Современное свиноводство, как в нашей стране, так и за рубежом, развивается и совершенствуется на основе достижений генетики и биотехнологии. Ведомственная целевая программа «Развитие свиноводства в Российской Федерации на период 2006-2010 гг. и до 2015 г.», наряду с использованием передовых энергосберегающих, ресурсосберегающих и экологически безопасных технологий, предусматривает внедрение эффективных селекционно-генетических и биологических методов совершенствования лучших отечественных и зарубежных пород и линий свиней.
В племенном свиноводстве в Европе и Америке начинают применять геномную селекцию. Технологии геномной селекции позволяют расшифровать генотип свиней уже при рождении и отбирать для разведения лучших животных. Эта новейшая технология призвана в дальнейшем увеличивать селекционную точность и надежность племенной ценности свиней [Зиновьева Н.В. и др., 2006]. Родоначальником геномной селекции является маркерная селекция.
В настоящее время у свиней известен целый ряд генов-маркеров, представляющих интерес при селекции на воспроизводительные, откормочные и мясные качества.
Одним из перспективных генов-маркеров откормочной и мясной продуктивности свиней является ген рецептора меланокортина 4 (MC4R). Замена одного нуклеотида А на G приводит к изменению аминокислотного состава МС4-рецептора. В результате происходит нарушение регуляции секреции клеток жировой ткани и приводит к нарушению липидного обмена, что непосредственно влияет на процесс формирования признаков, характеризующих откормочные и мясные качества свиней.
В связи с вышеизложенным, целью представленной работы является определение влияния генотипов гена MC4R на откормочные и мясные качества свиней породы ландрас.
Материалы и методы
Молекулярно-генетические исследования проводили в лаборатории молекулярной диагностики и биотехнологии с.-х. животных Донского государственного аграрного университета. Генотипы гена MC4R определяли методом ПЦР-ПДРФ (полимеразная цепная реакция – полиморфизм длин рестрикционных фрагментов), который состоит из следующих стадий:
1) выделение ДНК из проб ткани;
2) амплификация интересующего фрагмента;
3) рестрикция амплифицированного фрагмента;
4) визуализация результатов.
Для выделения ДНК из образцов ткани свиней (выщипы с ушной раковины площадью 1 см²) использовали набор DIAtom DNA Prep 100 («Изоген», Россия). Для определения генотипов гена MC4R получали специфический фрагмент – амплификат ДНК и с помощью рестриктазыTaqI («СибЭнзим», Россия) получали фрагменты различной длины. При наличии мутации фермент не разрезает выделенный фрагмент и на геле регистрируется одна полоса - 226 п.н., что соответствует генотипу АА. Если амплификат ДНК расщепляется на две части, на геле видны две полосы – 156 и 70 п. н., следовательно, мутация в нем отсутствует, такая проба соответствует генотипу GG, три полосы – 226, 156 и 70 п.н. – гетерозиготному генотипу AG.Анализ образующих фрагментов проводили методом электрофореза в 2% агарозном геле с добавлением бромистого этидия.
Оценка влияния генотипов гена MC4R на откормочные качества хрячков породы ландрас (n=66 гол.) проводили по результатам контрольного выращивания. Учитывали скороспелость (возраст достижения живой массы 100 кг) (дн.), длину туловища (см), среднесуточный прирост (г), толщину шпика (мм) и затраты корма на 1 кг прироста (к. ед.).
Биометрическую обработку данных проводили согласно общепринятым методикам с использованием программы Excel.
Результаты исследования и их анализ
В результате проведения ДНК-генотипирования хряков породы ландрас установлены все три генотипа АА, AG и GG генаMC4R (табл. 1). Очень низкой частотой в исследуемой популяции обладал генотип АА и свиньи этого генотипа были исключены из дальнейшего анализа.
