Scientific journal
Modern problems of science and education
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

FREQUENCY OF OCCURRENCE OF ANTIGENES OF THE MAIN COMPLEX HISTOCOMPATIBILITY OF HLA 1 CLASS AT SOLID MALIGNANT TUMORS AT CHILDREN

Arsamakova H.H. 1 Kozel Yu.Yu. 1 Fadeeva T.V. 1 Kudinova E.E. 1 Zlatnik E.Yu. 1 Kuznetzov S.A. 1
1 Federal State Budgetary Institution «Rostov Cancer Research Institute» Ministry of Public Health
У 74 пациентов отделения детской онкологии РНИОИ с солидными злокачественными опухолями (саркома Юинга, остеогенная саркома, нейробластома, нефробластома, герминогенные опухоли – дисгерминома, тератома, тератобластома, эмбриональный рак яичка, семинома, герминогенная опухоль головного мозга) изучено распределение антигенов главного комплекса гистосовместимости HLA I класса (локусов А и В). Исследование антигенов главного комплекса гистосовместимости HLA I класса проводилось на базе ГУЗ СПК РО в иммунологическом отделении методом серологического типирования. Для данной выборки были характерны достоверное увеличение частоты антигенов А26 (χ2 - 6,85, р<0,05) у больных с нефробластомой, HLA В13 (χ2 - 6,02, р<0,05) у пациентов с нейробластомой и HLA А26 (χ2 – 3,98, р<0,05) при герминогенных опухолях.
In 74 patients of pediatric oncology RNIOI with solid malignant tumors (Ewing´s sarcoma, osteosarcoma, neuroblastoma, nephroblastoma, germ cell tumors - dysgerminoma, teratoma, teratoblastoma, fetal testicular cancer, seminoma, germinnogennaya brain tumor), studied the distribution of major histocompatibility antigens HLA class I (loci A and B). Study of major histocompatibility antigens HLA I class was conducted on the basis of SEC GOOSE RO unit by immunological serotyping. For this sample was characterized by a significant increase in the frequency of antigens A26 (χ2 - 6,85, p <0.05) in patients with nephroblastoma, HLA B13 (χ2 - 6,02, p <0.05) in patients with neuroblastoma and HLA A26 (χ2 - 3,98, p <0.05) in germ cell tumors.
children
solid malignant neaplasms
main complex of histocompatibility
Полиморфизм системы HLA позволяет использовать ее для уникальных популяционных исследований, проводимых с целью изучения частоты встречаемости генов, антигенов, гаплотипов, выявления генетических различий между популяциями, а также является основой для изучения таких проблем, как «HLA и заболевания», «HLA и качество иммунного ответа», «HLA и репродукция», и для решения практических вопросов в трансплантологии [4; 6; 7].

Следует отметить, что внедрение в исследования системы HLA молекулярно-генетических методов не только позволило конкретизировать представления о системе HLA, но и значительно расширило представления о ее полиморфизме, при этом были открыты многие новые аллели классов I, II и III, и общее количество только известных специфичностей HLA классов I и II увеличилось более чем в 6 раз. Аллельные варианты HLA классов I и II входят в несколько генетических локусов. Так, в классе I имеется 3 локуса HLA: А, В и С, также к антигенам HLA класса I относятся гены локуса МIС - МНС class I chain - related gens (МIС - А и МIС - В) [9].

Эти гены локализуются на хромосоме 6 в непосредственной близости от HLA - В [10].

К настоящему моменту установлено 17 аллельных вариантов генов МIС - А и МIС - В [6; 9]. В настоящее время обнаружено, что антигены МIС - А участвуют в активации взаимодействия ТСR - молекулы МНС в развитии Т-клеточно-опосредованной цитотоксичности и активности НК-клеток, тем самым, в частности, играя роль в обеспечении противоракового иммунитета [7].

Успехи молекулярной биологии, в частности иммуногенетические методы изучения главного комплекса гистосовместимости человека (МНС), способствовали не только новому взгляду на этиологию и патогенез многих заболеваний, но и прогнозам ряда заболеваний в клинике. Исследование МНС стало одним из приоритетных направлений в иммуногенетике [6]. Изучение характера ассоциированности антигенных вариантов генов HLA со злокачественными солидными опухолями у детей в изученной нами литературе ранее не проводилось.

