Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,791

ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЖЕЛУДКА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГАСТРОДУОДЕНИТЕ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ CATT-ПОЛИМОРФИЗМА ФАКТОРА ТОРМОЖЕНИЯ МИГРАЦИИ МАКРОФАГОВ

Дудникова Э.В. 1 Чернова М.С. 1 Зазьян В.Г. 1 Беседина Е.А. 1 Бадьян А.С. 1 Зазьян Э.В. 1 Азиева Н.У. 1
1 ГБОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Проведен анализ взаимосвязи генного полиморфизма фактора ингибиции миграции макрофагов (МИФ) и морфологических изменений в слизистой оболочке желудка (СОЖ). Наиболее часто встречающимся был 6/6 CATT-генотип.Увеличение числа повторений CATT на 1 приводит к повышениюриска заболевания хроническими воспалительными заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишечного тракта (ЖКТ)(в среднем в 3,8 раза), формированиюгастрита высокой степени активности (в 2,7 раза), развитию атрофических (в 2,3 раза), дистрофических (2,5 раза) изменений СОЖ. Повышение частоты повторов в генотипе МИФсопряжено с развитием тяжелых морфологических изменений слизистой оболочки желудка и способствует повышению риска инфицирования Helicobacterpylori (H. pylori). Генотип 7/7 был ассоциирован с наличием умеренной степени активности гастрита, H. pylori «++», развитием атрофических, дистрофических, склеротических изменений СОЖ, и, напротив, при числе повторений 5/5 указанные проявления отсутствовали. Полученные в нашем исследовании закономерности свидетельствуют о высокой значимости МИФ в качестве биомаркера тяжелого течения и неблагоприятного исхода H. pylori-ассоциированного гастрита.
дети
Helicobacter pylori
хронический гастрит
фактор ингибиции миграции макрофагов (МИФ)
1. Водопьянов А.С., Дудникова Э.В., Дергоусова М.С., Бадьян А.С. Роль фактора, ингибирующего миграцию макрофагов, в хронизации патологического процесса (обзор литературы)//Медицинский вестник Юга России. –2013. -№3.
2. Маев И.В., Голубев Н.Н. Принципы диагностики и рациональной фармакотерапии хронического гастрита // Русский медицинский журнал. Болезни органов пищеварения.– 2008.– № 28. – С. 1702–1706.
3. Маев И.В., Самсонов А.А., Андреев Н.Г., Кочетов С.А. Что мы знаем о хроническом гастрите //Фарматека. – 2011. – Т. 10. – С. 10-17.
4. Макаренко Е.В. Генетические факторы патогенности Helicobacterpylori //Иммунопатология, аллергология, инфектология. – 2004. – №. 3. – С. 78-83.
5. Цветкова Л.Н., Горячева О.А., Цветков П.М. и др. Гастроэнтерологическая патология у детей: патоморфоз заболеваний и совершенствование методов диагностики на современном этапе //Актуальные проблемы абдоминальной патологии у детей : материалы XVIII Конгресса детских гастроэнтерологов России и стран СНГ. – 2011. – С. 5-8.
6. He X.X., Yang J., Ding Y.W., Liu W., Shen Q.Y., Xia H.H. Increased epithelial and serum expression of macrophage migration inhibitory factor (MIF) in gastric cancer: potential role of MIF in gastric carcinogenesis //Gut.- 2006.
7. Mitchell R.A., Liao H., Chesney J., Fingerle-Rowson G., Baugh J., David J. et al. Macrophage migration inhibitory factor (MIF) sustains macrophage proinflammatory function by inhibiting p53: regulatory role in the innate immune response//Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. – 2002.
8. Shiroeda H., Tahara T., Shibata T., Nakamura M.et al. Functional promoter polymorphisms of macrophage migration inhibitory factor in peptic ulcer diseases//Int. J.MolMed.– 2010.
9. Simons D., Grieb G., Hristov M., Pallua N., Weber C., Bernhagen J. et al. Hypoxia-induced endothelial secretion of macrophage migration inhibitory factor and role in endothelial progenitor cell recruitment //J. Cell. Mol. Med. - 2010.
10. Yamaoka Y. Mechanisms of disease: Helicobacter pylori virulence factors//Nat. Rev.Gastroenterol.Hepatol. –2010. – №7 (11). – С.629–641.