Таблица 1
Частота аллелей и генотипов генаMC4R
|
Генотипы,% |
Аллели, % |
|||
MC4R |
АА |
АG |
GG |
A |
G |
Кол-во, гол. |
4 |
33 |
29 |
|
|
Частота встречаемости, % |
6,2 |
49,2 |
44,6 |
30,8 |
69,2 |
На рисунках 1-5 представлены гистограммы распределения показателей для каждого рассматриваемого признака в двух вариантах: а) общая гистограмма распределения признака и б) три интервала значений признака – минимальное, среднее и максимальное.
Скороспелость
Рис.1а
Рис.1б
Рис. 1. Распределение скороспелости свиней
На рисунке 1б выделено три интервала значений скороспелости: 1– до 142 дней, 2 – от 142-148 и 3 – от 148 и выше. В результате чего установлено, что 37,7% хряков имеют скороспелость до 142 дн., из них 65,2% хряков генотипа AG, а изгруппы хряков со скороспелостью больше 148 дней – 66,7% генотипа GG (табл. 2).
Таблица 2
Распределение скороспелости свиней различных генотипов гена MC4R
Скороспелость, дн. |
Хряки ЛД |
Из них с генотипом |
||
голов |
% |
AG, % |
GG, % |
|
До 142 |
23 |
37,7 |
65,2 |
34,8 |
142-148 |
32 |
52,5 |
46,9 |
53,1 |
Больше 148 |
6 |
9,8 |
33,3 |
66,7 |
Среднесуточные приросты
Рис. 2а
Рис.2б
Рис. 2. Распределение среднесуточных приростов свиней
На рисунке 2б выделено три интервала значений среднесуточных приростов: 1– до 1082, 2 – от 1082- 1202 и 3 – выше 1202 г, около 16,4% свиней из общей выборки имеют среднесуточные приросты выше 1202г, при этом 80% хряков этой группы имеют генотип AG (табл. 3).
Таблица 3
Распределение среднесуточных приростов свиней различных генотипов гена MC4R
Среднесуточный прирост, г |
Хряки ЛД |
из них с генотипом |
||
голов |
% |
AG, % |
GG, % |
|
До 1082 |
26 |
42,6 |
42,3 |
57,7 |
1082-1202 |
25 |
41,0 |
52 |
48 |
Больше 1202 |
10 |
16,4 |
80 |
20 |
Затраты корма
Рис.3а
Рис.3б
Рис. 3. Распределение затрат корма на 1 кг привеса свиней
На рисунке 4б выделено три интервала значений по затратам корма на 1 кг прироста: 1– до 2,3 к.ед., 2 – от 2,3-2,86 к.ед. и 3 – более 2,86 к.ед. Установлено, что более 2,86 к.ед. на 1 кг прироста затрачивают 13,1 % животных, из них 75% имеют генотип AG (табл. 4).
Таблица 4
Распределение затрат корма свиней различных генотипов гена MC4R
Затраты корма, к.ед. |
Хряки ЛД |
из них с генотипом |
||
голов |
% |
AG, % |
GG, % |
|
До 2,3 |
12 |
19,7 |
58,3 |
41,7 |
2,3-2,86 |
41 |
67,2 |
46,3 |
53,7 |
Больше 2,86 |
8 |
13,1 |
75,0 |
25,0 |
Толщина шпика
Рис. 4а
Рис. 4б
Рис. 4. Распределение толщины шпика свиней
На рисунке 4б выделено три интервала значений толщины шпика: 1– до 9,4 мм, 2 – от 9,4-12,8 мм и 3 – более 12 мм. Взаимосвязи между генотипами AA и AG по гену MC4R и распределением значений толщины шпика не было установлено (табл. 5).
Таблица 5
Распределение толщины шпика хряков различных генотипов гена MC4R
Затраты корма, к.ед. |
Хряки ЛД |
из них с генотипом |
||
голов |
% |
AG, % |
GG, % |
|
До 9,4 |
19 |
31,1 |
57,9 |
42,1 |
9,4 – 12,8 |
25 |
41,0 |
44,0 |
56,0 |
Больше 12,8 |
17 |
27,9 |
58,8 |
41,2 |
Длина туловища
Рис. 5а
Рис. 5б
Рис. 5. Распределение длины туловища свиней
На рисунке 5б выделено три интервала значений длины туловища: 1– до 125 см, 2 – от 125-138 см и 3 – более 138 мм. Взаимосвязи между генотипами AA и AG по гену MC4R и распределением значений длины туловища установлено не было (табл. 6).
