Scientific journal

Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 0,936

Введение

Рак легкого является одной из ведущих причин онкологической заболеваемости и смертности во всем мире. Несмотря на совершенствование методов диагностики и лечения, прогноз у значительной части пациентов остается неблагоприятным. Особую клиническую проблему представляет выраженная гетерогенность течения опухолевого процесса: даже у больных с одинаковой стадией заболевания продолжительность жизни и ответ на лечение могут существенно различаться [1; 2].

Традиционно для оценки прогноза используются такие характеристики, как размер и распространенность первичной опухоли, поражение регионарных лимфатических узлов, объем выполненного хирургического вмешательства, а также наличие сопутствующих заболеваний. Однако данные параметры не всегда позволяют в полной мере отразить биологическую агрессивность новообразования. Это определяет необходимость поиска дополнительных молекулярно-биологических маркеров, способных повысить точность стратификации пациентов по риску неблагоприятного исхода [3-5].

Одним из наиболее перспективных направлений современной онкологии является изучение опухолевых стволовых клеток [6; 7]. Предполагается, что именно эта клеточная популяция играет ключевую роль в поддержании опухолевого роста, инвазии, метастазировании, формировании устойчивости к противоопухолевой терапии и рецидивировании заболевания [8; 9]. Одним из таких маркеров является CD44, ассоциированный со свойствами опухолевых стволовых клеток и агрессивным течением опухолевого процесса [10; 11]. По данным представленного материала, его повышенная экспрессия может быть связана с менее благоприятным течением заболевания, однако значение CD44 именно у больных плоскоклеточным раком легкого IIIA стадии требует дополнительного изучения. В этой связи анализ экспрессии CD44 в сопоставлении с клиническими параметрами и выживаемостью пациентов представляется актуальным и практически значимым [12].

Цель исследования - оценить взаимосвязь между клиническими параметрами у больных плоскоклеточным раком легкого IIIA стадии и экспрессией маркера опухолевых стволовых клеток CD44, а также определить его прогностическую значимость.

Материал и методы исследования

Материалом исследования послужили данные 31 пациента с плоскоклеточным раком легкого IIIA стадии. Из них 20 больных относились к группе короткой выживаемости, 11 - к группе длительной выживаемости.

Все наблюдения были проанализированы ретроспективно. Для оценки связи клинических параметров с выживаемостью была проведена стратификация пациентов по продолжительности общей выживаемости. Деление на группы короткой и длительной выживаемости не являлось официальной клинической классификацией, а использовалось как аналитический прием в рамках данной работы. В качестве порогового значения была принята медиана общей выживаемости, составившая 42 месяца. С учетом данного значения в группу короткой выживаемости вошли 20 пациентов, в группу длительной выживаемости - 11 пациентов.

Среди включенных пациентов у 9 больных размер первичной опухоли соответствовал T1–T2, у 22 больных - T3–T4. Отсутствие поражения регионарных лимфатических узлов (N0) отмечалось у 3 пациентов, вовлечение лимфатических узлов (N+) - у 28 пациентов. По объему хирургического вмешательства лобэктомия была выполнена 19 пациентам, пневмонэктомия - 12 пациентам.

Основным лабораторно-морфологическим показателем являлся уровень экспрессии CD44, выраженный в процентах. На первом этапе оценивали связь клинических характеристик с принадлежностью пациентов к группам короткой и длительной выживаемости. После этого экспрессию CD44 сопоставляли с параметрами выживаемости и основными клиническими характеристиками, включая размер первичной опухоли (T), статус регионарных лимфатических узлов (N), объем хирургического вмешательства.

Определение экспрессии CD44 проводилось с помощью ИГХ-метода в автоматическом режиме на автостейнере Thermo Scientific 480S. Для визуализации иммуногистохимической реакции использовалась система детекции UltraVision Quanto Detection System HRP DAB. Оценку результатов проводили с применением светового микроскопа «AxioLab.A1» (Германия) при увеличении объектива х200, х400. Экспрессия маркеров была полуколичественно проанализирована в соответствии с процентным содержанием клеток, а также интенсивностью мембранной окраски: 0; 1+ (слабая); 2+ (умеренная); 3+ и 4+ (высокая). Экспрессия CD44 определялась как положительная, когда окрашивание было выявлено в ≥10% всех опухолевых клеток с интенсивностью окрашивания ≥2.