Заболевания верхних отделов пищеварительного тракта занимают ведущее место в гастроэнтерологической патологии детского возраста, среди которых хронический гастрит является самым распространенным и встречается более чем у половины населения [3].  Также в последнее десятилетие отмечен значительный рост патологии пищевода, квота которых в определенные возрастные периоды достигает 30-40% от всех болезней верхних отделов ЖКТ. Язвенная болезнь двенадцатиперстной кишки (ЯБДК) стала диагностироваться несколько реже и сегодня составляет 7-8% [5]. 

Из этиологических факторов ведущее значение придают бактерии H. pylori. Инфицирование данным микроорганизмом происходит у большинства больных уже в детском или подростковом возрасте [3]. Существуют доказательства, что H. pylori является ключевым фактором в этиологии различных желудочно-кишечных заболеваний: от бессимптомного хронического активного гастрита до язвенной болезни, аденокарциномы и MALT-лимфомы желудка [2; 8; 10].

Несмотря на значительные успехи, достигнутые в изучении хеликобактерной инфекции, до сих пор остается неизвестным, почему у одних инфицированных пациентов развивается хронический гастрит, язвенная болезнь или рак желудка, а другие являются бессимптомными носителями данной бактерии [4].

С развитием молекулярной генетики стало очевидным, что предрасположенность к мультифакториальным заболеваниям, эффективность и безопасность их лечения в значительной степени определяются специфичным набором полиморфных вариантов генов. Полиморфизм представляет варианты аллелей, которые встречаются относительно часто среди популяции и в целом связаны с отклонениями в экспрессии или функции ферментов.

Одним из перспективных научных направлений является изучение генного полиморфизма миграции ингибирующего фактора макрофагов. МИФ был впервые описан в  60-е годы как один из первых цитокинов, продуцируемый активированными Т-лимфоцитами и способный тормозить миграцию макрофагов in vitro МИФ вырабатывается не только Т-активированными лимфоцитами, но и может экспрессироваться макрофагами, моноцитами, эпителиальными и дендритными клетками. МИФ содержится в цитоплазме клеток и быстро высвобождается при гипоксии, пролиферативной реакции или воздействии инфекционного фактора [1; 9].

С иммунологической точки зрения МИФ обладает плейотропным действием - его можно охарактеризовать как один из основных провоспалительных цитокинов, обладающих отрицательным хемотаксическим эффектом, благодаря чему происходит мобилизация и аккумуляция фагоцитирующих клеток в очаге воспаления.

Уровень и активность данного цитокина зависит от полиморфизма гена, кодирующего МИФ. В связи с чем интересным является изучение CATT-полиморфизма МИФ: данный тетрануклеотидный повтор (CATT) был обнаружен в нуклеотидной последовательности гена, кодирующего МИФ с числом повторений от 5 до 8 раз. При носительстве некоторых аллелей синтез, высвобождение и активность МИФ при определенных условиях значительно повышается.

Повышение уровня МИФ приводит к инфильтрации слизистой желудка воспалительными клетками, в том числе макрофагами, Т- и В- лимфоцитами, увеличению экспрессии  ФНО, IL-8, молекулы внутриклеточной адгезии 1 (ICAM 1), синтазы оксида азота, способствуя более тяжелым поражениям слизистой и язвообразованию.  Показано, что МИФ - один из инициирующих факторов, «переключающих» хроническое воспаление на канцерогенез, вследствие нарушения  баланса между клеточной пролиферацией и апоптозом [7].

Существует взаимосвязь указанного полиморфизма МИФ с язвенной болезнью двенадцатиперстной кишки: при наличии аллеля 7/7 язвенная болезнь развивается в 6 раз чаще, а также повышается риск возникновения атрофии слизистой оболочки желудка (отношение шансов 9,69 при 95% уровне значимости) [8].

He X.X., Yang J., Ding Y.W. et. all (2006) в своем исследовании показали, что генный полиморфизм МИФ способствует различным вариантам течения H. pylori-инфекции и может стать биомаркером исхода  H. pylori-ассоциированного гастрита [6].

Цель исследования. Выявить взаимосвязь между генным полиморфизмом МИФ, наличием H. pylori и характером морфологических изменений СОЖ у детей с хроническими воспалительными заболеваниями верхнего отдела желудочно-кишечного тракта (ЖКТ).