Заболеваемость детей злокачественными опухолями в России за последние 10 лет увеличилась на 20% и достигла 4,25 тысяч [1]. В настоящее время в России насчитывается около 12 500 детей до 15 лет, находящихся под врачебным наблюдением по поводу злокачественных новообразований (ЗН) всех локализаций [2]. Россию можно отнести к странам с высоким уровнем заболеваемости детской онкологической патологией. В 2002 году она составила 13-15 на 100 тысяч детского населения [3]. Солидные злокачественные новообразования (ЗН), включая опухоли ЦНС, занимают второе место в структуре заболеваемости детей злокачественными опухолями. На их долю, по данным различных отечественных и зарубежных авторов, приходится от 48,5 до 54% от всей онкопатологии. Среди солидных опухолей наиболее часто диагностируются опухоли центральной нервной системы - около 20%. Реже встречаются опухоли почек - 8%, костей и мягких тканей - 12%, глаз - 3,5%, половых органов - 0,7% [5].

Целью настоящей работы явилось исследование распределения антигенов главного комплекса гистосовместимости I класса у детей с солидными злокачественными опухолями.

Материалы и методы. Информация об обследованной популяции. Определение антигенов HLA I класса было проведено у 74 пациентов отделения детской онкологии РНИОИ: 12 пациентов с саркомой Юинга, 11 пациентов с остеогенной саркомой, 14 пациентов с нейробластомой, 14 пациентов с нефробластомой, 23 пациента с герминогенными опухолями (дисгерминома, тератома, тератобластома, эмбриональный рак яичка, семинома, герминогенная опухоль головного мозга). Контрольную группу составили 1215 доноров ГУЗ СПК РО. Средний возраст больных составил: с саркомой Юинга - 11,8 года, остеогенная саркома - 17,1 года, нейробластомой - 4,7 года, нефробластомой - 4,8 года, герминогенные опухоли - 14,2 года. Заболевание начиналось в среднем в возрасте: с саркомой Юинга - 11,6 года, остеогенная саркома - 16,4 года, нейробластомой - 4,4 года, нефробластомой - 4,2 года, герминогенные опухоли - 10,6 года. Из них при саркоме Юинга - 9 мальчиков, 3 девочки, при остеогенной саркоме - 7 мальчиков, 4 девочки, нейробластома - 8 мальчиков, 6 девочек, нефробластома - 9 мальчиков, 5 девочек, герминогенные опухоли - 10 мальчиков, 13 девочек.

Исследование HLA фенотипа I класса проводилось на базе ГУЗ СПК РО в иммунологическом отделении методом серологического типирования.

Серологическое типирование осуществляли в стандартном лимфоцитотоксическом тесте. Для определения HLA - антигенов I класса, локусов А и В, в качестве гистотипирующих стандартов использовали сыворотки Всероссийского банка гистотипирующих реагентов Санкт-Петербургского НИИ гематологии и переливании крови.

Статистическая обработка результатов. Достоверность различий и достоверность наблюдаемой ассоциации определяли с помощью общепринятого в иммуногенетике вычисления χ2.

Результаты и обсуждение. Первым этапом работы выполнена оценка распределения антигенов HLA I класса у детей с солидными злокачественными опухолями. Результаты исследования распределения антигенов HLA I класса представлены в таблицах 1-5.

Все основные антигены присутствуют в популяции: HLA I класса (локус А и В).

Таблица 1 - Распределение антигенов HLA I класса у детей с нейробластомой

Антигены HLA I класса

Здоровые лица(n = 1215)

Больные (n = 14)

χ2.

А 1

25,19

21,42

0,09

А 2

48,06

50,0

00,2

А3

25,35

7,14

2,43

А23

4,36

7,14

0,25

А24

16,46

35,71

3,69

А25

4,52

7,14

0,22

А26

5,35

7,14

0,09

А11

12,59

14,28

0,04

А31

0,90

7,14

5,56

В 51

12,35

14,28

0,40

В7

19,67

1,14

1,38

В8

10,86

21,42

1,58

В44

14,07

14,28

0,001

В13

11,60

35,71

8,2

В62

6,99

7,14

0,001

В38

8,97

7,14

0,06

В39

1,73

7,14

2,31

В 18

13,50

7,14

0,48

В 49

5,10

7,14

0,12

В 55

0,82

7,14

0,01

В 27

10,70

28,57

4,55

В 35

14,90

14,28

0,004

В 60

6,34

14,28

2,32

В 61

2,47

7,14

1,27

                                  Примечание. В таблице 1 - частота встречаемости антигена в (%).

