Сетевое издание
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

ИЗУЧЕНИЕ ЛИТОЛИТИЧЕСКОЙ И ДИУРЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТОВ КОРНЯ ПОДСОЛНЕЧНИКА ОДНОЛЕТНЕГО (HELIANTHUS ANNUUS)

Мелик-Гусейнов В.В. 1 Герасименко С.В. 1 Тимченко Л.Д. 2 Писков С.И. 2
1 Пятигорский медико-фармацевтический институт – филиал ГБОУ ВПО ВолгГМУ МЗ РФ
2 ФГАОУ ВПО «Северо-Кавказский федеральный университет»
Реализован эксперимент по изучению литолитического и диуретического свойств корня подсолнечника, обладающего рядом ценных фармакологических свойств. Исследован литолиз мочевых камней in vitro под влиянием экстрактов корня подсолнечника. Изучены диуретическое и литолитическое действие различных экстрактов корня подсолнечника в условиях экспериментальной модели мочекаменной болезни животных. Результаты исследования показали, что при оксалатном уролитиазе у белых крыс корень подсолнечника однолетнего обладает литолитической активностью, которая проявляется уменьшением размера микролитов и снижением кристаллурии. Механизм литолитического действия обусловлен не столько за счет вероятной потенции растворения кальциевых депозитов, сколько вызван возможным содержанием веществ в корне подсолнечника, ингибирующих рост кристаллов оксалата кальция, а также активным мочегонным действием, препятствующем агрегации кристаллов в канальцевом аппарате почек.
диуретическая активность
литолитические свойства
уролитиаз
корень подсолнечника однолетнего (Helianthus annuus)
1. Берхин Е.Б., Иванов Ю.И. Методы экспериментального исследования почек и водносолевого обмена. — Барнаул, 1972. — 132 с.
2. Брюханов В.М., Зверев Я.Ф., Лампатов В.В. и др. Функция почек в условиях экспериментального оксалатного нефролитиаза // Нефрология. — 2008. — Т.12, №1. — С. 69-74.
3. Вайль С.С. Руководство по паталого-гистологической технике. — Л., 1947. — 264 с.
4. Жариков А.Ю., Зверев Я.Ф., Лампатов В.В. и др. Применение викасола как перспективного средства фармакологической коррекции экспериментального нефролитиаза // Бюллетень сибирской медицины. — № 1. — 2012. — С. 18-25.
5. Чабан Н.Г., Букин В.И., Рапопорт Л.М., Цариченко Д.Г. Литолиз in vitro нефролитов ксидифоном и его смесями с калганом // Вестник МИТХТ. — 2007. — Т. 2. — № 6 — С. 48-53.
6. Ягода А.В. Клиническая цитохимия / под ред. А.В. Ягоды, Н.А. Локтева. — Ставрополь, 2005. — 485 с.
7. Ajij Ahmed. Efficacy of Adiantum capillus veneris Linn in chemically induced urolithiasis in rats // Journal of Ethnopharmacology, 2013.Vol. 146. — P. 411-416.
8. Dilipkumar Pa Chapter 130 – Sunflower (Helianthus annuus L.) Seeds in Health and Nutrition // Nuts and Seeds in Health and Disease Prevention 2011. — P. 1097–1105.
9. Lotan Y. Management of ureteral calculi: a cost comparison and decision making analysis // J Urol 167 (4), 2002. — Р. 1621–1629.
10. Pablo R. Exploration of the antioxidant and antimicrobial capacity of two sunflower protein concentrate films with naturally present phenolic compounds // Food Hydrocolloids, 2012. Vol. 29. — P. 374–381.
Мочекаменная болезнь занимает третье место по распространенности среди патологий мочевыводящей системы. Проблема лечения и профилактики камнеобразования, несмотря на широкое внедрение в клиническую практику новых методов разрушения и удаления мочевых конкрементов, остается чрезвычайно актуальной [2, 4, 5].

Изучение литолиза мочевых камней является важным, так как может уберечь больных от хирургического вмешательства или уменьшить количество процедур литотрипсии, тем самым предоставляя возможность избежать осложнений, связанных с повреждением тканей почки, рецидива уролитиаза, а также развития острого пиелонефрита.

В связи с этим в традиционной медицине нередко прибегают к использованию растительных средств, обладающих литолитической активностью и снижающих частоту рецидивов образования уролитов, не оказывая при этом каких-либо побочных действий.

Сегодня в отечественной и зарубежной медицинской науке осуществляется активный поиск и подбор растительных средств и компонентов, обладающих такими свойствами [5, 7 и др.].

Интересным представилось изучение в этой роли подсолнечника однолетнего (Helianthus annuus), антимикробное, противовоспалительное, болеутоляющее и антиоксидантное свойства разных вегетативных частей которого уже неоднократно клинически и фармакологически доказаны [8, 10 и др.].

Целью настоящей работы явилось изучение литолитических свойств корня подсолнечника in vitro и in vivo в условиях экспериментальной модели мочекаменной болезни у животных.