Материалы и методы исследования. В проведенном исследовании приняли участие 96 детей. Основную клиническую группу составили 75 детей, имеющих хронические воспалительные заболевания верхнего отдела ЖКТ (хронический гастрит, гастродуоденит, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (ГЭРБ)).  Верификация диагноза проводилась с помощью эзофагогастродуоденоскопии с прицельной биопсией слизистой оболочки антрального отдела желудка, гистологического исследования биоптатов. Диагностика H. pylori проводилась с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР), уреазного теста и бактериоскопического метода в биоптатах СОЖ, а также с помощью иммуноферментного анализа (ИФА) в сыворотке крови. Группа контроля - 21 ребенок (I и II А группы здоровья).

Критерии включения в исследование: 1. Возраст 8-14 лет. 2. I - III стадия полового развития. 3. Самостоятельно и родители подписали информированное согласие на участие в исследовании. 4. Наличие хронического воспалительного заболевания верхнего отдела пищеварительного тракта (гастрит, гастродуоденит, гастроэзофагеальная рефлюксная болезнь (ГЭРБ)) в стадии клинико-эндоскопического обострения для детей общеклинической группы. 5. I и II А группа здоровья для группы контроля.

Критерии исключения: 1. Нежелание дать информированное согласие на участие в исследовании. 2. Врожденные заболевания органов ЖКТ. 3. Наличие у пациента клинически значимых сопутствующих заболеваний, требующих активного лечения. 4. Наличие противопоказаний для проведения процедур, входящих в комплекс обследования.

Кратность повторов в факторе ингибиции миграции нейтрофилов определяли на базе ФКУЗ «Ростовский противочумный институт» Роспотребнадзора при помощи ПЦР. Материал для исследования - соскоб со слизистой оболочки щеки. Прямой праймер имел структуру TGC TAT GTC ATG GCT TAT CTT CTT, обратный - CAG GCA TAC AAG AGA CAT TGA CTA A.

Статистическая обработка данных проводилась с использованием критерия χ2, точного теста Фишера для таблиц сопряжённости (ТТФ) и расчетом коэффициентов ранговой корреляции (Тау Кендалла - τ). Критический уровень статистической значимости при проверке нулевых гипотез p = 0,01. Для проверки статистической значимости различий числа повторений МИФ между группами использовался критерий Вилкоксона-Манна-Уитни (ВМУ).

Результаты исследования и их обсуждение

Распределение детей общеклинической группы по стадиям полового развития и полу было следующим: в I СПР находились 16 человек, из них 8 девочек и 8 мальчиков, во II - 30 (14 девочек и 16 мальчиков), в III - 29 человек (17 и 12 соответственно).

Этот возрастной период является критическим периодом формирования гастроэнтерологической патологии, который связан с перестройкой и некоторой дисфункцией регуляторных систем, в особенности эндокринной и вегетативной нервной системы, что делает целесообразным обследование детей именно этой возрастной группы. Общеклиническая и контрольная группы сопоставимы по возрасту, полу и стадиям полового развития.

На основании данных комплекса клинико-лабораторных и инструментальных методов исследования, включая ЭГДС с прицельной биопсией антрального отдела желудка, ГЭРБ диагностирована у 92% обследуемых общеклинической группы, среди которых у большинства детей осложнена рефлюкс-эзофагитом I степени в 90%, II степени в 10% случаев.

Характерной особенностью было сочетанное поражения желудка и 12-перстной кишки. Катаральный гастродуоденит был выявлен у 87%, а эрозивный - у 13% детей. Язвенная болезнь луковицы 12-перстной кишки диагностирована у 2 детей, что отражает общую тенденцию снижения частоты язвенных поражений.

При анализе полиморфизма МИФ обнаружено, что наиболее часто встречающимся был 6/6 CATT-генотип, выявленный у 49,3% обследуемых. Следует отметить, что 8/8 и 8/X аллели в нашем исследовании не встретились ни у одного пациента. 