Таблица 6
Распределение длины туловища свиней различных генотипов гена MC4R
Длина туловища, см |
Хряки ЛД |
из них с генотипом |
||
голов |
% |
AG, % |
GG, % |
|
До 125 см |
22 |
36,1 |
40,9 |
59,1 |
125-138 |
37 |
60,7 |
59,5 |
40,5 |
Больше 138 |
2 |
3,3 |
50,0 |
50,0 |
Проведенный анализ показал, что у свиней породы ландрас существует связь между генотипами генаMC4R и откормочной и мясной продуктивностью (табл. 7).
Таблица 7
Откормочные и мясные качества свиней различных генотипов генаMC4R
|
Скороспелость |
Среднесуточный прирост |
Затраты корма |
Толщина шпика |
Длина туловища |
|||||
|
AG |
GG |
AG |
GG |
AG |
GG |
AG |
GG |
AG |
GG |
M |
142,94٭ |
144,59 |
1180,16٭٭ |
1070,41 |
2,60 |
2,62 |
10,81 |
10,69 |
127,06 |
126,00 |
m |
0,78 |
0,75 |
18,74 |
16,15 |
0,05 |
0,05 |
0,47 |
0,40 |
0,76 |
0,57 |
σ |
4,39 |
4,02 |
111,67 |
86,99 |
0,31 |
0,26 |
2,63 |
2,17 |
4,31 |
3,09 |
σ² |
19,29 |
16,18 |
12470,85 |
7567,61 |
0,10 |
0,07 |
6,93 |
4,72 |
18,58 |
9,57 |
min |
132,00 |
138,00 |
948,00 |
902,00 |
2,10 |
2,10 |
6,00 |
7,00 |
118,00 |
120,00 |
max |
149,00 |
157,00 |
1381,00 |
1254,00 |
3,30 |
3,20 |
15,00 |
15,00 |
138,00 |
134,00 |
Cv |
3,07 |
2,78 |
9,79 |
7,98 |
11,96 |
9,80 |
24,35 |
20,33 |
3,39 |
2,46 |
Разность между значениями генотипов AG и GG достоверна при ٭Р<0,05; ٭٭Р<0,01
Полученные результаты показывают, что хряки генотипа AG достоверно превосходят аналогов генотипа GG по скороспелости (1,65 дн., Р<0,05) и среднесуточным приростам на 110 г (Р<0,01).
Выводы
-
В результате проведения ДНК-генотипирования хряков ЛД было установлено наличие всех трех генотипов АА, AG и GG по гену MC4R. Наименьшей частотой в исследуемой популяции обладал генотип АА (6,2%), при этом генотипы AG (49,2%) и GG (44,6%) имели практически одинаковую частоту.
-
Анализ данных откормочных и мясных качеств и результатов генотипирования показал достоверную связь между генотипами гена MC4R и показателями продуктивности свиней.
-
В качестве «желательного» определен генотип AG, наличие которого у свиней породы ЛД связано с лучшей скороспелостью на 1,65 дн. и среднесуточными приростами на 110 г.
Таким образом, для повышения откормочных и мясных качеств свиней рекомендуется использовать ДНК-генотипирование свиней по гену MC4R в качестве дополнительного критерия отбора и подбора животных.
Рецензенты:
Третьякова О.Л., д.с.-х.н., профессор кафедры частной зоотехнии, ФГБОУ ВПО Донской государственный аграрный университет, Ростовская область, пос. Персиановский;
Колосов Юрий Анатольевич, доктор с.-х. наук, профессор, проректор по НИР, ФГБОУ ВПО Донской государственный аграрный университет, Ростовская область, пос. Персиановский.