Scientific journal
Modern problems of science and education
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

DEVELOPMENT OF METHODS OF DETECTIONRISPERIDONE, OLANZAPINE, SERTINDOLE,ABILIFY AND HALOPERIDOL IN THE MIX

Senchenko S.P. 1 Demchenko Yu.V. 1 Remezova I.P. 1 Lazaryan D.S. 1
1 Pyatigorsk Medical and Pharmaceutical Institute - branch of the «Volgograd state medical University» of the Ministry of health of the Russian Federation
"Atypical" antipsychotics abroad are used more often than traditional drugs in the treatment of schizophrenia, despite their high cost. Typically assigned classic neuroleptick in injectable dosage form with simultaneous appointment of "atypical" antipsychotic in oral dosage form. Therefore, when you encounter poisoning in biological liquid-level positions for some time, you might find a few doses at a time. For an accurate diagnosis of poisoning it is necessary to develop a method of detection in the joint presence according. The purpose of this study was to develop detection techniques risperidone, olanzapine, sertindole, abilifyand haloperidol in the solutions for later use in chemical and toxicological analysis. We have developed methods of detection of risperidone, olanzapine, sertindole, abilifyand haloperidol in solution by UV - spectrophotometry and HPLC. Discover risperidone, olanzapine, sertindole, abilify and haloperidol in the presence in solution by UV - spectrophotometry is not possible, as there are overlapping absorption bands in the analysis of mixtures.When using the method of HPLC observed nerasta by peaks in the analysis of the mixture, which will lead to distortion of results and their interpretation in chemical and toxicological. We investigated the possibility of detecting risperidone, olanzapine, sertindole, abilifyand haloperidol by capillary electrophoresis, which allows you to share components between them. The methodology will be used by us in the scheme of the chemical and toxicological analysis of the studied substances in biological fluids.
capillary electrophoresis.
HPLC
UV-spectrophotometry
poisoning
atypical antipsychotics
«Атипичные» нейролептики –препараты нового поколения, к которым  в настоящее время относят клозапин, оланзапин, рисперидон,  сертиндол, абалифайи некоторые другие [1; 2]. «Атипичные» нейролептики позволяют решить три задачи: преодолеть терапевтическую резистентность, уменьшить выраженность экстрапирамидных симптомов и негативной симптоматики, на которые традиционные препараты влияют слабо.Дозы препаратов подбираются индивидуально.

При переходе с терапии типичным нейролептиком на «атипичный» обычно проводят постепенную отмену старых препаратов с «наложением» по времени новой терапии. Однако, с другой стороны, и это отмечается многими авторами, в клинической практике порог доз, за которым могут развиться двигательные расстройства, минимален, т.е. повышение дозы на 1-2 мг выше терапевтической уже может вызвать развитие патологии [3]. Обычно назначается классический нейролептик в инъекционной лекарственной форме с одновременным назначением «атипичного» антипсихотика в пероральной лекарственной форме. Клиническим основанием для этого является предположение о более быстром достижении седативного и антипсихотического эффектов при парентеральном введении нейролептика.

Поэтому при возникновении отравлений в биологических жидкостях какое-то время может обнаруживаться несколько нейролептиков одновременно. Для установления точного диагноза отравления необходимо разработать методику их обнаружения при совместном присутствии.

            Цельюнастоящего исследования явилась разработка методики обнаружения рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифая и галоперидола в растворах для последующего применения в химико-токсикологическом анализе.

     Материалы и методы исследования, результаты и их обсуждение.В структурах рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифая и галоперидоланаблюдаютсясложные сопряженные системы, что позволяет использовать метод УФ-спектрофотометрии для их анализа. Так, УФ-спектр рисперидона обусловлен влиянием  сопряженных связей в кольце бензизоксазола, сертиндола - бензольного, индольного и имидазолидинового колец, оланзапина - дибензодиазепинового и пиперазинового колец, абилифая–бензольного и хинолинового колец, галоперидола–фенильных радикалов.

Нами были разработаны методики обнаружения рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифаяи галоперидола в растворах методом УФ-спектрофотометрии [4-8]. Для этого готовили растворы в 96%-ном этаноле с концентрацией вещества, указанной в таблице1. Спектры полученных растворов регистрировали в области 200-300 нм на спектрофотометре СФ-56 при длине рабочего слоя 1 см. Условия обнаружения рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифая и галоперидола в растворах методом прямой УФ-спектрофотометриипредставлены в таблице 1.

Таблица 1

Условия обнаружения рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифая

и галоперидола методом УФ-спектрофотометрии

Название вещества

Концентрация раствора, мг/мл

λmax , нм

λmin , нм

Рисперидон

0,05

238±2, 275±2

253±2

Сертиндол

0,02

225±2 и 260±2

243±2

Оланзапин

0,01

230±2  и 275±2

255±2

Абилифай

0,002

0,02

210±2

245±2

-

Галоперидол

0,01

255±2

-

 

Спектр рисперидона, сертиндола, оланзапинахарактеризуется наличием максимумов и минимумов, абилифая и галоперидола – только максимумов. Как видно из представленных данных, обнаружить рисперидон, оланзапин, сертиндол, абилифай и галоперидол при совместном присутствии в одном растворе методом прямой УФ-спектрофотометрии не представляется возможным, так как наблюдается наложение полос поглощения при анализе смеси, что приведет к искажению результатов и их интерпретации при химико-токсикологическом исследовании.

