Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,813

ИЗМЕНЕНИЯ ТКАНИ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ИНДУЦИРОВАННЫЕ ПРИЕМОМ КАРПРОФЕНА У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ

Лазаренко Л.В. 1 Косарева П.В. 2
1 ФКОУ ВО Пермский институт ФСИН России
2 ФГБОУ ВО Пермский государственный национальный исследовательский университет
Целью исследований было провести оценку патоморфологических изменений в ткани поджелудочной железы крыс, индуцированных длительным применением карпрофена, относящегося к группе нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП). Для изучения реактивных изменений в ткани органа были сформированы четыре экспериментальные группы животных, которые получали разные дозировки препарата: терапевтическую, двукратную, пятикратную и десятикратную. Выявленные нарушения указывали на токсическое действие препарата, наиболее характерными признаками были гемодинамические нарушения, белковая дистрофия и склеротические изменения (фиброз), которые имели дозозависимый эффект. При увеличении дозы препарата нарастала выраженность некротических процессов в ткани, которые сопровождались появлением двуядерных клеток. Обнаруженная жировая дистрофия экзокриноцитов может быть связана с развитием оксидативного стресса. При небольших дозировках карпрофена морфологическая картина соответствовала серозно-инфильтративной (отечной) форме панкреатопатии, при высоких – наблюдался геморрагический или негеморрагический панкреонекроз (мелкоочаговый, крупноочаговый, субтотальный). Видимых нарушений структуры эндокринных островков обнаружено не было, тем не менее можно предполагать, что развитие гемодинамических и склеротических процессов в паренхиме оказывает действие на состояние эндокринных клеток. Полученные данные требуют более детального исследования, базирующегося на изучении патогенеза поражения поджелудочной железы при приеме НПВП.
карпрофен
нпвп-панкреатопатия
гистопатологические изменения
1. Кемельман Е.Л. Оценка частоты возникновения гастроэнтерологических осложнений при назначении собакам карпрофена в комбинации с омепразолом / Е.Л. Кемельман, К.С. Варенов, А.А. Архипова // Российский ветеринарный журнал. 2015. № 1. С. 16-19.
2. Forsyth S.F., Guilford W.G., Haslett S.J., Godfrey J. Endoscopy of the gastroduodenal mucosa after carprofen, meloxicam and ketoprofen administration in dogs // JSAP. 1998. № 39 (9). P. 421-424.
3. Monteiro-Steagall B.P., Steagall P.V., Lascelles B.D. Systematic review of nonsteroidal anti-inflammatory drug-induced adverse effects in dogs // Journal of Veterinary Internal Medicine. 2013. № 27. P. 1011-1019.
4. Сравнительная оценка безопасности применения нестероидных противовоспалительных средств при лечении собак с нарушениями опорно-двигательной функции конечностей / Л.С. Барсегян [и др.]. // Российский ветеринарный журнал. 2015. № 6. С. 18-21.
5. Dоbrоnte Z., Toldy E., Mаrk L., Sarang K., Lakner L. Effects of rectal indomethacin in the prevention of post-ERCP acute pancreatitis // Orvosi Hetilap. 2012. № 25. P. 990-996.
6. Lee S.C., Dalia S.M. Drug-induced chronic pancreatitis // Med Health R I. 2012. № 1. P. 19-20.
7. Mark R. Jones, O. Morgan Hall, Adam M. Kaye, Alan David Kaye. Drug-Induced Acute Pancreatitis: A Review // The Ochsner Journal. 2015. № 15. P. 45-51.
8. Pezzilli R., Morselli-Labate A.M., Corinaldesi R. NSAIDs and Acute Pancreatitis: A Systematic Review // Pharmaceuticals. 2010. № 3. P. 558-571.
9. Патоморфологические изменения ткани поджелудочной железы крыс при длительном приеме нимесулида / Л.В. Лазаренко [и др.] // Пермский медицинский журнал. 2016. № 4. С. 78-81 .

