Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,791

ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРЫС В НОРМЕ И В УСЛОВИЯХ ТЕРМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ

Ажикова А.К. 1 Журавлева Г.Ф. 2
1 ГБОУ ВПО «Астраханский Государственный медицинский университет»
2 ФГОУ ВПО «Астраханский государственный университет»
Впервые изучено влияние лекарственных форм различной консистенции на количественные изменения периферической крови крыс в условиях искусственной ожоговой травмы. Любой патологический процесс может отразиться на количественных и качественных особенностях состава циркулирующей крови. Этим и определяется огромное значение необходимости изучения крови в условиях гипертермии и выявления закономерностей изменений различных показателей. Термическая травма сопровождается развитием интоксикации. Кровь в первую очередь подвергается действию токсических веществ, возникших в очаге поражения. Исследование морфологических и биохимических показателей периферической крови заключалось в определении количества лейкоцитов, количества эритроцитов, лейкоцитарной формулы, уровня гемоглобина, перекисной резистентности эритроцитов. Полученные данные расширяют и углубляют представления о характере интоксикации организма в условиях стрессового воздействия различных факторов.
показатели периферической крови
кроветворные органы
ожоговые поражения кожи
термическое воздействие
гипертермия
1. Ажикова А. К. Использование пуповинной крови для восстановления кожи после термической травмы / А. К. Ажикова, М. В. Лазько // Естественные науки: Журнал фундаментальных и прикладных исследований. – 2008. – №.4. – С. 53-57.
2. Грушко М. П. Состояние периферической крови у карповых рыб в нерестовый период / М. П. Грушко, Н. Н. Федорова // Актуальные проблемы современной науки. – Технические науки: Труды 2-го Международного форума. – Самара, 2006. – С.23-25.
3. Земков Г. В. Характер и степень патологических изменений в крови и внутренних органах судака / Г. В. Земков, Г. Ф. Журавлева // Материалы VIII конф. по экологической физиологии и биохимии рыб. – Петрозаводск, 1992. – С. 40.
4. Лазько А. Е. Состояние мембран эритроцитов при воздействии серосодержащего газа / А. Е. Лазько, Р. И. Асфандияров, А. А. Резаев // Актуальные вопросы медицинской фармакологии. – 1993. – С.41-47.
5. Мамонтова Е. В. Влияние ALPHA-токоферола на степень перекисного гемолиза белых мышей в норме и при иммобилизационном стрессе / Е. В. Мамонтова // Современные проблемы науки и образования. – 2006. – № 3. – С. 27-28.
6. Островский В. К. Показатели крови и лейкоцитарного индекса интоксикации в оценке тяжести и определении прогноза при воспалительных, гнойных и гнойно-деструктивных заболеваниях / В. К. Островский, А. В. Мащенко, Д. В. Янголенко, С. В. Макаров // Клин. лаб. диагностика. – 2006. – № 6. – С. 50-53.
7. Покровский А. А. Методика определения перекисного гемолиза эритроцитов / А. А. Покровский, А. А. Абразцов // Вопросы питания. – М.: Наука, 1964. – № 6. – С.44.
8. Рожкова И. С. Влияние хронической интоксикации на свободнорадикальные процессы плазмы крови крыс / И. С. Рожкова, Д. Л. Теплый, Б. В. Фельдман // Научный руководитель. – 2015. – № 3(10). – С. 1-7.
9. Теплый Д. Л. Особенности морфологической картины сыворотки крови мышей разных возрастных групп при экспериментальном стрессе / Д. Л. Теплый, Н. А. Аюпова // Естественные науки: Журнал фундаментальных и прикладных исследований. – 2005. – №.10. – С. 47-50.
10. Ясенявская А. Л. Влияние антиоксидантов на уровень перекисного гемолиза эритроцитов старых крыс в норме и при иммобилизационном стрессе / А. Л. Ясенявская, Н. В. Кобзева // Современные наукоемкие технологии. – 2006. – № 2. – С. 69-70.