Нами исследована возможность использования метода ВЭЖХ для анализа смеси рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифая и галоперидола, так как существенным отличием хроматографических методов, к которым относится ВЭЖХ, от других физико-химических методов анализа является возможность разделения близких по свойствам веществ.

Нами разработаны методики обнаружениярисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифаяи галоперидола в растворе методом ВЭЖХ [6; 8; 9]. Для обнаружения изучаемых веществ использовали хроматограф «Миллихром А-02». Условия обнаружения рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифая и галоперидолапредставлены в таблице 2.

Таблица 2

Условия обнаружения рисперидона, оланзапина,сертиндола, абилифаяи галоперидола методом ВЭЖХ

Название вещества

Концентрация, мг/мл

Скорость потока, мкл/мин

Время измерения, мин

Температура термостата колонки, оС

Объем пробы, мкл

Элюент Б, %

Длина волны, нм

Время удерживания основного пика, мин

Время удерживания минорных пиков, мин

Рисперидон

0,16

100

15

35

10

20-80

238

7,85

9,84; 10,91; 13,14

Сертиндол

0,16

100

15

20

5

10-90

230

12

-

Оланзапин

0,5

100

15

20

2

10-90

270

7,75

8,86; 9,95; 11,02

Абилифай

1

200

15

20

10

20-80

260

11,5

13,26; 14,07

Галоперидол

0,2

100

15

20

5

10-90

255

8,82

-

 
При изучении условий обнаружения каждого вещества в растворе нами не использовались подвижные фазы с объемной долей органического растворителя более 80% для исключения  нормально-фазовых взаимодействий, затрудняющих дальнейшее регулирование состава подвижной фазы. Объемная доля растворителя менее 10% приводила к функциональной неустойчивости подвижной фазы и невоспроизводимости времен удерживания. Полученные хроматограммы характеризовались временами удерживания основных пиков изучаемых веществ. На хроматограммахрисперидона, оланзапина и абилифая присутствовали минорные пики.

Разработанные методики обнаружения изучаемых веществ методом ВЭЖХ могут применяться для двух или трех компонентов при совместном присутствии. Подобрать оптимальные условия, при которых можно было бы обнаружить рисперидон, оланзапин, сертиндол, абилифай и галоперидол при совместном присутствии всех изучаемых веществ,в растворе методом ВЭЖХ не представляется возможным, так как наблюдаются неразделенные пикипри анализе смеси, что приведет к искажению результатов и их интерпретации при химико-токсикологическом исследовании.

Нами было исследована возможность обнаружения рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифаяи галоперидола методом капиллярного электрофореза. В отличие от разделения смеси методом ВЭЖХ, который использует в качестве ограниченного пространства, где происходит разделение, колонку - разделение смеси методом капиллярного электрофореза ослабляет такиефакторы, как диффузионные, сорбционные, конвекционные, гравитационные и т.д., благодаря чему достигается высокая эффективность разделения.

При анализе были выбраны следующие параметры приготовления раствора ведущего электролита: 0,78 г натрия гидрофосфата помещали в мерную колбу на 100 мл, растворяли в 90 мл воды очищенной, добавляли кислоту фосфорную до рН 2,5, раствор доводили водой до метки. Режим ввода пробы: 30 мбар/сек 5 сек, напряжение + 25 кВ, сила тока: 68 мА. Анализ проводился на приборе «Капель 103 Р». Использовался капилляр с длиной 65 см, эффективная длина капилляра - 55 см, диаметр капилляра 50 мкм. Регистрация электрофореграмм проходила при фиксированной длине волны 254 нм. Полученные качественные характеристики изучаемых веществ представлены в таблице 3.

Таблица 3

Условия обнаружения рисперидона, оланзапина,сертиндола, абилифая и галоперидола

методом капиллярного электрофореза

Название вещества

Концентрация, мг/мл

Время миграции, мин

Рисперидон

0,16

9,75

Сертиндол

0,16

16,4

Оланзапин

0,5

9,08

Абилифай

1

16,87

Галоперидол

0,2

15,13

Полученная электрофореграмма представлена на рисунке 1.

Рис. 1.Электрофореграмма смеси рисперидона, оланзапина, сертиндола,

абилифая и галоперидола

Полученная хроматограмма свидетельствует о том, что наблюдается разделение рисперидона, оланзапина, сертиндола, абилифая и галоперидола в смесибез дополнительных операций для их разделения, что может использоваться в последующем при разработке схемы химико-токсикологического анализа изучаемых веществ.

Вывод

Метод капиллярного электрофореза позволяет обнаружить рисперидон, оланзапин, сертиндол, абилифайи галоперидол в смеси, что будет использоваться нами при разработке схемы химико-токсикологического анализа изучаемых веществ в биологических жидкостях.

Рецензенты:

Оганесян Э.Т., д.фарм.н., профессор, заведующий кафедрой органической химии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский медицинский университет» МинздраваРФ, г. Пятигорск;

Коновалов Д.А., д.фарм.н., заместитель директора по науке, заведующий кафедрой фармакогнозии Пятигорского медико-фармацевтического института - филиала ГБОУ ВПО «Волгоградский медицинский университет» МинздраваРФ, г. Пятигорск.