Нестероидные противовоспалительные препараты (НПВП) широко используются в клинической ветеринарной практике, чаще всего они назначаются при заболеваниях опорно-двигательного аппарата, как правило, длительными курсами. Ассортимент НПВП ветеринарного назначения достаточно разнообразен, но чаще, чем другие НПВП, при лечении животных назначается карпрофен [1]. Препарат является селективным ингибитором ЦОГ-2, предназначен для домашних животных.

Карпрофен считается одним из наиболее безопасных НПВП [2], однако его использование связано с определенным риском побочных эффектов со стороны желудочно-кишечного тракта [2-4]. Имеются сведения о гепатотоксическом действии карпрофена [1; 4]. Информация о негативном действии препарата на поджелудочную железу отсутствует. Между тем в научной литературе встречаются сообщения о том, что НПВП могут быть причиной развития острого и хронического панкреатита [5-7]. На сегодняшний день патогенез НПВП-панкреатопатии не изучен, одной из гипотез является возможность индуцирования препаратами данной группы оксидативного стресса в клетках железы [8].

Таким образом, сведения о поражении поджелудочной железы у людей и животных, связанные с приемом НПВП, крайне немногочисленны, тем не менее этот вопрос представляет несомненный интерес.

Цель исследований. Оценить характер поражения ткани поджелудочной железы у экспериментальных животных при моделировании НПВП-панкреатопатии с использованием различных дозировок карпрофена.

Материалы и методы исследования. Моделирование НПВП-индуцированного поражения поджелудочной железы у нелинейных белых крыс (самцы и самки) c массой тела 200-250 г осуществляли путем перорального введения карпрофена (препарат Римадил Р, Pfizer Animal Health, США) в течение 21 дня. Было сформировано четыре экспериментальные группы животных, получавших препарат в следующих дозировках: 4 мг/кг (терапевтическая доза, рекомендованная производителем, n=26); 8 мг/кг (n=28), 20 мг/кг (n=22), 40 мг/кг (n=24). Препарат давали на фоне обычного пищевого режима один раз в день за час до кормления.

По окончании исследований животных выводили из эксперимента путем перерезки спинного мозга под эфирным наркозом с соблюдением правил эвтаназии. После наступления биологической смерти животного для проведения гистологического исследования забирали печень и поджелудочную железу. Все эксперименты выполнены в соответствии с «Правилами лабораторной практики в Российской Федерации» (утвержденные Приказом Министерства здравоохранения РФ № 708н от 23 августа 2010 г.) и «Европейской конвенцией о защите позвоночных животных, используемых для экспериментов или в иных научных целях» от 18 марта 1986 г.

Гистологическое исследование выполнено стандартными методиками. Срезы окрашивали гематоксилином и эозином.

Результаты, полученные при проведении гистологического исследования образцов тканей от животных экспериментальных групп, сравнивали с результатами, полученными при исследовании биоматериала, полученного от животных контрольной группы (интактные животные, n=21). Для проведения статистического анализа использован критерий Стьюдента.

Результаты исследования и их обсуждение. У животных контрольной группы (интактных) гистологическая картина ткани поджелудочной железы соответствовала видовой норме. Экзокринная часть поджелудочной железы была представлена панкреатическими дольками, образованными многочисленными панкреатическими ацинусами с секреторными отделами, визуализировались выводные протоки: вставочные, внутридольковые, междольковые. В междольковых перегородках из соединительной ткани хорошо выявлялись кровеносные сосуды и немногочисленные междольковые выводные протоки. Эндокринная часть была представлена островками округлой формы, образованными эндокриноцитами, недифференцируемыми по типам при обычных методах гистологического окрашивания, в островках отчетливо визуализировались кровеносные капилляры синусоидного типа (рис. 1).

Ацинусы и островок поджелудочной железы, внутридольковый проток х600

Рис. 1. Экзокринные ацинусы, хорошо визуализируются зимогенные гранулы в экзокриноцитах; эндокринный островок (интактные животные).