Из представленных данных (табл. 1), при нейробластоме по сравнению с контролем повышена частота антигенов - А24 - 35,71%, А31 - 7,14%, В8 - 21,42%, В13 - 35,71%, В27 - 28,57, В60 - 14,28%. Достоверно повышена только частота антигена В13 (χ2 - 6,02, р<0,05). Снижена частота антигенов В7 - 7,14% и В18 - 7,14%. Число гомозигот при нейробластоме - 7 случаев.

Таблица 2 - Распределение антигенов HLA I класса у детей с нефробластомой

Антигены HLA I класса

Здоровые лица (n = 1215)

Больные (n = 14)

χ2.

А 1

25,19

14,28

0,86

А 2

48,06

50,0

0,02

А3

25,35

35,71

0,78

А24

16,46

14,28

0,05

А25

4,52

7,14

0,22

А26

5,35

21,42

6,85

А11

12,59

14,28

3,60

А28

5,10

14,28

2,36

А29

1,48

7,14

2,91

А31

0,90

7,14

5,56

В 51

12,35

28,57

3,32

В7

19,67

7,14

1,36

В8

10,86

14,28

0,17

В44

14,07

14,28

0,001

В13

11,60

7,14

2,69

В38

8,97

7,14

0,06

В 18

13,50

28,57

2,66

В 49

5,10

14,28

2,36

В 35

14,90

35,71

3,17

В 60

6,34

7,14

0,02

В 41

4,12

14,28

3,13

                      Примечание. В таблице 2 - частота встречаемости антигена в (%).

 

При нефробластоме (табл. 2) повышена частота антигенов: А26 - 21.42%, А31 - 7,14%, В51 - 28,57%, В18 - 28,57%, В35 - 35,71%, В41 - 14,28%. Достоверно повышена только частота антигена А26 (χ2 - 6,85, р<0,05). Снижена частота антигена В13 - 7,14%. Число гомозигот при нефробластоме - 5 случаев. Повышение частоты HLA А31, вероятнее всего, обусловлено низкой частотой антигена в популяции и небольшим числом пациентов в обследуемой группе.

Таблица 3 - Распределение антигенов HLA I класса у детей с саркомой Юинга

Антигены HLA I класса

Здоровые лица (n = 1215)

Больные (n = 12)

χ2.

А 1

25,19

33,33

0,11

А 2

48,06

50,0

0,02

А3

25,35

33,33

0,89

А24

16,46

41,66

3,77

А25

4,52

8,33

0,004

А26

5,35

8,33

0,03

В 51

12,35

33,33

3,05

В7

19,67

25,0

0,01

В8

10,86

25,0

0,57

В44

14,07

8,33

0,02

В13

11,60

8,33

0,02

В62

6,99

8,33

0,15

В 18

13,50

8,33

0,01

В 27

10,70

8,33

0,04

В 35

14,90

16,67

0,06

В 60

6,34

8,33

0,09

В 61

2,47

8,33

0,13

В 41

4,12

8,33

0,001

                        Примечание. В таблице 3 - частота встречаемости антигена в (%).

При саркоме Юинга (табл. 3) значительно повышена частота антигенов А24 - 41,66%, В51 - 33,33%, В61 - 8,33%. Достоверных различий не выявлено.

Таблица 4 - Распределение антигенов HLA I класса у детей с остеогенной саркомой

Антигены HLA I класса

Здоровые лица (n = 1215)

Больные (n = 11)

χ2.

А 1

25,19

18,18

0,03

А 2

48,06

45,45

0,02

А3

25,35

36,36

0,22

А24

16,46

36,36

1,84

А26

5,35

9,00

0,01

А28

5,10

9,00

0,01

В 51

12,35

36,36

3,83

В7

19,67

9,0

0,25

В8

10,86

18,18

0,08

В44

14,07

18,18

0,01

В13

11,60

27,27

1,25

В14

5,60

9,0

0,02

В62

6,99

9,0

0,10

В38

8,97

9,0

0,27

В 56

1.97

9,0

0,28

В 35

14,90

27,27

0,52

В 60

6,34

9,0

0,07

В 61

2,47

9,0

0,18

В 41

4,12

9,0

0,004

                        Примечание. В таблице 4 - частота встречаемости антигена в (%).

