Scientific journal
Modern problems of science and education
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,940

DEVELOPMENT OF METHODIC OF QUANTITATIVE DETERMINATION OF DIHYDROQUERCETIN AND ASCORBIC ACID IN ORODISPERSIBLE TABLETS "VITADIKVER"

Kovalevskaya E.G. 1
1 "Gloriya-farm"
The methods of quantitative determination of active substance in orodispersible tablets were developed, which contained Dihydroquercetin and ascorbic acid. For determination of dihydroquercetin used method HPLC. It is established that other existing and accessories not give peaks in the chromatogram that coincides migration with a peak of dihydroquercetin. This result allowed to develop sufficiently accurate and adequate method of quantitative determining. Ascorbic acid was determined in tablets idatastream method, recommended by the State Pharmacopoeia of the Russian Federation 12 edition. In the definitions established that related components not interfere with the determination of ascorbic acid by the specified method. Method-specific, has sufficient accuracy and can be used for objective control of the content of ascorbic acid in developed tablets.
orodispersible tablets
methods of analysis dihydroquercetin and ascorbic acid

В настоящее время составы, содержащие дигидрокверцетин (ДГК), представлены в основном БАД в форме традиционных таблеток и капсул. Нами разработаны состав и технология ородисперсных таблеток комплексного состава, условно названных        «Витадиквер», включающих комбинацию ДГК и аскорбиновой кислоты [2]. Ородисперсные таблетки как лекарственная форма позволяют повысить биологической доступность целевых компонентов, а также комфортность приема за счет улучшенных органолептических свойств  и отсутствия необходимости запивания водой [5].

Целью работы явилось разработка методов количественного определения указанных компонентов в лекарственной форме.

Материалы и методы. Для количественного определения дигидрокверцетина в таблетках «Витадиквер», за основу была взята методика определения дигидрокверцетина в препарате «Диквертин, таблетки 20 мг» (ФСП 42-00830186-06) [3],  модифицированная нами в связи с использованием другого аналитического оборудования [4].Содержание ДГК определяли методом ВЭЖХ на жидкостном хроматографе «Стайер», фирмы Аквилон при следующих параметрах: колонка Luna С 18,5 мкм размером 150×4,60 мм, длина волны 290 нм, объем вводимой пробы 20 мкл. Образец ГСО дигидрокверцетина (ВФС 42-2399-94) был предоставлен ООО «Биотехнология-07», г. Нальчик.

Пробоподготовка: около 0,37 г порошка растертых таблеток (точная навеска) помещали в коническую колбу вместимостью 25 мл, прибавляли 8 мл ацетонитрила, интенсивно встряхивали в течение 5-7 мин и центрифугировали при 8000 об/мин в течение 5 мин.

0,05 мл надосадочной жидкости переносили в коническую колбу вместимостью 15 мл, прибавляли 4,95 мл смеси ацетонитрил — 2,0 % муравьиная кислота (35:65 об. %), перемешивали, центрифугировали при 8000 об/мин в течение 5 мин и использовали для ввода в хроматограф.

Далее 0,02 мл полученного раствора вводили в жидкостной хроматограф с градиентным насосом и хроматографировали в следующих условиях:

Колонка                                   150 мм х 4,6 мм

Сорбент                                   Luna C-18, 5 мкм

Детектор                                  УФ

Аналитическая длина волны 290 нм

Подвижная фаза: А – ацетонитрил, Б – кислота муравьиная 2,0%

Условия градиента:

Время, мин

А, об %

Б, об %

0

35

65

0 – 4,0

35

65

4,0 – 10,0

70

30

Скорость потока подвижной фазы

1 мл/мин.

Продолжительность пропускания подвижной фазы

10

Температура колонки

20 0С

В этих же условиях параллельно проводят хроматографирование раствора ГСО дигидрокверцетина. Объём вводимой пробы 0,02 мл.

Для количественного определения аскорбиновой кислоты в таблетках «Витадиквер» использовали йодатометрический метод, рекомендованный Государственной фармакопеей РФ XII изд.(ОФС 42-0114-09) [1].

Результаты и их обсуждение. Хроматограммы раствора ГСО дигидрокверцетина и извлечения из таблеток «Витадиквер» приведены на рис. 1 и 2.

