определять натрия пара-аминосалицилат в лекарственной форме с относительной погрешностью ± 1,10 %. Разработанные способы количественного определения натрия пара-аминосалицилата в «Пасказоли» найдут применение в работе контрольно-аналитических служб фармацевтических предприятий.

Статья в формате PDF

206 KB

натрия пара-аминосалицилат

тизоль

фармацевтический анализ

спектрофотометрия

нитритометрия

1. Булатов М.И. Практическое руководство по фотометрическим методам анализа / М.И. Булатов, И.П. Калинкин. – Ленинград: Химия, 1986. – 432 с.

2. Государственная фармакопея Российской Федерации. – XII изд. – М.: Научный центр экспертизы средств медицинского применения, 2008. – 704 с.

3. Государственная фармакопея СССР. – X изд. – М.: Медицина, 1968. – 1080 с.

4. Захарова А.А., Кобелева Т.А., Сичко А.И. Спектрофотометрический анализ натрия диклофенака и лидокаина гидрохлорида в новой мягкой лекарственной форме «Диклизоль» // Казанская наука. Сборник статей. – Казань, 2010. – № 3. – С. 239-244.

5. Мельник К.Л., Сичко А.И., Кобелева Т.А. Спектрофотометрический анализ трансдермальной лекарственной формы «Новоанезоль» // Материалы Евразийского Конгресса с международным участием «Медицина, фармация и общественное здоровье». – Екатеринбург, 2013. – С. 80-85.

6. Новые технологии в медицине. Тизоль: сб. науч. статей /УГМА; [под ред. В.И. Шилко]. – Екатеринбург: УГМА, 2003. – 152 с.

7. Сичко А.И., Кобелева Т.А. Анализ препаратов с противовоспалительным и местноанестезирующим действием в мягких лекарственных формах с тизолем. // Методические указания. Ч. 2. Количественный анализ. – Тюмень, 2013. – 22 с.

8. Смагина Т.А., Бекетов Б.Н. Перспективы использования в медицине аквакомплексаглицеросольвата титана и препаратов на его основе // Бюллетень сибирской медицины. – 2006. – Прил. 2. – С. 131-132.

9. Фармакопейная статья предприятия (ФСП) 42-3157-06. Тизоль – гель для местного и наружного применения.

Новая лекарственная форма «Пасказоль» изготовлена на основе протекторного, противомикробного геля «Тизоль», обеспечивающего ее стерильность и длительный срок хранения [6]. Данную мазь предполагается применять в медицинской практике как противотуберкулезное средство при лечении детей. Она будет востребована при желудочно–кишечных расстройствах (рвота, тошнота, боли в животе), наблюдении аллергических реакций при приеме больших доз натрия пара-аминосалицилата внутрь [8, 9]. Поэтому актуальной целью является разработка способов анализа лекарственной формы, позволяющих устанавливать качество ее изготовления.

Материал и методы исследования. В исследованиях использовали мазь, содержащую натрия пара-аминосалицилата 0,5 г и тизоля 9,5 г. Для разработки взаимозаменяемых методик количественного определения натрия пара-аминосалицилата в лекарственной форме применяли физико-химический спектрофотометрический метод и объемное нитритометрическое титрование.

Результаты исследования и их обсуждение. Для разработки спектрофотометрического способа количественного определения лекарственного препарата в изучаемой прописи проводили математическую оценку чувствительности анализа натрия пара-аминосалицилата через открываемый минимум, который устанавливали по углу наклона калибровочного графика [1]. Для расчета чувствительности воспользовались теоремой о конечных  превращениях Ж.Л. Лагранжа, согласно которой можно записать:

A(C_max) - A(C_min) = A(C_max - C_min).

Принимая во внимание, что оптическая плотность раствора зависит от концентрации в пределах отрезка C_max - C_min,  после преобразований получили выражение:  , где b – угловой коэффициент, который находится по формуле.

Во избежание субъективного характера в определении чувствительности анализа при нахождении углового коэффициента использовали не сам график, а его аналитическое выражение. Исследования проводили с помощью спектрофотометра СФ-26 при λ = 300 нм.

Цифры, приведенные в таблице 1, свидетельствуют о том, что чувствительность анализа натрия пара-аминосалицилата, выраженная через открываемый минимум, равна 0,617мкг/мл при Аmin = 0,02. Следовательно, спектрофотометрию в УФ-области спектра можно использовать для количественного определения лекарственного препарата в мази.

Таблица 1

Результаты расчёта чувствительности анализа

По предварительным исследованиям установлено, что для измерения значений оптических плотностей оптимальной величиной служит длина волны 300 нм, при спектрофотометрировании раствора изучаемого объекта, необходимо отделять мазевую основу. По фармакопейной статье предприятия [9] тизоль образует мутные растворы с 95 % спиртом этиловым в соотношении от 1:1 до 1:3. Это соответствует малой или очень малой растворимости по ОФС 42-00490-07 [2], поэтому лекарственное вещество, содержащееся в мази, растворяли в этаноле, получали фильтрат и проводили количественное определение. Концентрацию натрия пара-аминосалицилата находили способом калибровочного графика и сравнения со стандартом.