Окраска гематоксилином и эозином, х 600

Для полного представления о действии карпрофена на поджелудочную железу были сформированы четыре экспериментальные группы животных, которые получали разные дозировки препарата. Во время эксперимента в группах, получавших пяти- и десятикратную дозу, отмечалась гибель животных. При просмотре гистологических препаратов ткани железы, полученной от животных всех групп, наблюдались изменения, характерные для токсического поражения.

У животных, получавших терапевтическую дозу (4 мг/кг), наблюдалось выраженное полнокровие кровеносных сосудов поджелудочной железы в 61,5% случаев, у пяти животных (19,2%) отмечался умеренный отек межацинарной соединительной ткани. У большей части животных группы в паренхиме железы выявлялись ограниченные участки белковой (вакуольной) (57,7%) и жировой (61,5%) дистрофии экзокриноцитов, нарушающие структуру ацинусов (рис. 2).

5 Деструкция ацинусов, вакуолизация клеток и отек х 600

Рис. 2. Участок вакуольной и жировой дистрофии экзокриноцитов в поджелудочной железе (терапевтическая доза). Окраска гематоксилином и эозином, х 600

У пяти животных (19,2%) обнаружен фиброз междольковой соединительной ткани. В 38,5% случаев отклонений от гистологической нормы ткани поджелудочной железы у животных этой группы выявлено не было.

В ткани железы всех животных, получавших дозу, в два раза превышающую терапевтическую (8 мг/кг), отмечалось полнокровие кровеносных сосудов (100%). У 75% животных группы в паренхиме железы выявлена вакуольная дистрофия, а также отек межацинарной и междольковой соединительной ткани. Некроз экзокриноцитов с нарушением структуры ацинусов наблюдался у двадцати животных (71,4%), в местах некроза отмечались реактивные процессы в ткани железы – появление двуядерных клеток (рис. 3).

4 очаг дистрофии ацинарных клеток х 600

Рис. 3. Белковая (вакуольная) дистрофия экзокриноцитов, участки некроза и появление двуядерных клеток (доза 8 мг/кг). Окраска гематоксилином и эозином, х 600

У пятнадцати животных (53,6%) выявляли фиброз междольковой соединительной ткани.

У животных, получавших карпрофен в пятикратной дозировке (20 мг/кг), при гистологическом исследовании, помимо полнокровия крупных сосудов (100% случаев), в ткани выявлялись выраженный отек межацинарной и междольковой соединительной ткани, обширные участки вакуольной дистрофии экзокриноцитов и обширные по площади участки некроза с нарушением структуры ацинусов. По периферии зон некроза выявляли большое количество двуядерных клеток. Также у всех животных группы наблюдалось формирование склероза (фиброза) междольковой соединительной ткани (рис. 4).

2 Фиброз сосудов и обширные участки некроза паренхимы железы х 600

Рис. 4. Тотальный некроз паренхимы поджелудочной железы, фиброз междольковой соединительной ткани (доза 20 мг/кг). Окраска гематоксилином и эозином, х 600

У животных, получавших десятикратную дозировку карпрофена (40 мг/кг) при гистологическом исследовании паренхимы железы в 100% случаев выявлялись обширные участки вакуольной дистрофии экзокриноцитов и обширные по площади участки некроза с нарушением структуры ацинусов, появление двуядерных клеток и фиброзные изменения соединительной ткани. У половины животных отмечались массивные кровоизлияния в паренхиму железы, полнокровие не только крупных сосудов, но и гемокапилляров. Также у животных данной группы в небольшом количестве обнаружены тучные клетки, расположенные в соединительной и жировой ткани, окружающей железу (рис. 5).

