Процесс апоптоза и регуляторные механизмы передачи сигналов апоптоза как потенциальный патогенетический фактор сердечно-сосудистых заболеваний уже много лет привлекают внимание кардиологов [1–3].

К настоящему времени доказано, что апоптоз учувствует в гибели миокардиальных клеток и в процессах ремоделирования миокарда. Доказано, что изучение уровня маркеров апоптоза имеет прогностическое и клиническое значение у пациентов с инфарктом миокарда (ИМ), различными формами кардиомиопатий и у пациентов с острой и хронической сердечной недостаточностью (ХСН) [4–6].

При этом большинство исследований посвящены поиску возможности ингибирования апоптотической клеточной смерти и поиску чувствительного апоптотического маркера, обладающего потенциальной пользой в клинической практике. Широко изучаемыми маркерами апоптоза в настоящее время являются: аннексин A5 (или аннексин V) и Bcl-2 (B-cell lymphoma 2) [7, 8].

Аннексин А5 – белок из семейства аннексинов. Благодаря способности связываться с фосфолипидами используется как маркер для обнаружения апоптотических клеток, поскольку фосфатидилсерин (фосфолипид), который обычно локализуется во внутренних листках цитоплазматических мембран, экспрессируется на поверхности клеток во время апоптоза клетки. В настоящее время биологическая функция аннексина А5 до конца не установлена [9].

Все члены семьи Bcl-2 являются важными регуляторами митохондриального пути апоптоза. Белки Bcl-2 состоят из анти- и проапоптотических членов и играют ключевую роль в регуляции апоптоза в миокарде. Bcl-2 является антиапоптотическим белком [10].

К настоящему времени представлены исследования, которые демонстрируют диагностическое и прогностическое значение изменения уровня аннексина А5 и Bcl-2 у пациентов с артериальной гипертензией (АГ), ИМ, дилятационной кардиомиопатией, ХСН [11, 12]. Исследования, посвященные изучению уровня данных маркеров апоптоза у пациентов с ишемической кардиомиопатией (ИКМП), не представлены.

Цель исследования: проанализировать в сравнительном аспекте уровень маркеров апоптоза – аннексина А5 и Bcl-2 – у пациентов с ИКМП и перенесенным в прошлом ИМ, осложненными хронической сердечной недостаточностью (ХСН).

Материалы и методы исследования. Основную группу обследуемых составили 90 пациентов с хронической ишемической болезнью сердца, которые были разделены на две группы: 43 пациента с перенесенным в прошлом ИМ и 47 пациентов с ИКМП. Характеристика обследуемых пациентов представлена в таблице 1.

Таблица 1

Характеристика обследуемых групп пациентов

р1 – значение уровня статистической значимости различий с группой пациентов с перенесенным в прошлом ИМ, *c2c попр. Йетса

Диагнозы перенесенных в прошлом ИМ, ИКМП, ХСН верифицировались согласно современным клиническим рекомендациям и соответствуют шифрам, представленным в МКБ-10. Критериями включения в исследования служили: подтвержденный документально Q-образующий ИМ в анамнезе давностью более 6 месяцев, возраст пациентов не старше 65 лет. Критериями исключения служили: ИМ в анамнезе, который явился осложнением чрескожного коронарного вмешательства или коронарного шунтирования, наличие хронического заболевания в стадии обострения, злокачественные заболевания. Проведение исследования было одобрено локальным Этическим комитетом (от 17.09.2016 г.).

В качестве группы контроля были обследованы соматически здоровые добровольцы (n=30), сопоставимые по полу и возрасту обследуемым пациентам.

С помощью метода иммуферментного анализа в плазме крови определялся уровень анализируемых маркеров апоптоза по методикам, рекомендованным производителями реактивов Bcl-2 и аннексина А5 с помощью тест-систем фирмы «BenderMedSystems», Австрия.

Для проведения статистического анализа применялась программа STATISTICA версия 11.0. Значение полученных данных представлено в виде медианы (Мe) и процентилей [5;95]. Проверка статистических гипотез проводилась с использованием U-критерий Манна–Уитни. Оценка корреляционных связей проводилась с применением коэффициента корреляции Спирмена (r). Для проведения частотного анализа использовали критерий c2 Пирсона. Уровень статистической значимости (р, Mann–Whitney test) составил менее 0,05.

Результаты исследования и их обсуждение. Было установлено, что значение уровня аннексина А5 было статистически значимо выше (р<0,001), чем у лиц контрольной группы, как в группе пациентов с перенесенным в прошлом ИМ, так и в группе пациентов с ИКМП (рис. 1).