Материалы и методы исследования

Первый этап исследования был посвящен литолизу (растворению) in vitro мочевых камней. Для оценки литолитической активности различных экстрактов корня подсолнечника использовали мочевые конкременты больного, находившегося на лечении в урологическом отделении Ставропольской краевой клинической больницы с диагнозом - Мочекаменная болезнь. Относительно одинаковые по размерам кусочки одного образца почечного камня высушивали и взвешивали на анализаторе влагосодержания MB 25 (Ohaus). Учитывались показатели массы при 0 %-ной влажности и нагреве до температуры 37ºС. Одна часть кусочков уролита как контрольная была помещена в дистиллированную воду. Вторая и третья заливались исследуемыми 10 %-ми водной взвесью высушенного спиртового экстракта и отваром измельченного сухого корня подсолнечника. Все образцы помещались в термостат (ТС-1/80 СПУ) при температуре 37ºС на 14 дней. Исследуемые жидкости периодически помешивались и обновлялись. Оценка растворимости мочевых камней проводилась после высушивания путем сравнения их массы до и после экспозиции.

Второй этап исследования заключался в изучении литолитических свойств корня подсолнечника in vivo. Использовалась «этиленгликолевая модель» уролитиаза животных, которая сегодня широко применяется в современных исследованиях и имитирует наиболее часто встречающийся кальций-оксалатный тип камнеобразования [2, 4].

В исследовании использовались самцы крыс линии Вистар массой 180-200 г., полученные из питомника лабораторных животных «Рапполово» РАМН (ветеринарное свидетельство №0135872). Крысы прошли двухнедельный карантин и содержались в стандартных условиях лабораторного вивария. Животные были условно разделены на три группы (контрольная, 1-я опытная, 2-я опытная) по шесть животных в каждой. Все работы выполнялись в соответствии с общепринятыми этическими нормами обращения с животными.

Модель уролитиаза воспроизводилась у всех трех групп животных выпаиванием 1 % раствором этиленгликоля путем свободного доступа в течение 21 дня. С четвертой недели исследования на протяжении 14 дней контрольная группа продолжала получать раствор этиленгликоля. Животным 1-й и 2-й опытных групп ежедневно на фоне приема этиленгликоля в течение двух недель перорально вводились экстракты корня подсолнечника из расчета 50 мг на 1 кг веса животного. Крысы 1-й опытной группы получали водную взвесь сухого спиртового экстракта корня подсолнечника. Животных 2-й опытной группы выпаивали отваром сухого измельченного корня подсолнечника.

Диуретическую активность животных оценивали по общепринятому методу без нагрузки [1]. Сбор мочи осуществляли в метаболических клетках за 12 часов.

Общий анализ мочи проводили на автоматическом анализаторе мочи Урискан Оптима (YD Diagnostics).

Наличие соединений кальция в тканях почки определяли гистохимическим методом Косса, заключающемся в импрегнации тканей серебром [3]. Содержание ионизированного кальция определяли по методу Лилли с использованием щавелевой кислоты [6].

Изучение гистологических срезов и микроскопию осадка мочи проводили с использованием лабораторного микроскопа Axio Imager 2 (A2) при различных увеличениях с фиксацией обнаруженных изменений путем получения цифровых фотографий с помощью специализированной фотокамеры AxioCam MRc5 (Carl Zeiss Microscopy) с использованием программного обеспечения Zena 2012 Pro. Все результаты подвергались статистической обработке с помощью критерия Стьюдента. Различие считали статистически достоверным, начиная со значений Р≤0,05.

Результаты исследований

Экспозиция мочевых конкрементов в исследуемых растворах на протяжении 14 дней проявилась снижением их массы в присутствии 10 % отвара сухого корня подсолнечника на 11,8 % (табл. 1).

Таблица 1

Оценка литолитического действия экстрактов корня подсолнечника in vitro

Исследуемый

раствор

Масса мочевого конкремента (г) (М±m)

До экспозиции

После экспозиции

10% отвар сухого корня подсолнечника

0,715±0,12

0,630±0,24

10% водная взвесь сухого спиртового экстракта корня подсолнечника

0,670±0,23

0,585±0,21

Дистиллированная вода

0,675±0,16

0,625±0,13

Динамика уменьшения массы кусочков уролита, помещенного в 10 % водную взвесь сухого спиртового экстракта корня подсолнечника, составила 12,6 %. Масса образцов мочевого камня, выдержанных в дистиллированной воде, уменьшилась на 7,4 %.

Приведенные значения указывают на некоторую степень контактного воздействия изучаемых экстрактов на растворимость уролитов. Однако в сравнении с данными исследований подобного характера [5 и др.] полученные результаты носят незначительный характер и тем самым ставят под сомнение вопрос эффективности антеградного использования корня подсолнечника в виде моносредства.

