Актуальность использования целебных свойств растений при разработке новых лекарственных препаратов постоянно возрастает. Для России, которая отличается богатством и разнообразием флоры, это направление в фармацевтической науке особенно перспективно.

Объектом нашего изучения служит хорошо известное и распространенное лекарственное растение-крапива двудомная, листья которой содержат богатый комплекс липофильных и водорастворимых соединений[6].

Конечной целью наших исследований является разработка состава и технологии геля на основе двух фитокомплексов из листьев крапивы двудомной. Максимально очищенный хлорофилл представляет липофильную фазу растения, а сок из свежесобранных листьев крапивы- комплекс водорастворимых веществ[2].

В процессе реализации поставленной цели первостепенная задача исследований состояла в определении оптимальной концентрации указанных фитокомплексов крапивы двудомной в составе геля.

Учитывая результаты предварительного изучения антимикробной активности растения, нами был использован в ходе эксперимента микробиологический метод.

Степень высвобождения фитокомплексов листьев крапивы исследовали способом « колодцев», основанным на оценке угнетения роста тест-культур путем измерения диаметра зон задержки роста микроорганизмов вокруг «колодцев», включая их диаметр. Тест -культурами служили Staphylococcus aureus (209) и Bacillus subtilis-42.

Были приготовлены 2 серии гелей, отличающихся концентрацией максимально очищенного хлорофилла и сока крапивы. В качестве модельной основы для них выбрана композиция следующего состава: ПЭО-400-50,0; ПЭО-1500-20,0; воды очищенной до 100,0.

На поверхность агара в чашках Петри наносили посев сплошным газоном стандартных взвесей используемых тест-культур. Стерильным сверлом диаметром 6 мм делали лунки на одинаковом расстоянии друг от друга, в которые помещали образцы гелей массой 0,5 г. Все чашки Петри оставляли в термостате (37⁰С) на 18-20 часов строго горизонтально для получения круглых зон угнетения роста микрофлоры[1].

Результаты исследований представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Результаты изучения влияния концентрации максимально - очищенного хлорофилла крапивы на антимикробную активность

Концентрация максимально очищенного хлорофилла крапивы, %	Диаметр зон задержки роста тест-культур, мм
	Staphylococcus aureus(209)	Bacillus subtilis-42
1	13	18
2	17	23
3	17	23
4	17	23
5	17	23

Таблица 2

Результаты изучения влияния концентрации сока крапивы на антимикробную активность

Концентрация сока крапивы, %	Диаметр зон задержки роста тест-культур, мм
	Staphylococcus aureus(209)	Bacillus subtilis-42
1	7	10
2	7	10
3	7	11
4	8	11
5	9	12
6	10	13
7	10	13
8	11	15
9	12	17
10	14	20
11	14	20
12	14	20

Из полученных данных можно заключить, что оптимальная концентрация максимально очищенного хлорофилла в составе геля составляет 2 %, а сока крапивы -10%.

При проведении последующих технологических исследований образцы гелей должны содержать фитокомплексы крапивы двудомной в концентрациях, установленных микробиологическим методом[3,5].

Для подтверждения полученных результатов нами были проведены биофармацевтические исследования [4]. Биофармацевтическую оценку гелей по степени высвобождения максимально очищенного хлорофилла проводили по методике, в которой в качестве модельной среды, характеризующей липофильно-гидрофильный баланс структур организма, применяли систему, состоящую из равных частей эмульсий прямого и обратного типа. Эмульсия №1 имела следующий состав: вазелина- 87 частей, эмульгаторы Т2-3 части, воды очищенной- 10 частей. Эмульсия №2 состояла из 85 частей вазелина, 5 частей желатозы, 10 частей воды очищенной. Готовую модельную среду вносили в конические пробирки Вассермана до верхнего деления. На поверхность модельной среды помещали равные навески различных образцов гелей, отличающихся концентрацией максимально очищенного хлорофилла. Изучение процесса высвобождения хлорофилла проводили в течение 72 часов, в термостате при температуре 37⁺_- 0,5 С. По величине окрашенной хлорофиллом зоны модельной среды судили о степени высвобождения его из гелей с различной концентрацией фитокомплекса. Результаты исследований представлены в таблице 3.

Таблица 3

Результаты изучения влияния концентрации максимально очищенного хлорофилла на степень высвобождения гелей

Концентрация максимально очищенного хлорофилла, %	Величина окрашенных зон, мм
	18 часов	36 часов	54 часа	72 часа
1	4	9	12	16
2	7	12	14	21
3	7	12	14	21
4	7	12	14	21
5	7	12	15	21

Из полученных результатов следует, что оптимальная концентрация максимально очищенного хлорофилла в составе геля составляет 2%.

Степень высвобождения биологически активных веществ водорастворимых веществ сока крапивы из гелей изучали методом диффузии в желатиновый гель в опытах «in vitro». В приготовленный 5% желатиновый гель вводили индикатор на дубильные вещества- хлорид железа (III). Гель разливали в чашки Петри и после его формирования вырезали отверстия диаметром 6мм, в которые вносили навески образцов гелей по 1,0 г. Концентрация сока крапивы в исследуемых образцах составляла от 2 % до 12%. Дубильные вещества образовывали с хлоридом железа (III) фиолетовое окрашивание. По радиусу окрашенных зон судили о степени высвобождения дубильных соединений сока крапивы. Полученные в ходе эксперимента результаты приведены в таблице 4.

Таблица 4

Результаты изучения влияния концентрации сока крапивы на степень

высвобождения его БАВ из гелей

Концентрация сока крапивы, %	Величина окрашенных зон, мм
	4 часа	8 часов	12 часов
2	2	4	7
4	3	5	9
6	3	5	9
8	3	6	10
10	4	7	12
12	4	7	12

Анализ полученных результатов подтверждает оптимальную концентрацию сока крапивы 10%.

Таким образом, комплексные исследования по определению концентрации фитокомплексов в геле позволили установить оптимальный его состав с содержанием максимально очищенного хлорофилла в концентрации 2 % и сока крапивы в концентрации 10%.

Рецензенты:

Компанцев Д.В., д.фарм.н., заведующий кафедрой технологии лекарств ПМФИ-филиала ВолгГМУ, г. Пятигорск.

Хаджиева З.Д., д.фарм.н., профессор кафедры технологии лекарств ПМФИ-филиала ВолгГМУ, г. Пятигорск.