Скорость роста являются одним из важнейших экономических показателей, влияющим на выход мяса, формирование конституции, экстерьера и интерьера у сельскохозяйственных животных и используется в качестве селекционного признака [1-6,15,16,21,22]. Выявлены генетические полиморфные системы, ассоциированные с признаками продуктивности и устойчивости к болезням [14,18,32]. Установлено, что многие SNPs связаны с уровнем молочной и мясной продуктивности, скоростью роста молодняка, массой туш, качеством продукции, фертильностью и резистентностью к различным заболеваниям [7-11,23,24,27-30,35-37].

Китайскими исследователями у Luxi породы скота установлено, что SNP гена лептина влияет на индексы длины и ширины туловища, массы и высоты тела, а также связан с содержанием жировой ткани в сердце, печени, почках, селезенке, легких и мышцах [36].

Так же известно, что гены фактора роста Septin-7 (СВС10) и Atrogin-1 влияют на развитие мышечной массы и признаки роста коров [34,35]. В частности, установлено, что SNP гена Septin-7 влияет на динамику роста у животных трех японских пород скота и серой швейцарской породы [34]. Длина туловища двухгодовалых особей породы Nanyang связана с 4 SNPs гена Atrogin-1 [30]. Имеется корреляция SNPs генов бычьего инсулиноподобного фактора роста (IGF-I) и миогенного фактора (MYF5) c показателями роста [24]. В частности, установлено, что коровы с генотипом АВ имели большую массу тела в возрасте 3 месяца, чем животные, с гомозиготным генотипом ВВ. При этом SNP гена MYF5 оказывает влияние на массу животных в возрасте 12 мес. и величину среднесуточного прироста.

Материал и методы исследований

Для исследований были взяты пробы венозной крови лактирующих коров черно-пестрой породы в возрасте 1-5 лактаций, разводимых в хозяйстве СПК «Кирзинский». Эти животные исследованы по SNPs TNF-α -824A/G и TNFR1 -1703C/T. Средний уровень молочной продуктивности коров в хозяйстве равен 6100 кг. Были проанализированы показатели живой массы в различные периоды онтогенеза у 100 телят, полученных от генотипированных коров.

Изучение однонуклеотидного полиморфизма проводилось в лаборатории Института цитологии и генетики СО РАН совместно с Н.С. Юдиным. ДНК из венозной крови выделяли стандартным методом фенольно-протеолитической экстракции. Фрагмент гена TNF-α крупного рогатого скота исследовали с применением метода ПЦР-ПДРФ с использованием прямого праймера 5'-CCGAGAAATGGGACAACCT-3' и обратного праймера 5'-GCCATGTATCCCCAAAGAAT-3'. ПЦР проводили на амплификаторе «Терцик» (ДНК-технологии, Россия), в течение 35 циклов при температуре отжига 60оC. Реакция проходила в ПЦР SE буфере G. Продукт ПЦР оценивали вертикальным электрофорезом в 4% ПААГ, окрашенном бромистым этидием. Далее в продукт амплификации была внесена эндонуклеазу рестрикции EcoICRi (СибЭнзим, Россия), а затем оценивали в 4% ПААГ, окрашенном бромистым этидием. Определение однонуклеотидного полиморфизма TNFR1 -1703C/T проводилось методом постановки аллель-специфической ПЦР в SE буфере G с использованием праймеров 5’-1872-GGCTGCCAGATCGTGCCTGC-3’-общий, по нижней цепи 5’-1686-TCCGAGCCCCGCCTTCTGT-3’- для дикого типа, по верхней цепи и 5’-1686-TCCGAGCCCCGCCTTCTAC-3’- для мутантного типа.  Аллель-специфическую ПЦР проводили в течение 35 циклов при температуре отжига 60оС. Продукт ПЦР оценивали вертикальным электрофорезом в 4% ПААГ, окрашенном бромистым этидием. Для статистической обработки  использовался табличный редактор Gnumeric 1.10.16.