Количественные показатели представлены в виде медианы и межквартильного размаха, что обусловлено особенностями распределения данных и небольшим объемом выборки. Для анализа исходов была проведена ретроспективная стратификация пациентов по общей выживаемости. В качестве порогового значения использовали медиану общей выживаемости, составившую 42 месяца. На основании данного значения пациенты были распределены на группы короткой и длительной выживаемости.

Для сравнения уровня экспрессии CD44 между двумя независимыми группами использовали критерий Манна – Уитни. Категориальные клинические признаки, включая размер опухоли, статус регионарных лимфатических узлов, объем хирургического вмешательства, сравнивали между группами выживаемости с использованием точного критерия Фишера. Связь между высоким уровнем CD44 и клиническими параметрами также определяли при помощи точного критерия Фишера.

С целью оценки прогностической способности показателя CD44 выполняли ROC-анализ с расчетом площади под кривой. Оптимальное пороговое значение определяли по индексу Юдена как точку, обеспечивающую наилучший баланс между чувствительностью и специфичностью. Для анализа выживаемости применяли метод Каплана – Мейера, а различия между кривыми оценивали с помощью лог-рангового теста (log-rank test).

Для оценки независимой связи CD44 с короткой выживаемостью использовали логистическую регрессию с расчетом отношения шансов и 95% доверительного интервала. Также была построена многофакторная модель с поправкой на размер опухоли (T) и вовлеченность регионарных лимфатических узлов (N). В качестве референсных категорий использовали размер опухоли T1–T2 и отсутствие поражения регионарных лимфатических узлов N0. Уровень статистической значимости принимали равным p<0,05.

Результаты исследования и их обсуждение

На первом этапе была проведена оценка клинических характеристик пациентов, стратифицированных по продолжительности общей выживаемости. В качестве порогового значения была принята медиана общей выживаемости, составившая 42 месяца. Такой подход позволил выделить группу короткой выживаемости, включавшую 20 пациентов, и группу длительной выживаемости, включавшую 11 пациентов.

Сравнение исходных клинических характеристик показало, что по ряду параметров группы были сопоставимы. Размер опухоли T3–T4 отмечался у 15 пациентов группы короткой выживаемости, что составило 75%, и у 7 пациентов группы длительной выживаемости, что составило 64%. Различия не достигали статистической значимости, p=0,623. Вовлечение лимфатических узлов N2 выявлялось у 11 короткоживущих пациентов, что составило 55%, и у 8 долгоживущих пациентов, что составило 73%, при p=0,265.

Более выраженные различия были выявлены по объему хирургического лечения. Пневмонэктомия была выполнена 10 пациентам группы короткой выживаемости, что составило 52%, и только 2 пациентам группы длительной выживаемости, что составило 18%. Различия по данному параметру были статистически значимыми, p=0,039 (табл. 1).

Полученные данные показывают, что продолжительность общей выживаемости в данной выборке не объяснялась только размером опухоли, пораженными регионарными лимфатическими узлами. При этом объем хирургического вмешательства был связан с принадлежностью к группе короткой выживаемости. Такая картина подчеркивает неоднородность клинического течения плоскоклеточного рака легкого IIIA стадии и показывает, что одних стандартных клинических параметров недостаточно для полной оценки прогноза. По этой причине дальнейший анализ был направлен на оценку лабораторно-морфологического маркера CD44, который может отражать биологическую агрессивность опухоли и дополнять клиническую стратификацию пациентов.

Таблица 1

Клиническая характеристика пациентов

Примечание: составлено авторами на основе полученных данных в ходе исследования.