 

Рис. 1.  Хроматограмма раствора ГСО дигидрокверцетина

 

Рис. 2. Хроматограмма извлечения из таблеток Витадиквер

В этих же условиях для установления влияния сопутствующих и вспомогательных компонентов лекарственной формы проводили определение извлечения из таблеток аналогичного состава, не содержащих дигидрокверцетин. Результаты приведены на рисунке 3.

Рис. 3. Хроматограмма извлечения из таблеток, не содержащих дигидрокверцетин

Из полученных данных следует, что на хроматограмме извлечения из таблеток, аналогичных по составу таблеткам «Витадиквер», но не содержащих дигидрокверцетин, отсутствуют пики, совпадающие по времени миграции с пиком дигидрокверцетина. Данный факт свидетельствует об отсутствии влияния сопутствующих и вспомогательных компонентов лекарственной формы на количественное определение дигидрокверцетина в таблетках «Витадиквер».

Для расчета содержания дигидрокверцетина в таблетках «Витадиквер» измеряли площади пиков дигидрокверцетина на хроматограммах испытуемого раствора таблеток Витадиквер и ГСО дигидрокверцетина.

Содержание дигидрокверцетина, считая на среднюю массу одной таблетки, в граммах (X) вычисляли по формуле:

S – площадь пика дигидрокверцетина на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 – площадь пика на хроматограмме ГСО дигидрокверцетина;

a – навеска препарата в граммах;

а0 – навеска ГСО дигидрокверцетина в граммах;

Рср – средняя масса таблетки в граммах.

Согласно рецептуре, содержание дигидрокверцетина в таблетке, считая на среднюю массу таблетки, должно быть от 0,0185 г до 0,0215 г.

Результаты определения содержания дигидрокверцетина в пяти сериях таблеток Витадиквер приведены в таблице 1.

Таблица 1

Результаты определения содержания дигидрокверцетина в пяти сериях таблеток Витадиквер

№ серии

Средняя масса таблеток, г

Содержание дигидрокверцетина (г), считая на среднюю массу таблетки*, ±SD

1

0,361

0,0189± 0,00037

2

0,378

0,0201± 0,00040

3

0,388

0,0210±0,00042

4

0,390

0,0198±0,00039

5

0,363

0,0193±0,00038

* Примечание: Среднее значение из двух инжекций

Для определения кислоты аскорбиновой в таблетках «Витадиквер» были составлены 9 модельных смесей с отклонениями в ее содержании от заданного по рецептуре значения ±20%. Результаты определения представлены в таблице 2.

Таблица 2

Результаты определения кислоты аскорбиновой в модельных смесях таблеток «Витадиквер»

п/п

Кислота аскорбиновая

Взято, г

Найдено, г

Найдено, %

1

0,0404

0,0397

98,27

2

0,0393

0,0395

100,51

3

0,0415

0,0407

98,07

4

0,0518

0,0509

98,26

5

0,0497

0,0501

100,80

6

0,0509

0,0507

99,61

7

0,0617

0,0612

99,19

8

0,0625

0,0615

98,40

9

0,0607

0,0611

100,66

Валидационные характеристики методики

Линейность

r = 0,9982

Прецизионность

SD = 1,30

RSD(%) = 1,31

Правильность

tвыч. = 1,60 <tP,f = 2,36

Точность

R(%) = 98,07 – 100,80

В результате определений установлено, что сопутствующие компоненты не мешают определению аскорбиновой кислоты указанным методом. Методика специфична, обладает достаточной точностью и может быть использована для объективного контроля содержания аскорбиновой кислоты в разработанных таблетках.

Выводы:

  1. Разработаны методики определения количественного содержания дигидрокверцетина и кислоты аскорбиновой в ородисперсных таблетках «Витадиквер».
  2. Установлено, что сопутствующие компоненты не мешают определению действующих веществ при совместном присутствии, разработанные методики отвечают всем требованиям валидации.

Рецензенты:

Степанова Э.Ф., д.фарм.н., профессор кафедры технологии лекарств Пятигорского медико-фармацевтического института – филиала государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Волгоградский государственный медицинский университет», г. Пятигорск.

Лазарян Д.С.,  д.фарм.н., заведующий кафедрой фармацевтической химии Пятигорского медико-фармацевтического института – филиала государственного бюджетного образовательного учреждения высшего профессионального образования «Волгоградский государственный медицинский университет», г. Пятигорск.