5 т дегр туч клетки 4 х 600

Рис. 5. Дегранулированные тучные клетки в междольковой соединительной ткани поджелудочной железы (доза 40 мг/кг). Окраска гематоксилином и эозином, х 600

В целом патоморфологические изменения в паренхиме поджелудочной железы животных опытных групп выглядели следующим образом (таблица).

Гистопатологические изменения в паренхиме поджелудочной железы у животных экспериментальных групп

Признак

Доза 4 мг/кг,

% животных в группе

Доза 8 мг/кг,

% животных в группе

Доза 20 мг/кг,

% животных в группе

Доза 40 мг/кг,

% животных в группе

Полнокровие сосудов

61,5

100*

100*

100*

Вакуольная дистрофия

57,7

75

100*

100*

Нарушение структуры ацинусов

57,7

71,4*

100*

100*

Фиброз междольковой соединительной ткани

19,2

53,6*

100*

100*

Отек межацинарной и междольковой соединительной ткани

19,2

75*

100*

100*

Жировая дистрофия

61,5

Некрозы

71,4*

100*

100*

Двуядерные клетки

71,4*

100*

100*

Кровоизлияния в паренхиму железы

50*

Тучные клетки

66,7*

*p<0,05 по отношению к терапевтической дозе (4 мг/кг).

Таким образом, при длительном применении животным карпрофена в ткани поджелудочной железы наблюдались изменения, характерные для токсического поражения: белковая и жировая дистрофия экзокриноцитов, некрозы, реактивная гипертрофия в зонах некроза с появлением двуядерных клеток. При использовании высоких доз препарата отмечался выраженный отек не только межацинарной, но и междольковой соединительной ткани, а также кровоизлияния в паренхиму железы в местах обширных некрозов, то есть изменения соответствовали острому воспалению. При небольших дозировках карпрофена морфологическая картина соответствовала серозно-инфильтративной (отечной) форме, при высоких – наблюдался геморрагический или негеморрагический панкреонекроз: мелкоочаговый, крупноочаговый, субтотальный.

Обнаруженные нарушения структуры ткани мы связываем с действием карпрофена, поскольку похожая картина наблюдалась в экспериментах с применением нимесулида [9]. Гистопатологические изменения в паренхиме поджелудочной железы наблюдались уже при использовании терапевтической дозы препарата. Наиболее характерными признаками были гемодинамические нарушения, белковая дистрофия и склеротические изменения, которые имели дозозависимый эффект. При увеличении дозы препарата нарастала выраженность некротических процессов в ткани, которые сопровождались появлением двуядерных клеток, что связано с нарушениями митотических процессов. Обнаруженная у отдельных животных жировая дистрофия экзокриноцитов может указывать на развитие оксидативного стресса, обусловленного длительным применением препарата.

Видимых нарушений структуры эндокринных островков мы не обнаружили, тем не менее развитие гемодинамических и склеротических процессов в паренхиме, вероятно, оказывало действие на состояние эндокринных клеток. Полученные данные требуют более детального исследования, базирующегося на изучении патогенеза поражения поджелудочной железы при приеме НПВП.

Заключение. Выявленные нарушения в ткани поджелудочной железы у животных, длительное время получавших карпрофен в разных дозировках, указывают на токсическое действие препарата. Наиболее характерные выявленные признаки: гемодинамические нарушения, белковая дистрофия и склеротические изменения (фиброз), которые имели дозозависимый эффект. При небольших дозировках карпрофена морфологическая картина соответствовала серозно-инфильтративной (отечной) форме панкреатопатии, при высоких – наблюдался геморрагический или негеморрагический панкреонекроз (мелкоочаговый, крупноочаговый, субтотальный).


Библиографическая ссылка

Лазаренко Л.В., Косарева П.В. ИЗМЕНЕНИЯ ТКАНИ ПОДЖЕЛУДОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ, ИНДУЦИРОВАННЫЕ ПРИЕМОМ КАРПРОФЕНА У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ // Современные проблемы науки и образования. – 2017. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=27329 (дата обращения: 28.02.2020).


Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074