На следующем этапе был проведен сравнительный анализ уровня экспрессии CD44 в группах короткой и длительной выживаемости. Установлено, что у пациентов с короткой выживаемостью данный показатель был статистически значимо выше, чем у пациентов с долгой выживаемостью. В группе короткой выживаемости медиана экспрессии CD44 составила 70% при межквартильном размахе 60–77,5%, тогда как в группе долгоживущих - 30% при межквартильном размахе 25–60%. Различия были статистически значимыми, p=0,0071 (рис. 1). Полученные данные свидетельствуют о связи высокой экспрессии CD44 с менее благоприятным течением заболевания.

Рис. 1. Сравнение уровня экспрессии CD44 в группах короткой и длительной выживаемости. Примечание: составлено авторами по результатам данного исследования

Следующим этапом была оценка способности CD44 разграничивать группы короткой и длительной выживаемости. По результатам ROC-анализа площадь под кривой составила 0,794, что указывает на умеренно хорошую дискриминационную способность данного показателя. Оптимальный cut-off по индексу Юдена составил 70%. При этом чувствительность была равна 57,9%, а специфичность - 90,9% (рис. 2). Таким образом, хотя чувствительность маркера оказалась умеренной, его высокая специфичность позволяет рассматривать повышенную экспрессию CD44 как достаточно надежный признак неблагоприятного прогноза.

Рис. 2. ROC-кривая для CD44 при прогнозировании короткой выживаемости.

Примечание: составлено авторами по результатам данного исследования

Для оценки прогностического значения CD44 был выполнен анализ выживаемости методом Каплана – Мейера. Пациентов разделили на группы CD44 менее 70% и CD44 70% и более, поскольку данный порог был определен по результатам ROC-анализа как оптимальный cut-off. Кривые выживаемости статистически значимо различались, log-rank p=0,035 (рис. 3). Это указывает на то, что высокая экспрессия CD44 связана с менее благоприятной общей выживаемостью и может использоваться как дополнительный критерий прогностической стратификации [13].

Рис. 3. Кривые выживаемости Каплана – Мейера в зависимости от уровня экспрессии CD44. Примечание: составлено авторами по результатам данного исследования

Для оценки связи CD44 с вероятностью короткой выживаемости была проведена логистическая регрессия. В однофакторной модели увеличение уровня CD44 на 1% сопровождалось повышением шансов принадлежности пациента к группе короткой выживаемости: OR=1,048; 95% ДИ 1,007–1,091; p=0,021. В многофакторную модель были включены CD44, размер опухоли T (T1-2 vs T3-4) и вовлеченность регионарных лимфатических узлов N (N0 vs N+). После поправки на T и N статистически значимая связь сохранялась только для CD44: OR=1,048 на каждый 1% увеличения экспрессии; 95% ДИ 1,007–1,091; p=0,021. Тогда как для клинических параметров T и N статистически значимых ассоциаций получено не было (табл. 2). Таким образом, в многофакторной модели независимая статистически значимая связь с короткой выживаемостью была выявлена только для CD44.

Таблица 2

Результаты логистической регрессии для оценки связи CD44 с короткой выживаемостью

Примечание: составлено авторами на основе полученных данных в ходе исследования.

При дополнительном анализе связи высокого уровня CD44 с клиническими параметрами статистически значимых различий не выявлено. Это позволяет предположить, что прогностическое значение CD44 определяется не столько стандартными клиническими характеристиками, сколько биологическими особенностями опухоли (табл. 2).

Таблица 3

Связь высокого уровня CD44 с клиническими параметрами

Первичный анализ клинических характеристик показал, что различия в общей выживаемости не могут быть объяснены только анатомической распространенностью опухолевого процесса. Размер опухоли и статус регионарных лимфатических узлов не продемонстрировали статистически значимой связи с принадлежностью пациентов к группе короткой или длительной выживаемости. Более заметная связь была выявлена для пневмонэктомии, однако это отражает не столько собственную биологию опухоли, сколько общую клиническую тяжесть состояния пациента и объем хирургического вмешательства. В этом контексте обращение к CD44 выглядит логичным, поскольку данный маркер может характеризовать клеточные особенности опухоли, которые не всегда проявляются через стандартные клинические показатели.