В медицинской биотехнологии постановка экспериментов при помощи моделирования патологических состояний, например ожогового повреждения кожи, имеет огромное значение для глубокого исследования крови и кроветворных органов [3]. Исходя из этого, необходимо тщательное и всестороннее изучение всех изменений, которые происходят в организме при этих воздействиях. Главным образом это относится к системам поддержания гомеостаза [2].

Ожоговые поражения кожи стали в современном мире одним из наиболее социально значимых и распространенных типов травматических повреждений у человека. Изучению вопроса реакции клеток крови на ожоги посвящен ряд исследований [1, 8].

Любое заболевание, патологический процесс, а также ряд физиологических сдвигов могут в той или иной степени отразиться на количественных и качественных особенностях состава циркулирующей крови [5]. Этим и определяется огромное значение необходимости изучения крови. Белые клетки крови, имея высокую реактивность, быстро включаются в адаптационные реакции. Они способны к неспецифическому реагированию в ответ на альтерирующие воздействия.

Термическая травма сопровождается развитием интоксикации. Кровь в первую очередь подвергается действию токсических веществ, возникших в очаге поражения [1].

Свой вклад в общее состояние системы организма вносят компоненты крови. Наиболее уязвимым объектом для действия продуктов свободнорадикального окисления липидов является стенка кровеносных сосудов, что обусловлено высоким уровнем кислорода в крови и низким уровнем его утилизации [9]. В условиях патологического процесса происходит поражение неклеточного компонента сосудистой стенки.

Цель исследования – изучение показателей периферической крови половозрелых крыс в норме и в условиях термического воздействия.

Материалы и методы. Объектом исследования явились 50 беспородных крыс-самцов 4-месячного возраста. Во время эксперимента регистрировали общее состояние и поведение животных. Самцы крыс были разделены на пять групп по типу воздействия:

I группа – животные, не подвергшиеся ожоговому воздействию (контрольная, 10 шт.);

II группа – животные, получившие ожоговое воздействие и не подвергшиеся терапии (10 шт.). Раны регенерировали естественным путем;

III группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии спреем «Д-Пантенол» (10 шт.);

IV группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии бальзамом мазевой формы «Спасатель» (10 шт.);

V группа – животные, получившие ожоговое воздействие и подвергшиеся терапии аппликациями настойки календулы (10 шт.).

Исследование морфологических и биохимических показателей периферической крови заключалось в определении количества лейкоцитов, количества эритроцитов, лейкоцитарной формулы, уровня гемоглобина, перекисной резистентности эритроцитов.

Уровень гемоглобина в образцах крови крыс определяли электрофотометрическим способом на гемоглобинометре APEL Hemoglobinmeter HG-202. Мазки фиксировали и окрашивали по Романовскому – Гимзе. Идентификация форменных элементов крови проводилась согласно методике Н. Т. Ивановой [4]. Количество эритроцитов крови подсчитывали по стандартной методике в камере Горяева. Количество лейкоцитов считали по мазкам крови крыс.

Для оценки уровня свободнорадикального окисления и выраженности в связи с этим липолитических процессов в крови проводили измерение перекисной резистентности эритроцитов. Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про– и антиоксидантный баланс организма [6].

Для определения перекисного гемолиза эритроцитов использовали модификацию методов определения степени перекисного гемолиза эритроцитов (ПГЭ) А. А. Покровского и А. А. Абразцова [7], которую предложили А. Е. Лазько, Р. И. Асфандияров и А. А. Резаев [4].

Результаты исследования и их обсуждение. Анализ гематологических исследований экспериментальных животных показал, что наиболее высокий уровень гемоглобина периферической крови наблюдался у крыс, лечившихся бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол», что наглядно отображено в таблице 1. В группе крыс, лечившихся настойкой календулы, данный показатель незначительно отличался от значений у обожженных животных, не получавших лечения.

