Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

РОЛЬ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ПРОГРЕССИРОВАНИИ МИЕЛОМНОЙ БОЛЕЗНИ

Смирнова О.В. 1 Манчук В.Т. 1 Агилова Ю.Н. 1
1 ФГБУ «НИИ медицинских Проблем Севера» СО РАМН
Авторами изучена роль неспецифического иммунитета при прогрессировании миеломной болезни. С помощью проведенных исследований выявили, что развитие миеломной болезни в организме человека сопровождается изменением функциональных свойств периферических нейтрофильных гранулоцитов. По мере прогрессирования заболевания наблюдается увеличение спонтанной продукции АФК нейтрофилами, так показатели спонтанной продукции АФК у больных миеломной болезни на II и III стадии достоверно выше показателей контрольной группы. Индуцируемая продукция АФК нейтрофилами повышается во всех исследуемых группах, относительно спонтанной продукции и контрольных параметров, что доказывает роль нейтрофильных гранулоцитов, не только как клеток первой линии неспецифической противомикробной защиты, но и как цитотоксических эффекторов на опухолевые клетки.
хемилюминесция
нейтрофильные гранулоциты
миеломная болезнь
1. Бессмельцев С.С., Абдулкадыров К.М. Множественная миелома. – Невский Диалект, 2004. – 448 с.
2. Волкова М.А. Клиническая онкогематология. – М.: Медицина, 2001. – 576 с.
3. Воробьев, А.И. Руководство по гематологии. – М.: Ньюдиамед, 2003. – Т.2. – 280 с.
4. Смирнова О.В. Хронический миелолейкоз – клинические и иммунологические особенности у взрослых больных // Бюллетень Восточно-Сибирского научного центра СО РАМН. – 2012. – № 3-2. – С. 185-189.
5. Манчук В.Т., Смирнова О.В. Особенности прогнозирования возникновения инфекционных осложнений после проведения химиотерапии у больных острыми лейкозами // Медицинская иммунология. – 2012. – Т.14, № 4-5. – С. 403-408.
6. Манчук В.Т., Смирнова О.В. Использование методов нейросетевого моделирования и дискриминантного анализа для оценки состояния иммунного статуса у больных острым нелимфобластным лейкозом // Якутский медицинский журнал. – 2010. – № 2. – С. 77-79.
7. Савченко А.А., Смирнова О.В., Манчук В.Т., Москов В.И. Способ прогнозирования инфекционных осложнений после химиотерапии у больных острыми лейкозами. – Патент на изобретение RUS 2315305, 08.11.2005.
8. Савченко А.А., Смирнова О.В., Манчук В.Т., Москов В.И. Способ прогнозирования геморрагических осложнений после химиотерапии у больных острыми лейкозами. – Патент на изобретение RUS2324190, 15.02.2006.
9. Smirnova O.V., Manchouk V.T., Savchenko A.A. Immune status & enzymes activity in blood lymphocytes in adult patients at different stages of acute lymphoblastic leukaemia // Indian Journal of Medical Research. – 2011. – T.133, № 3. – pp. 280-286.

Введение

Миеломная болезнь (МБ) - злокачественный В-лимфопролиферативный гемобластоз. По классификации REAL, миелома относится к лимфоидным опухолям низкой степени злокачественности. Частота встречаемости МБ среди всех злокачественных новообразований составляет 1 %, а в структуре гемобластозов - до 20 %. Ежегодно в Европейских странах регистрируются четыре новых случая на 100 000 населения. МБ до настоящего времени остается неизлечимым заболеванием и известна как болезнь пожилого возраста [1,2,3].

Согласно иммунохимической классификации выделяют 5 форм МБ в зависимости от продуцируемого иммуноглобулина: G, A, D, E, а также несекретирующая миелома, при которой иммуноглобулины не выделяются. Частота распределения нормальных иммунологических типов МБ соответствует концентрации нормальных иммуноглобулинов в сыворотке крови: G-миелома обнаруживается в 50 % случаев, А-миелома - в 25 %, D-миелома - в 1 %, М-миелома и несекретирующая форма встречаются очень редко.

В патогенезе ММ G-варианта наблюдается бесконтрольный синтез моноклонального парапротеина класса IgG, который инфильтрирует красный костный мозг, костную ткань, почки, формируя клиническую картину распространённого заболевания [2].