У пациентов с остеогенной саркомой (табл. 4) повышена частота антигенов А24 - 36,36%, В51 - 36,36%, В61 - 9,0%, также отмечено повышение частоты антигенов В13, В56, В35 (27,27%, 9,0%, 27,27%) по сравнению с контрольной группой. Снижена частота антигенов В7 - 9,0%, однако эти различия недостоверны из-за небольшого числа наблюдений. Число гомозигот в группе с остеогенной саркомой составило 5 случаев, число гомозигот у пациентов с саркомой Юинга - 7.

Таблица 5 - Распределение антигенов HLA I класса у детей с герминогенными опухолями

Антигены HLA I класса

Здоровые лица (n = 1215)

Больные (n = 23)

χ2.

А 1

25,19

17,39

1,20

А 2

48,06

56,52

0,65

А3

25,35

26,09

0,006

А24

16,46

26,09

1,51

А25

4,52

4,34

0,22

А26

5,35

17,39

3,98

А11

12,59

26,09

2,42

А30

2,39

4,34

0,75

А23

4,36

4,34

0,26

В 51

12,35

21,74

1,08

В7

19,67

17,39

0,001

В8

10,86

8,69

0,001

В44

14,07

21,74

0,56

В13

11,60

4,34

0,57

В14

5,60

8,69

0,03

В62

6,99

13,04

1,14

В39

1,73

4,34

0,02

В 18

13,50

21,74

0,71

В57

6,91

4,34

0,55

В49

5,10

4,34

0,10

В50

1,24

4,34

1,45

В55

0,82

4,34

0,45

В 27

10,70

4,34

1,78

В 35

14,90

26,09

2,24

                               Примечание. В таблице 5 - частота встречаемости антигена в (%).

При герминогенных опухолях (табл. 5) повышена частота антигенов А24 - 26,09%, А26 - 17,39%, А11 - 26,09%, В51 - 21,74%, В18 - 21,74%, В39 - 4,34%, В50 - 4,34%, В55 - 4,34%. Достоверные различия по сравнению с контрольной группой отмечены в частоте встречаемости антигена А26 (χ2 - 3,98, р<0,05). Повышение частоты антигенов В39, В50, В55, вероятнее всего, обусловлено небольшим числом обследованных пациентов данной патологии и низкой частотой этих антигенов среди здоровых лиц.

Проведение сравнительного анализа HLA I класса позволило выявить различия между антигенным составом у больных с саркомой Юинга и остеогенной саркомой, с нейробластомой, нефробластомой, герминогенными опухолями. Так, у больных с нейробластомой, нефробластомой, герминогенными опухолями встречается антиген А11, а у больных с саркомой Юинга и остеогенной саркомой не выявляются данные антигены. В тоже время, у больных с саркомой Юинга и остеогенной саркомой чаще встречается антиген В51, нежели при нейробластоме, нефробластоме, герминогенных опухолях.

Выводы

1. В исследованных нами группах детей с солидными злокачественными опухолями: нефробластомой, нейробластомой, саркомой Юинга, остеогенной саркомой, герминогенными опухолями отмечено достоверное увеличение частоты встречаемости ряда антигенов HLA I класса. Так достоверно повышена частота антигена HLA В13 при нейробластоме (р<0,05), HLA А26 при нефробластоме и герминогенных опухолях (р<0,05).

Необходимо продолжить исследование пациентов с данными патологическими процессами для уточнения результатов.

2. Для дальнейшего изучения ассоциативных связей системы HLA со злокачественными опухолями у детей целесообразно провести HLA типирование по II классу (локус - DRB I).

Рецензенты:

Каймакчи О.Ю., д.м.н., ассистент кафедры онкологии Ростовского государственного медицинского университета, г. Ростов-на-Дону.

Нестерова Ю.А., к.м.н., ассистент кафедры онкологии Ростовского государственного медицинского университета, врач-педиатр отделения детской хирургии ФГБУ «Ростовский научно-исследовательский онкологический институт», г. Ростов-на-Дону.