Рис. 1. Значение уровня аннексина А5 у обследуемых

В группе пациентов с ИКМП значение уровня аннексина А5 было статистически значимо выше (р=0,001), чем в группе пациентов с перенесенным в прошлом ИМ. Медиана уровня аннексина А5 у пациентов с перенесенным в прошлом ИМ была в 2,4 раза выше, чем в группе контроля, а у пациентов с ИКМП в 4 раза превышала значения медианы в группе контроля.

Значение уровня Bcl-2 было статистически значимо ниже (р<0,001) в группе пациентов с перенесенным в прошлом ИМ и в группе пациентов с ИКМП по сравнению с группой контроля (рис. 2).

Рис. 2. Значение уровня Bcl-2 у обследуемых

В группе пациентов с ИКМП значение уровня Bcl-2 было статистически значимо ниже (р<0,001), чем у пациентов с перенесенным в прошлом ИМ. Медиана уровня Bcl-2 у пациентов с перенесенным в прошлом ИМ была в 1,5 раза ниже, чем в группе контроля, а у пациентов с ИКМ – в 2,7 раза ниже значения медианы в группе контроля.

Так как симптомы ХСН являются одними из основных клинических проявлений при ХИБС, особый интерес вызывает выявление взаимосвязи выраженности ХСН и уровня маркеров апоптоза. По результатам анализа изменения значения уровня аннексина А5 и Bcl-2 в зависимости от функционального класса ХСН было установлено, что как у пациентов с перенесенным в прошлом ИМ, так и у пациентов с ИКМП уровень аннексина А5 был статистически значимо выше, а уровень Bcl-2 статистически значимо ниже у всех обследуемых пациентов со II, III, IV функциональным классом ХСН по сравнению с группой контроля. При этом, как видно из данных, представленных в таблице 2, среди пациентов с перенесенными в прошлом ИМ и ИКМП уровень аннексина А5 был статистически значимо выше, а уровень Bcl-2 статистически значимо ниже у пациентов с более высоким функциональным классом ХСН (табл. 2).

Таблица 2

Уровень аннексина А5 и Bcl-2в исследуемых группах пациентов в зависимости от функционального класса ХСН

При этом уровень аннексина А5 в группе пациентов с ИКМП со II, III, IV функциональным классом ХСН был статистически значимо выше, а уровень Bcl-2 – статистически значимо ниже по сравнению с группой пациентов с перенесенным в прошлом ИМ с соответствующим функциональным классом ХСН.

Также мы предприняли попытку оценить при помощи корреляционного анализа наличие взаимосвязей между уровнем изучаемых маркеров апоптоза и некоторыми клинико-функциональными показателями в исследуемых группах пациентов с перенесенными в прошлом ИМ и ИКМП. Как видно из данных, представленных в таблице 3, статистически значимые положительные корреляционные связи очень слабой силы были выявлены между уровнем аннексина А5 и длительностью АГ. Взаимосвязи между уровнем аннексина А5 и длительностью ИБС, функциональным классом стенокардиии ХСН, результатами теста 6-минутный ходьбы, значением ШОКС, а также наличием постоянной формы ФП были статистически значимы, положительные, средней силы.

Таблица 3

Корреляционные связи между уровнем аннексина А5 и клинико-анамнестическими данными у пациентов с перенесенными в прошлом ИМ и ИКМП

По результатам корреляционного анализа между уровнем Bcl-2 и длительностью АГ корреляционные связи были статистически не значимы. Между уровнем Bcl-2 и длительностью ИБС, функциональным классом стенокардии и ХСН, результатами теста 6-минутный ходьбы, значением ШОКС, а также наличием постоянной формы ФП выявленные взаимосвязи были статистически значимы, отрицательные, средней силы (табл. 4).

Таблица 4

Корреляционные связи между уровнем Bcl-2 и клинико-анамнестическими данными у пациентов с перенесенными в прошлом ИМ и ИКМП

Заключение. У пациентов как с перенесенным в прошлом ИМ, так и с ИКМП значение уровня аннексина А5 и Bcl-2 статистически значимо отличается от значений группы контроля. При этом у пациентов с ИКМП изменение уровня изучаемых маркеров более выражено, чем у пациентов с перенесенным в прошлом ИМ. Выраженность изменений уровня аннексина А5 и Bcl-2 у пациентов с ХСН различных функциональных классов при ИКМП была больше по сравнению с пациентами с ХСН соответствующих функциональных классов при перенесенном в прошлом ИМ. Также было выявлено наличие взаимосвязей разной силы между рядом клинико-анамнестических данных и уровнем изучаемых маркеров у всех обследуемых пациентов.

Полученные результаты исследования свидетельствуют о диагностической и прогностической значимости определения уровня аннексина А5 и Bcl-2 у пациентов с перенесенными в прошлом ИМ и ИКМП.