Таблица 1

Гематологические показатели через 3 суток после ожоговой травмы

Тип воздействия

Эритроциты

(шт./мкл.)

Гемоглобин

(г/л)

1 -Контроль

7,8х106

27,7

2-Ожог

6,5 х106*

25,6*

3-Ожог+аппликации мазью «Д-пантенол»

8,2х106 *

29,2 *

4-Ожог+аппликации бальзамом «Спасатель»

8,3х106*

28,3*

5-Ожог+аппликации настойкой календулы

6,8х106*

25,7*

Примечание: * – Р<0,05 по сравнению с контролем.

Изменение уровня гемоглобина в результате опыта отмечено в таблице 1. Высокий уровень гемоглобина наблюдался у крыс, лечившихся Д-пантенолом. Средний показатель уровня гемоглобина отмечен у крыс, леченных бальзамом «Спасатель». В экспериментальной группе с настойкой календулы он незначительно и статистически недостоверно отличался от значений у животных 3 группы.

Выявлено, что термический ожог кожи вызвал уменьшение количества эритроцитов периферической крови крыс. Установлено, что при лечении ожогов этот показатель несколько увеличивался, например, при терапии бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол».

Перекисный гемолиз эритроцитов является чувствительным показателем, отражающим про- и антиоксидантный баланс организма [10].

По данным табл. 2 показано, что не леченный термический ожог межлопаточной области спины крыс способствует наиболее полному перекисному гемолизу эритроцитов крови крыс (степень гемолиза, в среднем, 7 %, p<0,001). Лечение ожогов кожи бальзамом «Спасатель» вызывает средний гемолиз (степень гемолиза в среднем 3,94 %, р<0,05), при терапии ожоговых травм межлопаточной области спины крыс спреем Д-пантенолом наблюдался частичный гемолиз (степень гемолиза в среднем и 3,62 %, Р<0,05).

Таблица 2

Перекисная резистентность эритроцитов самцов крыс (% гемолизированных эритроцитов)

Группа

Количество

животных

М+m

1 -Контроль

10

3,82+0,121*

2 -Ожог

10

6,83+0,469 *** ###

3 -Ожог+аппликации мазью «Д-пантенол»

10

3,62+0,174***

###

4-Ожог+аппликации бальзамом «Спасатель»

10

3,94+0,081*

5-Ожог+аппликации настойкой календулы

10

4,94+0,081*

Примечание: в сравнении с контрольными животными: *р<0,05; **p<0,01; ***p<0,001; в сравнении с группой 2-Ожог: #р<0,05; ##p<0,01; ###p<0,001.

Анализ данных по определению перекисного гемолиза эритроцитов самцов белых крыс показал, что устойчивость эритроцитов к перекисной провокации значительно повышалась в условиях лечения ожогов кожи крыс аппликациями бальзамом «Спасатель». Воздействие аппликациями мазью «Д-пантенол» привели к повышению устойчивости эритроцитов к перекисной провокации и приблизили показатели перекисного гемолиза эритроцитов к контролю. Термический ожог без лечения резко снизил устойчивость эритроцитов к перекисной провокации. Аппликации настойкой календулы незначительно повысил устойчивость эритроцитов к гемолизу (см. табл. 2).

Установлено, что термические ожоги существенно влияют и на общее число лейкоцитов, что проявлялось выраженной лейкопенией во все сроки наблюдения. В табл. 3 представлена некоторая волнообразность лейкопении. Так, на 3-и сутки количество лейкоцитов составляло 1,8±1,4 × 109, на 7-е – 2,5±1,4 × 109, на 14-е – 0,85±1,4 × 109, на 30-е – 2,4±1,4 × 109. Учитывая, что в контрольной серии уровень лейкоцитов составлял 10,2±1,4 × 109, что соответствует и литературным данным [9], отмечено значительное снижение числа защитных клеток крови.