Результаты исследования и обсуждение

Представленная работа является частью комплексных исследований генофонда и фенофонда животных [3,4,14,17-19] в различных экологических условиях среды [13,22,23,28]. В таблице 1 и таблице 2 представлены результаты анализа массы тела телят в возрасте 18 мес., полученных от коров с различными генотипами по SNPs TNF-α -824A/G и TNFR1 -1703C/T.

 Таблица 1

Масса телят в 18 мес. в зависимости от генотипа матерей по SNP TNF-α -824A/G

Показатель		Генотип			Среднее по популяции
		А/А	A/G	G\G
TNF-α -824 G/G	n	28	51	21	100
	X±	424,68±9,27	424,71±5,7	399,05±8,68	419,31±4,38

 Таблица 2

Масса телят в 18 мес. в зависимости от генотипа матерей по SNP TNFR1 -1703C/T

Показатель		Генотип			Среднее по популяции
		С/С	С/Т	Т/Т
TNFR1 -1703C/T	n	51 (С/С)	42 (С/Т)	7 (Т/Т)	100
	X±	424,51±6,52	412,71±6,44	421,0±13,12	419,31±4,38

  Установлены достоверные различия по живой массе молодняка в 18 мес. в зависимости от генотипов матерей по SNP TNF-α -824A/G. Телята, полученные от гомозиготных (А/А) и гетерозиготных (A/G) коров имели живую массу на 10,9 % выше, чем молодняк от гомозигот (G/G) (Р<0,05). При этом исследованный молодняк не имел различий по показателям энергии роста. Не выявлено различий по живой массе телят в 18-ти месячном возрасте в зависимости от генотипов их матерей по SNP TNFR1 -1703C/T.

Известно, что у крупного рогатого скота SNP гена TNF-α -824A/G влияет на ряд важных биологических процессов, в частности, кодирует синтез внеклеточного цитокина [27,37], образование желтого тела, апоптоз клеток, участвует в контроле развития молочной железы, а также связан с прогрессированием ВЛКРС-индуцированной лимфомы и ретровирусных инфекций [28,29].

Ранее нами сообщалось о связи SNP TNF-α -824A/G с показателями молочной продуктивности коров черно-пестрой и красной степной пород [8,9,30] и с некоторыми показателями гематологического и биохимического статуса крови лактирующих коров [9,30]. В то же время показано отсутствие ассоциации однонуклеотидного полиморфизма гена TNFR1 в положении -1703C/T на показатели молочной продуктивности черно-пестрого скота [10]. В селекции скота все больше используются молекулярно-генетические, биохимические, химические и другие показатели для оценки интерьера и отбора животных в различные периоды онтогенеза по хозяйственно-полезным признакам [2,11,12,19,20,25,26,33].

Таким образом, в изученном стаде SNP TNF-α -824A/G связан со скоростью роста молодняка и некоторыми показателями молочной продуктивности, что в комплексе позволяет использовать его в качестве маркера при отборе ремонтных телок и племенного молодняка.  В дальнейшем селекционную стратегию необходимо корректировать с уточнением уровня продуктивности и условий среды. У животных других пород использование однонуклеотидного полиморфизма TNF-α -824A/G в качестве молекулярно- генетического маркера возможно только после предварительного тестирования популяции животных.

Выводы

Масса телят, полученных от гомозиготных А/А и гетерозигот A/G по SNP TNF-α -824A/G коров, была в среднем на 10,9% больше массы тела телят, матери которых имели  генотип G/G (Р<0,05). В исследованной популяции гомозиготность генотипа G/G может быть использована в качестве генетического маркера, связанного со снижением живой массы телят  черно-пестрой породы в возрасте 18-и месяцев.

Рецензенты:

Дементьев В.Н., д.с.-х.н., профессор, Новосибирский государственный аграрный университет, г. Новосибирск;

Рыков А.И., д.с.-х.н., ФГБНУ Сибирский научно-исследовательский и проектно-технологический институт животноводства “СибНИПТиЖ”, п. Краснообск-1.