Иксодовый клещевой боррелиоз собак - относительно новое трансмиссивное инфекционное заболевание собак, характеризующееся преимущественно бессимптомным и хроническим течением [2; 7]. Лечить и поддерживать нормальное клиническое состояние заболевших животных проблематично - чем раньше удается диагностировать болезнь Лайма и начать его лечение, тем выше вероятность успеха [3]. Однако диагностика и терапия Лайм-боррелиоза собак не всегда бывают успешными. Ввиду отсутствия характерных клинических и патологоанатомических признаков в ветеринарных клинках Омской области иксодовый клещевой боррелиоз (ИКБ) у собак диагностируется редко [1; 4]. Специфические методики в ветеринарных лабораториях, обслуживающих мелких домашних животных, не используются из-за их дороговизны, громоздкости и трудоемкости.
Ранее в Омской области исследования, связанные с распространением данного заболевания, с охватом большой популяции собак, не проводились.
Цель исследований. Изучить эпизоотологическую ситуацию в Омской области в отношении клещевого боррелиоза у собак.
Материалы и методы исследования. Исследования проводили в период с 2011 по 2014 г. на базе ветеринарных клиник Омской области и ФГУН Омского научно-исследовательского института природно-очаговых инфекций. Объектом исследований служили собаки (n=996) и клещи, снятые с животных (n=1597). Собаки принадлежали разным возрастным группам (до 1 года, молодняк - 1-5 года, животные зрелого возраста - 6-10 лет и стареющие - старше 10 лет), с массой тела от 2 до 65 кг, разного пола (434 суки и 562 кобеля) и пород, в зависимости от весовых групп (мелкие, средние, крупные и гигантские).
Материалом служили пробы крови и сыворотки, взятые от животных, которых разделили на три группы: клинически здоровые (n=348), больные с симптомами поражения опорно-двигательного аппарата (n=412) и больные с различными клиническими признаками поражения тех или иных систем организма (n=236). Кровь брали из подкожной вены предплечья по общепринятой методике.
Сыворотку крови на специфические антитела к боррелиям исследовали при помощи реакции непрямой иммунофлуоресценции (РНИФ) на люминесцентном микроскопе Axiostar plus (Германия), с использованием корпускулярного антигена B.afzelii (штамма Ip-5215) и иммуноглобулина диагностического флуоресцирующего антивидового против иммуноглобулинов собаки (ФГБОУ НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, Москва). Диагностически значимые титры антител считали в разведении 1:40 и выше.
Обнаружение ДНК боррелий в организме клещей и крови собак осуществляли с использованием полимеразной цепной реакции (ПЦР). ПЦР-анализ в реальном времени проводили на термоциклере «CFX96 Real-Time System Bio-Rad Laboratories C1000», или в амплификаторе «Терцик» с применением флуоресцентного ПЦР-детектора «Джин-4» (ООО «НПО ДНК-Технология»), или в камере горизонтального электрофореза Helicon SE-2 с источником питания «Эльф-2» и трансиллюминатором компактным ECX-F15.M (Vilber Lourmat). При постановке реакций использовали наборы реагентов для выделения тотальной РНК/ДНК из клинического материала «Рибо-преп» («Интерлабсервис», Москва), и выявления ДНК боррелий комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato производства «ДНК-Технология» (Москва).
Результаты исследований и их обсуждение
Количество и активность иксодовых клещей, снятых с собак, за 2011-2014 гг. варьируют в разные годы от 139 до 547 штук с пиком в мае и августе (рис. 1).
Рис. 1. Динамика численности иксодовых клещей, снятых с собак, в г. Омске и Омском районе.
В остальном сезонный ход активности клещей имел типичное течение: снижение их активности фиксировали в июне-июле, затем в сентябре-октябре. Из данных рисунка видно, что прослеживается ежегодное увеличение числа случаев нападения клещей на животных. Например, в мае 2011 года количество напавших клещей составляло 31 (22,3%), а в мае 2014 года - уже 235 (43%).
В результате исследования клещей-переносчиков (n=1597) методами темнопольной микроскопии и ПЦР, возбудитель ИКБ B. burgdorferi s.l. или его ДНК обнаружен в 28 случаях (1,8%), что позволяет отнести территорию Омской области к зоне низкого риска заражения ИКБ среди собак.
Из 28 инфицированных клещей 12 экз. (42,8%) принадлежат виду Dermacenter reticulatus, остальные 16 экз. (57,2%) - Ixodes persulcatus.
В результате проведенных нами исследований по изучению численности и уровня зараженности самок и самцов иксодовых клещей установлено, что по количеству преобладали самки (87,5% - у I. persulcatus и 81,6% - у D. reticulatus). Уровень зараженности у особей D. reticulatus приблизительно равный: самки - 0,8%, самцы - 0,7% случаев, у самок I. persulcatus уровень зараженности в 2 раза превышал таковой у самцов (табл. 1).