Для построения графика 0,03 г лекарственного препарата растворяли в 30 мл этанола (раствор А). Далее, к 2 мл полученного раствора прибавляли 18 мл этанола (раствор В). К 0,5; 1,0; 1,5; 2.0; 2,5 мл раствора В доливали этиловый спирт до получения общего объема  жидкости 10 мл и измеряли оптические плотности стандартных растворов с помощью спектрофотометра при длине волны 300 нм (l=10мм). Раствором сравнения служил этанол. По полученным данным опытов строили калибровочный график в координатах: А-С, мкг/мл.

Рис 1. График зависимости оптической плотности от концентрации раствора натрия пара-аминосалицилата

Калибровочный график выражается прямой линией, проходящей через начало координат. Это свидетельствует о подчинении растворов натрия пара-аминосалицилата  основному закону светопоглощения в пределах концентраций 1,0–25,0 мкг/мл. Прямо пропорциональная зависимость оптической плотности от содержания лекарственного препарата позволяет его анализировать спектрофотометрически в мягкой лекарственной форме.

Количественное определение натрия пара-аминосалицилата в субстанции проводили аналогично построению калибровочного графика, используя для фотометрирования конечную кратность разбавления растворов V1=10 мл и V2  = 1,0 мл.

Массовую долю натрия пара-аминосалицилата рассчитывали по формуле:

где: С(х) – масса лекарственного препарата, найденная по калибровочному графику, мкг/мл;

Vобщ  – объем этанола, в  котором растворена навеска препарата (30мл), мл;

V1,V2 – объемы пипеток при разбавлении;

а(преп) – навеска лекарственного препарата, г.

Для получения достоверных результатов анализа провели шесть параллельных опытов, измерили оптические плотности растворов натрия пара-аминосалицилата с концентрацией лекарственного препарата около 10 мкг/мл и полученные данные статистически обработали  (табл. 2). Из таблицы видно, что относительная ошибка анализа составляет ± 1,44  %.

Таблица 2

Результаты спектрофотометрического анализа натрия пара-аминосалицилата

Проведенные исследования позволили разработать способ количественного определения натрия пара-аминосалицилата в «Пасказоли». Методика: точную навеску мази (около 0,1 г) помещают в стаканчик, прибавляют 50 мл этанола (раствор А), перемешивают до получения дисперсной системы и фильтруют смесь через складчатый фильтр, отбрасывая первую порцию фильтрата. Далее, 5 мл полученного раствора А переносят в мерную колбу ёмкостью 25 мл, доводят объём колбы этанолом до метки (раствор В). К 5 мл раствора В прибавляют 5 мл этанола и измеряют оптическую плотность смеси с помощью спектрофотометра СФ-26 при длине волны 300 нм (l = 10мм).  В качестве раствора сравнения используют этиловый спирт.

Массу и массовую долю лекарственного препарата в мази находят по формулам:

где: а(мази) – навеска мази, взятая на анализ, г;

Р – масса лекарственной формы, г ;

Vк,Vп  – объем мерной колбы(25 мл) и пипетки (5 мл);

Vобщ  – объем этанола, в  котором растворена навеска мази (50 мл);

V1,V2 – объемы растворов при разведении (10мл и 5мл, соответственно).

Результаты анализа приведены в таблице 3.

Таблица 3

Результаты спектрофотометрического определения натрия пара-аминосалицилата

способом калибровочного графика

Для достоверности анализа осуществляли расчет концентраций лекарственного препарата способом сравнения со стандартом. При проведении анализа использовали исходный стандартный раствор, содержащий 0,001 г/мл лекарственного препарата. При исследовании натрия пара-аминосалицилата в мази брали 5 мл полученного раствора и поступали аналогично методике построения калибровочного графика. Массу лекарственного препарата в мкг/мл и массовую долю в процентах рассчитывали по формулам: А(ст)/А(х) = m(ст)/m(х)

,   

где: m(ст) – масса стандарта в фотометрируемом  растворе (10мкг/мл);

А(ст) – оптическая плотность стандартного раствора:

А(х) – оптическая плотность исследуемого раствора.

Результаты анализа натрия пара-аминосалицилата по стандарту приведены в   таблице 4.

Таблица 4

Результаты анализа натрия пара-аминосалицилата способом сравнения со стандартом

Согласно полученным данным, приведенных в таблицах 3 и 4, содержание натрия пара-аминосалицилата в лекарственной форме «Пасказоль» находится в пределах 0,454–0,468 г при расчете способом калибровочного графика, 0,459–0,472 г – по сравнению со стандартом. Содержание соответствует допустимым отклонениям, представленным в приказе МЗ РФ от 16.10.1997г №305 «О нормах отклонений допустимых при изготовлении лекарственных средств и фасовке промышленной продукции в аптеках». Следовательно, спектрофотометрию, как современный физико-химический метод [4, 5], рационально применять для количественного определения натрия пара-аминосалицилата в мази с тизолем.

