Введение
Бабезиоз (пироплазмоз) - кровепаразитарная природно-очаговая трансмиссивная болезнь животных, вызываемая эндоглобулярными паразитами семейства Babesiidae рода Babesia и Piroplasma (вид Babesia bovis, B. divergens, B. ovis, P. bigeminum и др.), наносящая значительный экономический ущерб животноводству [1]. Развитие патологического процесса в организме животных связано с массовым распадом эритроцитов вследствие размножения в них паразитов и накопления продуктов их жизнедеятельности. Заболевание протекает в острой форме после 12-14-дневного инкубационного периода, возможно хроническое течение и паразитоносительство.
На территории Российской Федерации пироплазмидозы распространены повсеместно - от Крайнего Севера, вызывая заболевания северных оленей, до южных регионов, где пироплазмидозами поражаются многие виды домашних и диких животных [2, 6, 7].
Для лечения бабезиоза животным применяют антипротозойные препараты на основе имидокарба и диминазена [5].
Цель данной работы - оценка противопротозойного действия препарата Пиро-Стоп при бабезиозной инвазии северных оленей.
Материалы и методы исследования
Опыты проводили в ООО ГСХП «Гыдаагро» Тазовского района Ямало-Ненецкого автономного округа Тюменской области в летне-осенний период. Для изучения активности препарата при бабезиозе северных оленей были отобраны две опытные и одна контрольные группы животных. Опытная группа 1 составила 8, опытная группа 2-8 животных, пораженных Babesia divergens (B. divergens) с различной степенью паразитемии, контрольная группа 3-10 животных, не инвазированных паразитами. Наличие возбудителей в крови животных устанавливали методом микроскопии мазков крови [3], для чего была взята цельная кровь у животных разных возрастных групп случайной выборки в количестве 10 % от обследованного поголовья. От одного животного брали кровь из яремной вены в стерильные пробирки с антикоагулянтом и консервантом. Для консервации крови использовали раствор кислой цитрат декстрозы в объеме 1 мл на 6 мл крови. Кровь с консервантом до исследования хранили при температуре +2...+6 °С. В полевых условиях готовили тонкие мазки крови на предметных стеклах, высушивали их на воздухе, затем фиксировали в смеси этанол:эфир и окрашивали по Романовскому - Гимза. Микроскопию мазков крови проводили с иммерсией при увеличении 100×10, уровень паразитемии вычисляли в процентах. Подсчет уровня паразитемии в мазках крови проводили в исходный день, 3-ие, 7-ые сутки после внутримышечного введения препаратов и затем через 2,5 месяца.
Кровь с консервантом доставляли в лабораторию, где исследовали на гематологические показатели. Анализ показателей крови проводили в исходный день, 7-ые сутки после введения препаратов и по истечении 2,5 месяцев. Полученные результаты статистически обрабатывали общепринятыми методами [4].
В опыте мы применили Пиро-Стоп против возбудителя бабезиоза северных оленей в сочетании с гамавитом как неспецифическим средством, обладающим антитоксическим действием и способствующим профилактике паразитарных болезней. Оленям опытной 1 группы однократно внутримышечно вводили Пиро-Стоп в дозе по д.в. 2,4 мг/кг массы тела животного (2 мл на 100 кг массы животного) и одновременно применили однократно подкожно гамавит в дозе 7 мл на животное.
Пиро-Стоп (Piro-Stop) - антипротозойный лекарственный препарат из группы имидазолина, в качестве действующего вещества в 1 мл содержит имидокарба дипропионат - 120 мг, а также вспомогательные компоненты. Имидокарба дипропионат, входящий в состав препарата, активен в отношении Babesia bovis, B. ovis, B. bigemina, B. colchica, B. equi, B. divergens, B. canis, B. caballi, B. gibsoni, F. colchica, T. annulata, T. sergenti, T. mutans, T. orientalis, T. ovis, T. recondita, T. tarandirangiferis, N. equi, A. marginale, A. ovis, а также Ehrlichia canis. Механизм антипротозойного действия имидокарба связан с подавлением поступления инозитола, необходимого для жизнедеятельности кровепаразита, а также с нарушением образования и использования паразитами полиаминов.
Гамавит (Gamavit) - лекарственное средство, предназначенное для повышения естественной резистентности, иммунокоррекции и снижения последствий интоксикаций у животных и птиц.
Результаты исследования и их обсуждение
Опыт направлен на изучение действия противопротозойного препарата Пиро-Стоп при инвазировании северных оленей B. divergens возбудителем бабезиоза.
При клиническом осмотре животных опытных и контрольной групп признаков острой формы кровепаразитарной инвазии (а именно - вялости, повышенной температуры тела, гемоглобинурии, желтушности слизистых оболочек) отмечено не было. По результатам микроскопии мазков выявлена пораженность оленей B. divergens, что говорит о паразитоносительстве.
О терапевтической эффективности Пиро-Стоп в сочетании с гамавитом судили по уровню паразитемии, выраженному в процентах пораженных кровепаразитами эритроцитов животных (табл. 1).
Как видно из таблицы 1, в опытной группе 1 на 3-е сутки отмечено снижение паразитемии на 50 %, а в опытной группе 2 паразитемия сохранилась на начальном уровне. В опытной группе 1 на 7-е сутки после применения препаратов получили достоверное снижение уровня паразитемии по сравнению со 2-ой опытной группой, в контроле животные оставались не инвазированными. При исследовании проб крови от оленей данного опыта через 2,5 месяца в 1-ой опытной группе обнаружили двух животных с незначительной паразитемией, во второй - 6 оленей были инвазированы, в контрольной группе трое животных инвазировались B. divergens в течение опытного периода. Уровень паразитемии в опытной 1 группе снизился с 0,808 до 0,01 %.