Изучение диуреза животных опытных групп выявило, что однократное введение отвара измельченного корня подсолнечника оказывает выраженное мочегонное действие, увеличивая водовыделительную функцию почек в 2,3 раза по сравнению с показателями диуреза у животных контрольной группы (табл. 2).

Таблица 2

Влияние корня подсолнечника на диуретическую активность почек крыс

Группы

Диурез в мл/100г (М±m)

Контрольная группа (физ. раствор) (n=6)

4,84±0,23

Опытная группа 1 (водная взвесь сухого спиртового экстракта корня подсолнечника) (n=6)

5,16±0,14

Опытная группа 2 (отвар высушенного корня подсолнечника) (n=6)

11,30±0,21*

Примечание: * - достоверные отличия по сравнению со значениями контрольной группы при Р≤0,05.

Это свидетельствует в пользу соответствия отвара корня подсолнечника разряду литолитических средств, которые, по мнению ряда авторов [5 и др.], должны включать в свой состав соединения не только обладающие способностью разрушать органическую матрицу уролита, но и обладать мочегонным свойством. При этом важно отметить, что диуретическое действие водной взвеси сухого спиртового экстракта корня подсолнечника у опытных животных не имело столь значимых отличий от группы контроля.

При микроскопировании осадка мочи у всех животных к концу третьей недели формирования экспериментального уролитиаза выявлено большое количество солевых кристаллов, что свидетельствует о развивающемся нарушении выделительной функции почек и развитии мочекаменной болезни.

Это подтверждалось и характером изменений ряда свойств мочи у всех экспериментальных животных в динамики моделирования патологии мочевыводящих путей, а именно - протеинурией, гематурией и ростом количества лейкоцитов в моче.

В группе опытных животных, получавших водную взвесь сухого спиртового экстракта корня подсолнечника, как и в контрольной, сохранилось большое количество крупных кристаллов солей в осадке мочи. Образовавшиеся кристаллы в моче крыс, которым вводился отвар корня подсолнечника, были маленьких размеров, что указывает на меньшую их агрегацию.

Микроморфологическое исследование почек в контрольной группе животных, которая выступала группой чистой модельной патологии, выявило наличие «кальций-позитивного материала» (более 100 включений в поле зрения) в виде диффузной инкрустрации ионизированного кальция в клеточных элементах интерстиции. Обнаруживались отложения микролитов кальция в почечных канальцах. Размеры кальцинатов были различными вплоть до крупных, обтурирующих просвет канальца.

Гистологическая оценка почек выявила вышеназванные изменения и у животных 1-й и 2-й опытных групп. Однако следует отметить, что во 2-й опытной группе животных перечисленные изменения оказались менее выражены. Диффузная инкрустрация кальция в интерстиции вещества почек у животных контрольной группы сменяется очаговыми скоплениями в почках крыс опытных групп. Причем в тканях почек животных 2-й опытной группы количество «кальций-позитивного материала» было минимальным и составляло не более 50 включений в поле зрения.

Обособленно 2-я опытная группа стоит также по количеству и размерам кальциевых микролитов в канальцах нефрона. Если в контрольной группе встречаемость довольно крупных кальциевых депозитов с обтурацией просвета почечных канальцев составляла 50 % наблюдений, а в 1-й опытной группе около 30 %, то во 2-й группе опыта на гистологических срезах встречались только микролиты небольших размеров, которые, кроме того, что немало важно, имели более рыхлую консистенцию.

Результаты исследования показали, что при оксалатном уролитиазе у белых крыс корень подсолнечника однолетнего обладал литолитической активностью, которая проявилась уменьшением размера микролитов и снижением кристаллурии. Механизм литолитического действия обусловлен не столько за счет вероятной потенции растворения кальциевых депозитов, сколько вызван возможным содержанием веществ в корне подсолнечника, ингибирующих рост кристаллов оксалата кальция, а также активным мочегонным действием, препятствующем агрегации кристаллов в канальцевом аппарате почек.

Исследование проведено при финансовой поддержке Минобрнауки России, в рамках выполнения базовой части государственного задания (2014/2016).

Рецензенты:

Попова О.И., д.фарм.н., профессор кафедры фармакогнозии Пятигорского медико-фармацевтического института филиала ГБОУ ВПО Волгоградского государственного медицинского университета МЗ РФ, г. Пятигорск.

Федько Н.А., д.м.н., профессор, декан факультета гуманитарного и медико-биологического образования ГБОУ ВПО «Ставропольский государственный медицинский университет», г. Ставрополь.


Библиографическая ссылка

Мелик-Гусейнов В.В., Герасименко С.В., Тимченко Л.Д., Писков С.И. ИЗУЧЕНИЕ ЛИТОЛИТИЧЕСКОЙ И ДИУРЕТИЧЕСКОЙ АКТИВНОСТИ ЭКСТРАКТОВ КОРНЯ ПОДСОЛНЕЧНИКА ОДНОЛЕТНЕГО (HELIANTHUS ANNUUS) // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 4. ;
URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=14299 (дата обращения: 28.09.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074