При разработке способа анализа натрия пара-аминосалицилата в мягкой лекарственной форме нитритометрическим титрованием учитывали его физические и химические свойства. По Государственной фармакопее СССР X издания [3] лекарственный препарат очень легко растворим в воде, этаноле и глицерине, практически нерастворим в эфире и хлороформе. Поэтому готовили искусственную смесь с точной концентрацией ингредиентов согласно прописи, заменяя основу тизоль  на этанол: натрия пара-аминосалицилата  0,5 г и спирта этилового 95 % до 10,0.

Для проведения прямого нитритометрического титрования натрия пара-аминосалицилата  готовили исходный 0,1 моль/л раствор нитрита натрия. При выполнении анализа точную массу лекарственного препарата (около 0,75 г) растворяли в 15 мл этанола. К 1 мл полученного раствора прибавляли 5–10 мл хлороводородной кислоты, 0,5 г бромида калия, 4 капли тропеолина 00, 2 капли метиленового синего, и полученную смесь медленно титровали из микробюретки раствором нитрита натрия по методике, приведенной в Государственной фармакопее Российской Федерации (ОФС 42-0054-07), до перехода окраски раствора из фиолетовой в сине-зелёную. Массовую долю лекарственного препарата в процентах находили по формуле:

где:Vобщ – объем раствора, в котором растворена навеска лекарственного препарата (15 мл);

t(NaNO2/преп) – титр нитрита натрия по натрия пара- аминосалицилату (0,02112г/мл);

V(NaNO2) – объём нитрита натрия, мл;

K(NaNO2) – поправочный коэффициент к титрованному раствору;

а(преп) – навеска препарата, взятая на анализ, г;

Vп – объем раствора, взятый на титрование (1 мл).

Таблица 5

Результаты нитритометрического анализа натрия пара-аминосалицилата   

Для получения достоверных результатов предлагаемого способа анализа провели шесть параллельных титрований, и полученные данные статистически обработали (табл. 5). Из таблицы видно, что относительная ошибка количественного определения равна ±1,10 %. Это дает основание проводить прямое нитритометрическое титрование натрия пара-аминосалицилата  в лекарственной форме «Пасказоль».

Тизоль растворяется в разбавленных растворах минеральных кислот и оснований, мало растворим в этаноле, поэтому натрия пара-аминосалицилат, содержащийся в мази, и основу растворяли в хлороводородной кислоте и титровалилекарственный препарат аналогично анализу его в растворе субстанции. Методика: около 0,5 г (точная масса) мази переносят в стакан, добавляют 15 мл воды очищенной, 15 мл 8 % (или 2 моль/л)  раствора хлороводородной кислоты, перемешивают жидкость до растворения натрия пара-аминосалицилата и основы, добавляют индикаторы, бромид калия. Затем медленно титруют из микробюретки 0,1 моль/л раствором нитрита натрия согласно способу, приведенному при анализе лекарственного препарата в искусственной смеси до перехода окраски исследуемого раствора с фиолетовой в сине-зелёную. Как показали экспериментальные данные, при титровании такой же навески тизоля в аналогичных условиях затрачивается одна-три капли раствора нитрита натрия. Поэтому данный объём титранта может повлиять на результаты анализа. Расчет массовой доли натрия пара-аминосалицилата в процентах и массы в лекарственной прописи находят по формулам:

где: а(мази) – навеска мази, взятая на анализ, г;

V(NaNO2) – разница объемов титранта, затраченных на титрование мази и тизоля, мл;

Р – масса лекарственной формы (10,0 г).

Результаты анализа натрия пара-аминосалицилата прямым нитритометрическим титрованием в мази «Пасказоль» приведены в таблице 6.

Таблица 6  

Результаты нитритометрического анализа натрия пара-аминосалицилата  в лекарственной форме «Пасказоль»

Из таблицы видно, что содержание лекарственного препарата в прописи соответствует допустимым нормам отклонений по нормативной документации.

Заключение. Разработанные способы количественного определения натрия пара-аминосалицилата в мази спектрофотометрически и прямым нитритометрическим титрованием, достаточно точны, просты в выполнении, не требуют дорогостоящей аппаратуры, в объемном методе – отделения мазевой основы [7], поэтому их можно рекомендовать для фармацевтического анализа новой лекарственной формы «Пасказоль».

Рецензенты:

Нохрин Д.Ф., д.ф.н., профессор, заведующий кафедрой фармацевтической химии ГБОУ ВПО «ТюмГМА» МЗ РФ, г. Тюмень.

Кныш О.И., д.ф.н., профессор, заведующая кафедрой управления и экономики фармации ГБОУ ВПО «ТюмГМА» МЗ РФ, г. Тюмень.

Библиографическая ссылка