Таблица 1. Уровень паразитемии B. divergens в эритроцитах северных оленей при введении препарата Пиро-Стоп и гамавита
|
Группа |
Кол-во живых |
Исходный уровень |
Уровень паразитемии, % |
||
|
3-ие сут. |
7-ые сут. |
2,5 мес. |
|||
|
опытная 1 |
8 |
0,808±0,24 |
0,404±0,16 |
0,22×±0,07 |
0,01*×±0,01 |
|
опытная 2 |
8 |
1,034±0,26 |
1,053±0,27 |
1,232±0,18 |
0,565±0,19 |
|
контрольная 3 |
10 |
- |
- |
- |
0,419±0,23 |
Примечание: * - отличия достоверны по сравнению с 3 и 7 сутками опыта, × - отличия достоверны по сравнению с группой 2 (p<0,05).
Отрицательного влияния совместного применения Пиро-Стоп и гамавита на северных оленей по результатам двухнедельного наблюдения и анализа крови не обнаружено (табл. 2).
Заключение
На основании проведенного исследования установлено, что при применении препарата Пиро-Стоп для терапии бабезиоза оленей в дозе 2 мл на 100 кг массы животного в сочетании с гамавитом отмечен достоверный положительный терапевтический эффект, выразившийся в уменьшении числа пораженных бабезиозом животных и снижении уровня паразитемии с 0,808 до 0,01 %.
Таблица 2. Гематологические показатели крови, общих иммуноглобулинов и общего белка северных оленей при применении Пиро-Стоп и гамавита
|
Период исследования |
1-ые сутки (исходный уровень) |
7-ые сутки |
2,5 месяца |
||||||
|
Группы Показатель |
1 (n=8) |
2 (n=8) |
3 (n=10) |
1 (n=8) |
2 (n=8) |
3 (n=10) |
1 (n=8) |
2 (n=8) |
3 (n=10) |
|
Гематокрит, % (N 40,0 - 50,0) |
43,04±1,3 |
41,78±1,2 |
40,47±1,1 |
51,72±1,1 |
49,31±1,5 |
47,89±1,7 |
42,13±11,8 |
43,52±1,1 |
41,64±1,2 |
|
Эритроциты, ×1012/л (N 9,0 - 14,0) |
9,395±0,3 |
9,466±0,4 |
9,239±0,3 |
10,73±0,4 |
10,4±0,4 |
10,13±0,4 |
8,73±2,5 |
9,03±0,3 |
8,85±0,4 |
|
Гемоглобин, г/л (N 135 - 155) |
113,1±3,5 |
99,47±13,1 |
111,3±3,3 |
180,4±3,3 |
166,1±5,2 |
159,7±5,8 |
158,6±13,2 |
150,3±6,2 |
148,7±5,6 |
|
Тромбоциты, ×109/л (N 200-500) |
302±26,0 |
305,7±8,1 |
278,8±10,5 |
397,6±19,2 |
375,6±11,4 |
384,1±37,6 |
634±88,4 |
324,3±13,2 |
367,2±16,8 |
|
Лейкоциты, ×109/л (N 6,0-10,0) |
9,087±1,3 |
10,19±0,7 |
11,09±2,0 |
5,655±0,5 |
6,38±0,3 |
6,651±0,6 |
7,523±0,8 |
8,4±0,4 |
8,1±0,8 |
|
Базофилы, % (N 1,0 - 5,0) |
0,5±0,2 |
1,5±0,8 |
1,5±0,4 |
1±0,3 |
0,75±0,4 |
2±0,6 |
0,1429±0,1 |
0,75±0,3 |
0,125±0,1 |
|
Эозинофилы, % (N 0 - 10,0) |
9,25±1,8 |
7,875±1,7 |
12±2,0 |
14±2,5 |
12,12±1,7 |
10,6±1,3 |
22,57±2,6 |
22,38±4,4 |
20,75±4,4 |
|
Нейтрофилы, % (N 35,0 - 55,0) |
53,25±2,7 |
61,12±3,3 |
54,7±4,3 |
46,62±4,2 |
44,62±2,9 |
50,3±2,7 |
41,57±3,9 |
44,25±5,0 |
38,88±5,1 |
|
Лимфоциты, % (N 30,0 - 50,0) |
35,25±3,3 |
27,25±1,5 |
29,9±2,8 |
37,5±3,0 |
41,75±3,2 |
36,9±2,2 |
35,43±4,0 |
32,5±3,7 |
40,25±4,8 |
|
Моноциты, % (N 1,0 - 5,0) |
1,875±0,4 |
1,875±0,5 |
1,9±0,6 |
1±0,5 |
0,75±0,3 |
0,2±0,1 |
0,2857±0,3 |
0,25±0,2 |
0 |
|
Общий белок, г/л |
69,25±1,8 |
65,79±1,7 |
56,02±6,3 |
75,15±0,8 |
73,2±1,8 |
71,73±1,7 |
82,64±5,2 |
83,87±1,6 |
80,99±2,6 |
|
Иммуноглобулины, общ. |
13,72±1,1 |
13,96±1,4 |
13,69±1,0 |
12,71±0,9 |
12,44±0,6 |
14,58±1,1 |
15,82±1,2 |
18,39±1,1 |
15,87±1,3 |
Рецензенты:
Домацкий В.Н., д.б.н., зам. директора ГНУ Всероссийский научно-исследовательский институт ветеринарной энтомологии и арахнологии Россельхозакадемии, г. Тюмень.
Королев Б.А., д.в.н., профессор кафедры незаразных болезней животных Института биотехнологии и ветеринарной медицины ФГБОУ ВПО «Государственный аграрный университет Северного Зауралья», г. Тюмень.