Таблица 1
Инфицированность боррелиями самок и самцов иксодовых клещей
№ п/п |
Вид клеща |
Пол |
Количество исследуемых особей |
Количество зараженных особей |
Процент зараженности |
1 |
D. reticulatus |
самки |
1284 |
10 |
0,8 |
самцы |
289 |
2 |
0,7 |
||
итого |
1573 |
12 |
0,76 |
||
2 |
I. persulcatus |
самки |
21 |
15 |
71,4 |
самцы |
3 |
1 |
33,3 |
||
итого |
24 |
16 |
66,7 |
||
|
В среднем |
|
1597 |
28 |
1,8 |
Из 996 обследованных собак за отчетный период у 34 животных (3,4%) в сыворотке крови были выявлены антитела к боррелиям в разведениях от 1:40 до 1:160, и у семи особей (0,7%) - ДНК-возбудителя, при этом специфических антител в крови у этих собак не обнаружено, что может свидетельствовать о недавней зараженности животных (антитела появляются только на 21-й день после укуса клеща).
Рис. 2. Инцидентность Лайм-боррелиоза у собак (в перерасчете на 1000 животных).
Установлено, что инцидентность (в перерасчете на 1000 животных) клещевого боррелиоза собак возросла в период с 2011 по 2013 г. с 0,6 до 1,7 (рис. 2).
Среди заболевших собак 11 сук (26,%) и 30 кобелей (73,2%), что свидетельствует о вероятной предрасположенности кобелей к данному заболеванию.
Высокий титр специфических антител к боррелиям обнаружили у животных всех возрастов, начиная с 5 месяцев. Значительной разницы в частоте проявления ИКБ у собак разных возрастов не установлено (табл. 2).
Таблица 2
Распространение клещевого боррелиоза у собак разных возрастных групп
Количество инфицированных |
Возраст животных, лет |
|||
до года |
1-5 |
6-10 |
10 лет и старше |
|
41 |
10 (24,4%) |
14 (34,1%) |
12 (29,3%) |
5 (12,2%) |
Заболеваемость собак Лайм-боррелиозом не зависит от породной принадлежности животных (табл. 3).
Большая инфицированность обнаружена у собак при свободном выгуле (56,1%), менее - при вольерном содержании (43,9%). Что объясняется большей вероятностью контакта собак с клещами.
Таблица 3
Заболеваемость клещевым боррелиозом собак различных пород
Наименование пород |
Количество инфицированных животных (n=41) |
|
голов |
% |
|
Лабрадор |
2 |
5,0 |
Лабрадор-ретривер |
1 |
2,5 |
Немецкая овчарка |
4 |
9,6 |
Кавказская овчарка |
3 |
7,3 |
Мопс |
1 |
2,5 |
Английский кокер-спаниель |
4 |
9,6 |
Чау-чау |
2 |
5,0 |
Такса |
4 |
9,6 |
Фокстерьер |
1 |
2,5 |
Лайка |
5 |
12,2 |
Дратхар |
1 |
2,5 |
Пекинес |
2 |
5,0 |
Стаффордширский терьер |
1 |
2,5 |
Помесные |
10 |
24,2 |
При серологическом исследовании было выявлено 12 положительных проб у клинически здоровых собак (29,3%), 28 - с заболеванием опорно-двигательного аппарата (68,3%) и одна проба (2,4%) - собаки с признаками заболевания почек. Выявление специфических антител у клинически здоровых животных подтверждает сведения о возможном бактерионосительстве или скрытом течении болезни [5].
Сезонность при болезни Лайма у собак не проявляется. Известно, что инкубационный период болезни варьирует от 2 месяцев до года и даже нескольких лет [6]. Случаи заболевания ИКБ регистрировали на протяжении всего года.
Заключение
Таким образом, заболеваемость ИКБ, диагностированного у обследованных в 2011-2014 гг. собак, составила 29,1 на тыс. животных, а инфицированность - 12,05 на тыс. животных, что доказывает наличие природных очагов ИКБ собак на территории Омской области. Основываясь на результатах проведенных нами исследований, можно констатировать, что риск заболевания Лайм-боррелиоза выше у собак молодого возраста, а также кобелей. К числу прогностических факторов риска также относится способ содержания животных. Вопреки распространенному мнению, нам не удалось подтвердить породную предрасположенность к болезни.
На основании проделанной работы можно рекомендовать проведение серологических исследований на ИКБ у всех собак, проходящих плановый осмотр, с целью выявления доклинического течения инфекции.
Рецензенты:
Власенко В.С., д.б.н., доцент, старший научный сотрудник лаборатории эпизоотологии и мер борьбы с туберкулезом ГНУ «ВНИИБТЖ Россельхозакадемии», г. Омск.
Красиков А.П., д.вет.н., профессор, профессор кафедры микробиологии, инфекционных и инвазионных болезней ФГБОУ ВПО «ОмГАУ им. П.А. Столыпина», г. Омск.