Scientific journal

Modern problems of science and education

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

Несмотря на стремительное развитие медицины за последние десятилетия, на сегодняшний день прижизненное морфологическое исследование почечной ткани остается самым достоверным и точным методом диагностики [1; 2]. Несомненно, исследования в области патоморфоло­гии нефросклероза открывают широкие возможности для постановки окончательного диагноза, прогнозирования течения и ис­хода хронических заболеваний почек (ХБП) и выбора пато­генетически обусловленного лечения этих состояний [5; 6].

В работах многих исследователей морфологическая картина хронической болезни почек описывается с учетом классификации, основанной на степени тубулоинтерстициальных изменений, предложенной В.В. Ставской и С.И. Рябовым (1987). Согласно ей выделены степени изменений тубулоинтерстициальной зоны, подразделяющиеся на незначительные, умеренные и выраженные, составляющие соответственно до 30%, от 30 до 70% и более 70% повреждения тубулоинтерстициального аппарата почки [3]. Кроме того, в настоящее время морфологами описана фазность повреждения почечной ткани при различных хронических заболеваниях почек и развитии нефросклероза [1; 3; 7].

Несмотря на многообразие патогенетических механизмов повреждения почечной ткани, последствия всех этих процессов сводятся к формированию нефросклероза с развитием функциональной недостаточности почек [1]. Важно диагностировать склеротические процессы на ранней стадии их развития, что нередко является трудной задачей.

Статистика в медицине является одним из инструментов анализа экспериментальных данных и клинических наблюдений. Кроме того, математический аппарат широко применяется в диагностических целях, решении классификационных задач и поиске новых закономерностей для постановки новых научных гипотез [4].

Цель исследования

Разработка морфологических критериев развития нефросклероза и формирование их стадийности для ранней диагностики степени повреждения почек.

Материал и методы

Материалом исследования послужили 29 образцов почечной ткани, 17 из которых получены с помощью прижизненной биопсии и 12 – аутопсии от детей, страдающих заболеваниями почек в возрасте от 3 месяцев до 16 лет. Все дети страдали обструктивной уропатией, длительность болезни у 70% из них была больше года.

Материал для гистологического исследования фиксировали в 10%-ном нейтральном формалине, обезвоживали в ацетон-ксилоловой батарее и заливали в парафин. После депарафинизации срезы толщиной 3-5 мкм окрашивали гематоксилином-эозином для обзорного гистологического изучения. Для оценки степени разрастания соединительной ткани – пикрофуксиновой смесью по методу Ван Гизона (метод окраски микропрепаратов в гистологии, предназначенный для изучения структуры соединительной ткани. Красителем служит смесь кислого фуксина и пикриновой кислоты, причем первый компонент окрашивает коллагеновые волокна в ярко-красный цвет, а второй придает прочим структурам ткани жёлтую окраску, разработан в 1889 г.) и трихромом по Массону. Для выявления признаков дезорганизации соединительной ткани использовали гистохимический метод ОКГ (оранжевый Ж, кислотный красный, водный голубой). При проведении стандартного гистологического исследования оценивали клубочковый аппарат и состояние тубулоинтерстициальной зоны.

Процедуры статистического анализа выполнялись с помощью статистического пакета STATISTICA 10. Критическое значение уровня статистической значимости (p) при проверке нулевых гипотез принималось равным 0,05. В случае превышения достигнутого уровня значимости статистического критерия этой величины принималась нулевая гипотеза. Исследование взаимосвязи между парами признаков проводилось с помощью критерия корреляции Пирсона (r). Вычислялись оценки интенсивности связи анализируемых признаков и достигнутый уровень значимости (p) с помощью t-критерия Стьюдента.

Результаты исследования и их обсуждение

Определены критерии изменения структуры тканей той или иной зоны, которые отражают степень и тяжесть поражения почечной паренхимы. Они, в свою очередь, были сгруппированы в группы по степени повреждения ткани почек.

К ранним критериям повреждения почечной паренхимы мы отнесли: наличие дистрофии и/или атрофии канальцев, лимфогистицитарную инфильтрацию, ангиоматоз сосудов. В перечень более выраженных изменений ткани почек, включая ранние изменения, включены: истончение паренхимы и утолщение стенки сосудов. И самые тяжелые патологические изменения - это прогрессирование атрофии, склероз канальцев, клубочков, сосудов почек с нарушением дифференцировки коркового и мозгового вещества почек.

Существуют ли закономерности фазности указанных изменений и их взаимосвязь в процессе развития нефросклероза? Проведенное корреляционное исследование показало наличие взаимосвязей между некоторыми показателями. Интерпретируя результаты корреляционного анализа, представлено абсолютное значение коэффициента корреляции r и достигнутый уровень значимости p.