Причины, способствующие развитию МБ, на сегодняшний день так и остаются неизвестными. До настоящего времени предложено множество теорий о превращении нормальных клеток в опухолевые. Одним из факторов, обусловливающим развитие онкологического заболевания, является снижение реактивности иммунной системы. Иммунодефицитное состояние организма определяет развитие злокачественной опухоли, при этом сама опухоль способствует развитию и пролонгации иммунной супрессии. Нейтрофильные гранулоциты занимают одну из наиболее важных позиций в гуморально-клеточном иммунитете. С одной стороны, являясь клетками первой линии неспецифической противомикробной защиты, активно участвуют в воспалении, являясь не только фагоцитами, но и эффекторами каскадных реакций, обеспечивающих развитие воспаления, обладают цитотоксическим действием на опухолевые клетки, способствуя противоопухолевой резистентности организма. Особенности функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов влияют на иммунологическую защиту организма в целом. При острых и хронических гемобластозах наблюдаются нарушения в системе клеточно-гуморального иммунитета [4,5,6,7,8,9], способствующие возникновению и развитию инфекционных осложнений. При МБ инфекционные осложнения встречаются у большинства больных, в ряде случаев становятся причиной гибели пациентов. В связи с этим целью нашей работы явилось изучение особенностей функциональной (хемилюминесцентной) активности нейтрофильных гранулоцитов крови больных МБG-варианта, в зависимости от стадии развития заболевания.

Материал и методы

В группу изучения были включены 100 больных МБ G-вариантом, поступившие в гематологическое отделение Краевой клинической больницы № 1 г. Красноярска. В качестве контрольной группы обследовано 100 практически здоровых добровольцев, сопоставимых по полу и возрасту с изучаемой группой. Обследование больных и практически здоровых лиц проводилось с разрешения этического комитета ФГБУ НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, при этом каждый участник подписывал форму информированного согласия на обследование.

Больных МБ разграничивали по стадиям заболевания, согласно системы стадирования Durie-Salmon. Данная классификация основана на линейной зависимости между содержанием М-белка и клеточной опухолевой массой у больных. При этом у больных МБ на I стадии наблюдался низкий уровень продукции М-протеина: IgG менее 50 г/л, IgA менее 30 г/л, IgU (протеинурия Бенс-Джонса) менее 4 г/сут, на II стадии - промежуточные показатели между стадиями I и III, на III стадии - уровень М-протеина: IgG - более 70 г/л, IgA - более 50 г/л, IgU - более 12 г/сут.

Среди 100 обследованных больных ММ - мужчин 38 %, женщин 62 %. Средний возраст мужчин составлял - 60 лет ± 2,3 года (от 47 до 73 лет), женщин - 61 год ± 3,7 года (от 43 до 76 лет). У 85 % человек регистрировались те или иные инфекционные осложнения при поступлении.

Всем больным венозная кровь бралась утром, натощак, из локтевой вены, в пробирки с гепарином, при поступлении в стационар, до назначения патогенетической терапии.

В качестве метода изучения использовался хемилюминесцентный анализ спонтанной и индуцированной продукции активных форм кислорода (АФК) нейтрофильными гранулоцитами больных МБ в зависимости от стадии заболевания (Desole p.et al.; 1983). Оценка спонтанной и индуцированной хемилюминесценции осуществляли в течение 90 минут на 36-канальном хемилюминесцентном анализаторе "CL 3606" (Россия). Регистрация результатов и управление анализатором осуществлялись через персональный компьютер. Определялись следующие характеристики: время выхода кривой на максимум интенсивности хемилюминесценции (Tmax), максимальное значение интенсивности хемилюминесценции (Imax), площадь кривой хемилюминесценции (S). В качестве усилителя хемилюминесценции использовали люминол. Индуктором респираторного взрыва служил опсонизированный зимозан. Усиление хемилюминесценции, индуцированной опсонизированным зимозаном, оценивали по соотношению площади индуцированной (Sинд) к площади спонтанной (Sспонт) хемилюминесценции и обозначали индексом активации. По результатам проведенных исследований в пакете электронных таблиц MSExcel была сформирована база данных, на основе которой с помощью прикладных программ Statistica 8,0 производился статистический анализ. Вычислялись медиана (Me) и персентили (С2575). Статистическая достоверность выборок производили с помощью критериев Манна - Уитни. Различия между группами считались статистически значимыми при р<0,05 [5]. Результаты статистической обработки сведены в таблице № 1.

Результаты и их обсуждение

Люминол-зависимая хемилюминесценция формируется в системе миелопероксидазы и отражает суммарную активность кислородных и других радикалов.

Хемилюминесцентный анализ функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов показал, что на II и III стадии у больных МБ отмечается увеличение интенсивности хемилюминесценции приблизительно в 3,01 раза на II стадии и в 3,43 раза при III стадии заболевания, по сравнению с контролем (табл. 1).