Полученные результаты подтверждают представление о CD44 как о маркере биологически более агрессивного течения плоскоклеточного рака легкого. Высокий уровень экспрессии CD44 был ассоциирован с короткой выживаемостью, а также сохранял прогностическую значимость после поправки на размер первичной опухоли и статус регионарных лимфатических узлов. Это позволяет рассматривать CD44 не только как сопутствующую характеристику опухолевого процесса, но и как потенциально самостоятельный прогностический маркер [14].

В метаанализе 2025 года показано, что повышенная экспрессия CD44 связана с худшей общей выживаемостью у больных немелкоклеточным раком легкого и чаще выявляется при плоскоклеточном гистологическом варианте. При этом авторы не обнаружили убедительной связи CD44 с TNM-стадией и лимфогенным метастазированием, что соответствует отсутствию статистически значимых ассоциаций с размером опухоли (Т) и поражением регионарных лимфоузлов (N) в исследуемой выборке [14].

Возможное биологическое объяснение полученных результатов связано с тем, что CD44 ассоциирован со свойствами опухолевых клеток, обладающих stem-like фенотипом. В экспериментальной работе Leung и соавт. [15] показано, что CD44-позитивные клетки НМРЛ характеризуются повышенной опухолеобразующей способностью и большей устойчивостью к цисплатину, что может способствовать более агрессивному течению заболевания и неблагоприятному прогнозу.

Вместе с тем данные литературы нельзя считать полностью однородными. Так, Ko и соавт. показали, что высокая экспрессия CD44s чаще встречается при плоскоклеточном раке и может быть связана с поражением лимфатических узлов, однако в подгруппе SCC независимой связи с клиническим исходом выявлено не было. Вероятно, это отражает влияние гистологического варианта, стадии заболевания, размера выборки и различий в методах иммуногистохимической оценки CD44 [16].

Отсутствие связи высокого уровня CD44 с основными клиническими параметрами в может быть обусловлено небольшим числом наблюдений, однако не исключено, что данный маркер отражает самостоятельные особенности опухолевой биологии, не сводимые к стандартным морфологическим и клиническим характеристикам. Это делает CD44 перспективным дополнением к традиционным прогностическим критериям у больных плоскоклеточным раком легкого IIIA стадии. Ограничением исследования является небольшой объем выборки, что требует дальнейшей проверки результатов на более крупных когортах.

Заключение

Полученные данные показали, что у больных плоскоклеточным раком легкого IIIA стадии клиническое течение заболевания остается неоднородным даже в пределах одной стадии. Анализ клинических характеристик показал, что размер опухоли, статус регионарных лимфатических узлов не имели статистически значимой связи с группами выживаемости. При этом пневмонэктомия чаще встречалась у пациентов в группе с короткой выживаемостью. Эти данные подчеркивают, что стандартные клинические параметры не всегда позволяют полноценно объяснить различия в прогнозе у пациентов с плоскоклеточным раком легкого IIIA стадии.

Повышенная экспрессия CD44 была статистически значимо ассоциирована с короткой выживаемостью. Маркер продемонстрировал умеренно хорошую прогностическую способность, высокую специфичность при пороговом значении 70% и был связан с худшими показателями общей выживаемости по данным анализа Каплана - Мейера. Сохранение статистически значимой связи в многофакторной модели после поправки на размер опухоли и вовлеченность регионарных лимфатических узлов позволяет рассматривать CD44 как перспективный независимый прогностический фактор.

Отсутствие устойчивой связи CD44 с большинством стандартных клинических параметров может свидетельствовать о том, что данный маркер отражает самостоятельные биологические особенности опухоли. В практическом плане CD44 может рассматриваться как дополнительный инструмент прогностической стратификации пациентов, однако полученные результаты требуют дальнейшей проверки на более крупных выборках.