Согласно критерию Манна-Уитни, разница в числе повторений CATT между общеклинической и контрольной группами является статистически высоко значимой (p = 0,004). Логистическая регрессия также подтверждает высокую значимость генотипа МИФ (p = 0,002, OR = 3,8 при 95% уровня значимости). Таким образом, можно говорить о повышении шансов заболевания хроническими воспалительными заболеваниями верхнего отдела ЖКТ при увеличении числа повторений CATT (в среднем, в 3,8 раза при увеличении на одно повторение).

При оценке CATT-полиморфизма МИФ в зависимости от нозологической формы в общеклинической группе было отмечено, что ГЭРБ II степени ассоциирована с более высоким числом повторений МИФ, отмечена средней силы значимая связь (τ = 0,28, p<0,005). Также выявлена  средней силы положительная статистически значимая (τ = 0,40, p< 0,0001) связь между CATT-полиморфизмом и развитием эрозивного гастродуоденита; так, при увеличении значения МИФ чаще регистрировались эрозивные изменения в СОЖ (МУ: р=0,001) и 12-перстной кишки (МУ: р<0,05).

Нами установлено наличие статистически значимой прямой зависимости между генотипом МИФ и наличием H. pylori (τ = 0,38, p < 0,0001). При рассмотрении данных CATT-полиморфизма и морфологических изменений обнаружена средней силы прямая связь (τ = 0,39, р<0,0001). При увеличении числа повторений указанного полиморфизма возрастала степень обсемененности H. pylori и активность воспаления.

Проведенное нами исследование показывает наличие прямой связи между частотой повторов МИФ и наличием атрофических изменений в слизистой (τ=0,23, р<0,005).  А также выявлена  прямая статистически значимая связь между числом повторений МИФ и наличием склеротических (τ=0,30, р<0,005), а также дистрофических изменений СОЖ (τ=0,28, р<0,005).

Генотип 7/7 CATT был ассоциирован с наличием умеренной степени активности гастрита, H. pylori «++», развитием атрофических, дистрофических, склеротических изменений СОЖ, и, напротив, при числе повторений 5/5 указанные проявления отсутствовали.

Анализ значений отношений шансов (odds ratio) показывает, что увеличение числа повторений на 1 приводит к развитию высокой степени активности гастрита в 2,7 раза (p=0,039, OR = 2,7 при 95% уровня значимости), атрофии желез в 2,3 раза (p=0,026 при 95% уровня значимости), дистрофических изменений слизистой в 2,5 раза (p=0,02 при 95% уровня значимости).

Атрофические, дистрофические, склеротические изменения СОЖ являются предпосылкой для развития дисрегенераторных изменений, метаплазии, дисплазии, резко увеличивающих риск развития рака желудка. В связи с чем полученные в нашем исследовании закономерности свидетельствует о высокой значимости МИФ в качестве биомаркера тяжелого течения и неблагоприятного исхода H. pylori-ассоциированного гастрита, а также скрининг МИФ генотипа в начале заболевания может выявить пациентов, нуждающихся в более эффективном терапевтическом подходе.

Вывод: увеличение числа повторений CATT сопряжено с развитием более тяжелых морфологических изменений слизистой оболочки желудка, а также способствует повышению риска инфицирования Helicobacter pylori.

Рецензенты:

Афонин А.А., д.м.н, профессор, заместитель директора по научной работе ФГБУ «Научно-исследовательский институт акушерства и педиатрии» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону.

Чепурная М.М., д.м.н, профессор кафедры педиатрии с курсом неонатологии ГБОУ ВПО «Ростовский государственный медицинский университет» Министерства здравоохранения Российской Федерации, г. Ростов-на-Дону.


Библиографическая ссылка

Дудникова Э.В., Чернова М.С., Зазьян В.Г., Беседина Е.А., Бадьян А.С., Зазьян Э.В., Азиева Н.У. ОСОБЕННОСТИ МОРФОЛОГИЧЕСКИХ ИЗМЕНЕНИЙ СЛИЗИСТОЙ ОБОЛОЧКИ ЖЕЛУДКА ПРИ ХРОНИЧЕСКОМ ГАСТРОДУОДЕНИТЕ В ЗАВИСИМОСТИ ОТ CATT-ПОЛИМОРФИЗМА ФАКТОРА ТОРМОЖЕНИЯ МИГРАЦИИ МАКРОФАГОВ // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 5.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=14590 (дата обращения: 11.12.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074