Таблица № 1

Показатели активности нейтрофильных гранулоцитов у больных МБ в зависимости от стадии заболевания

Показатели

Контроль, N=100

(1)

Стадия II, N=65

(2)

Стадия III, N=35

(3)

Ме

С2575

Ме

С2575

Ме

С2575

Tmax спонтанная (с)

975

211-1510

884

564-1366

752

444-1374

Imax спонтанная

7720

3000-19000

23270

7630-53232

26500

1572-51480

 

 

p1<0,001

p1<0,021

Squr спонтанная(*106)

0,22

0,15-0,54

3,2

0,37-6,1

2,3

0,14-3,7

 

p1<0,001

p1<0,001

Tmax индуцированная (с)

1102,5

872-1800

1060

733-1819

1020

769-1407

Imax индуцированная

17270

8000-42840

56584

23973-99928

49312

915-102201

 

p1<0,001

p1<0,001

Squr индуцированная (*106)

0,4

0,15-0,95

7,17

1,2-10,6

5,4

0,11-8,09

 

p1<0,001

1<0,003

Индекс активации

1,3

0,9-2,0

2

3 - 1

2

1,2 - 2

 

p1<0,007

 

Примечание: Примечание: р1 - статистически достоверные различия с величиной контрольных показателей; р2 - с величиной показателей больных МБ на II стадии.

Площадь кривой спонтанной хемилюминесценции у больных МБ увеличивалась в 14,54 раза на II стадии и в 10,45 раза на III стадии, относительно контроля. При этом не было достоверных изменений в функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов на II и III стадии заболевания. Особенности спонтанной хемилюминесцентной активности нейтрофильных гранулоцитов при МБ, вероятно, обусловлены наличием злокачественного онкологического заболевания и инфекционными осложнениями, которые регистрировались у большинства больных.

После индукции хемилюминесцентного ответа опсонизированным зимозаном у больных МБ отмечалось увеличение интенсивности хемилюминесценции в 3,28 раз на II стадии, в 2,85 раз на III стадии относительно контроля, при этом в сравнении со спонтанной хемилюминесценцией регистрировалось усиление «свечения» в 2,43 раз на II стадии и в 1,86 раз на III стадии. Площадь кривой индуцированной хемилюминесценции увеличивалась в 17,95 раза на II стадии и в 13,5 раза на III стадии, по сравнению с контрольной группой. При этом в сравнении со спонтанной хемилюминесценцией площадь кривой индуцированной хемилюминесценции увеличивалась в 2,24 раз на II стадии и в 2,34 раз на III стадии.

Индекс активации у больных МБ на II стадии заболевания увеличивался в 1,54 раза относительно контрольной группы, что свидетельствует о несбалансированной работе нейтрофильных гранулоцитов.

Тем не менее хемилюминесцентный анализ функциональной активности нейтрофильных гранулоцитов, характеризующий уровень продукции первичных и вторичных АФК у больных МБ, не показал достоверного изменения времени выхода на максимум спонтанной хемилюминесценции на II и III стадии заболевания, относительно контроля.

Таким образом, на II стадии заболевания достоверно повышались показатели времени выхода кривой на максимум интенсивности и площади кривой при спонтанной и индуцированной хемилюминесценции, и индекс активации, по сравнению с контролем.

На III стадии заболевания выявляемые изменения были аналогичны, за исключением особенностей индекса активации.

Заключение. Проведенные исследования показали, что развитие МБ в организме человека сопровождается изменением функциональных свойств периферических нейтрофильных гранулоцитов. По мере прогрессирования заболевания наблюдается увеличение спонтанной продукции АФК нейтрофилами, так показатели спонтанной продукции АФК у больных МБ на II и III стадии достоверно выше показателей контрольной группы. Индуцируемая продукция АФК нейтрофилами повышается во всех исследуемых группах, относительно спонтанной продукции, и контрольных параметров, что доказывает роль нейтрофильных гранулоцитов, не только как клеток первой линии неспецифической противомикробной защиты, но и как цитотоксических эффекторов на опухолевые клетки.

Рецензенты:

Зайцева О.И., д.м.н., руководитель лаборатории клинической мембранологии и иммунохимических исследований, НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, г. Красноярск.

Игнатова И.А., д.м.н., ведущий научный сотрудник лаборатории клинической патофизиологии и аллергологии, НИИ медицинских проблем Севера СО РАМН, г. Красноярск.


Библиографическая ссылка

Смирнова О.В., Манчук В.Т., Агилова Ю.Н. РОЛЬ НЕСПЕЦИФИЧЕСКОГО ИММУНИТЕТА ПРИ ПРОГРЕССИРОВАНИИ МИЕЛОМНОЙ БОЛЕЗНИ // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 2.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=12638 (дата обращения: 23.06.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074