Сильные корреляционные связи были выявлены при изучении следующих показателей:

- морфологические показатели склероза клубочков и канальцев, связь прямая (r=0,79, р<0,001);

- толщина паренхимы почек и наличие кист и хрящевой ткани, связь обратная (r= –0,76, р<0,001).

Средние прямые корреляционные связи обнаружены в показателях:

- склероз сосудов почек и клубочков (r=0,58, р=0,015, р<0,05);

- склероз сосудов почек и лимфогистиоцитарная инфильтрация стромы (r=0,50, р=0,038, р<0,05);

- дисплазия почечной ткани с наличием кист и хрящевой ткани (r=0,53, р=0,029, р<0,05).

Средние обратные корреляционные связи обнаружены в показателях:

- дисплазия почечной ткани с возрастом пациентов (r= –0,57, р=0,017; р<0,05);

- дисплазии почечной ткани с истончением паренхимы (r = –0,53, р=0,029, р<0,05);

- дисплазия почечной ткани и наличие лимфогистиоцитарной инфильтрации паренхимы почек (r = –0,59, р=0,013, р<0,05).

При сопоставлении данных статистического корреляционного исследования и указанных выше морфометрических изменений выделено 3 последовательные стадии развития нефросклероза:

I (единичные изменения):

II (умеренные изменения):

III (выраженные изменения):

Наличие одного или нескольких показателей соответствует 1, 2 или 3-й стадии нефросклероза (таблица).

Стадии развития нефросклероза

I стадия нефросклероза характеризуется единичными изменениями в ткани почек, которые были выявлены у 6,9% детей (рис. 1).

Рис. 1. Нефросклероз, I стадия. Гидронефроз: истонченная до 2 мм ткань почки со слабовыраженной перитубулярной атрофией мозгового слоя. Окр. гематоксилином и эозином, ×100

II стадия проявляется более выраженными изменениями паренхимы почек, включая изменения, характерные для первой стадии. Такие изменения определены у 17,7% детей (рис. 2).

Еще в 17,7% образцов имелись изменения, характерные для 1-2-й стадии нефросклероза (единичные изменения, но уже с более глубоким поражением почек).

Рис. 2. Нефросклероз, II стадия. Дисплазия почки: эмбриональные клубочки с явлениями сегментарного склероза и островок хряща среди клеточных скоплений мезенхимального типа. Окр. гематоксилином и эозином, ×400

III стадия характеризуется склеротическими изменениями клубочков, сосудов, канальцев, которые выражаются грубыми нарушениями, проявляющиеся отсутствием кортикомедуллярной дифференцировкой паренхимы почек. Таких образцов ткани почек было 52,9% (рис. 3).

Рис. 3. Нефросклероз, III стадия. Тотальный склероз большинства гломерул на фоне перигломерулярного и выраженного межуточного склероза и лимфоидно-гистиоцитарной инфильтрации коркового слоя. Окр. гематоксилином и эозином, ×100

Немаловажную роль в наличии патологии почек играют диспластические изменения и длительность заболевания. В нашем исследовании у 47% детей при морфологическом изучении почек была выявлена дисплазия почечной ткани (рис. 4).

Рис. 4. Дисплазия почки: примитивные расширенные протоки среди рыхлой волокнистой соединительной ткани. Окр. гематоксилином и эозином, ×100

Заключение

В настоящем гистоморфологическом исследовании образцов ткани почек детей с обструктивными уропатиями была выявлена закономерность развития патологических изменений в структурах почечной ткани (кортикальной и тубулоинтерстициальной зонах). Проведенный статистический анализ выявил корреляционную взаимосвязь различной силы и направления стадий нефросклероза и морфометрических критериев со степенью развития дистрофических изменений в клубочках, канальцах, сосудов с исходом в склероз. Наличие дисплазии почечной ткани является одним из основных факторов риска развития патологии почек, будь то септические или асептические процессы, приводящие к хронической почечной недостаточности (ХПН) в детском возрасте. Данный факт играет важную роль в ранней диагностике и профилактике развития хронической почечной недостаточности. В результате исследования предложена классификация стадий нефросклероза с указанием степени и глубины поражения почек при гистоморфологическом анализе. Выделены статистически значимые критерии нефросклеротических изменений в почках. Статистическая обработка медицинских исследований базируется на принципе того, «что верно для случайной выборки, верно и для генеральной совокупности (популяции), из которой эта выборка получена» [4].

Предложенная классификация стадий нефросклероза может быть использована для указания степени поражения почек, что будет главным образом оказывать влияние на методы почечной терапии, направленные на замедление и предотвращение развития терминальной почечной недостаточности и применение методов заместительной почечной терапии у детей. Совершенствование методов диагностики и лечения заболеваний почек во многом способствует замедлению развития хронической почечной недостаточности, позволяет удлинять додиализный период, снижать частоту смертности.