Таблица 3

Содержание лейкоцитов в периферической крови крыс

Экспериментальные группы

Количество животных, n

Количество лейкоцитов × 109 на 3 сутки эксперимента

Количество лейкоцитов × 109 на 7 сутки эксперимента

Количество лейкоцитов × 109 на 10 сутки эксперимента

1-Контроль

10

3,4 ± 0,1

3,2 ± 0,1

3,0 ± 0,1

2-Ожог

10

3,8 ± 0,2 *

3,3 ± 0,3 *

2,9 ± 0,2 *

3-Ожог+аппликации мазью «Д-пантенол»

10

3,2 ± 0,3 *

3,1 ± 0,3 *

2,9 ± 0,3 *

4-Ожог+аппликации бальзамом «Спасатель»

10

3,1 ± 0,3*

3,1 ± 0,3*

3,2 ± 0,4*

5-Ожог+аппликации настойкой календулы

10

2,8 ± 0,2 *

3,1 ± 0,3 *

2,9 ± 0,2 *

Примечание: * – p<0,05 – достоверность различий между группами животных по сравнению с контролем.

Наблюдалось изменение общего количества лейкоцитов после термического воздействия между экспериментальными группами и контролем (см. табл. 3). В ходе экспериментов было выявлено, что у животных, получавших терапию Д-пантенолом, происходило незначительное уменьшение общего количества лейкоцитов в сравнении с контролем. У животных, получавших лечение настойкой календулы, количество лейкоцитов достоверно уменьшилось в сравнении с контрольной группой на 22 % (р<0,05).

Изучение лейкоцитарной формулы дало не менее интересные результаты. В табл. 4 отражены результаты исследования влияния ожоговой травмы на показатели лейкоцитарной формулы периферической крови подопытных крыс. В контрольной серии в формуле преобладали лимфоциты до 55–60 %, нейтрофилы составляли 40 %. При исследовании получено, что термический ожог приводил к достоверному и выраженному увеличению процентного числа лимфоцитов и нейтрофилов. Так, на 3-и сутки лимфоциты составляли 67,4 %.

Таблица 4

Изменение показателей лейкоцитарной формулы на 3-и сутки эксперимента

Экспериментальные группы

Нейтрофилы, M±m, %

Лимфоциты, M±m, %

Эозинофилы M±m, %

Моноциты M±m, %

1-Контроль

40,1±3,52

55,6±3,18

2,1±0,71

6,2±2,00

2-Ожог

27,1± 2,97*

67,4±2,61*

3,1± 0,80*

2,4± 0,34*

3-Ожог+аппликации мазью «Д-пантенол»

37,2± 2,91#

60,2±2,94#

2,7± 0,49#

5,9± 0,61#

4-Ожог+аппликации бальзамом «Спасатель»

41,0± 2,99#

58,6±5,22 #

2,9± 0,31#

6,4± 2,32#

5-Ожог+аппликации настойкой календулы

41,0± 2,99 #

64,6±5,22 #

2,7± 0,31#

2,9± 2,32#

Примечание: р<0,05, * – в сравнении с контролем,

# – в сравнении с группой получивших ожог без лечения.

Данные эксперимента моделирования термического ожога межлопаточной области спины белых крыс свидетельствовали о достоверном колебании количества нейтрофилов у животных, получавших лечение аппликациями спрея, в сравнении с контрольной группой и группой, не получавших лечение (рис. 1).

Рис. 1. Количество нейтрофилов (M±m, %) в разных опытных группах

Отмечено, что показатели количества нейтрофилов, по сравнению с контролем, чуть ниже в группе, лечившихся спреем «Д-пантенол», и незначительно выше в группе, лечившихся бальзамом «Спасатель». На рис. 2 видно, что отсутствие терапии ожога у 2 группы крыс отразилось на большем количественном содержании лимфоцитов крови.

Рис. 2. Количество лимфоцитов (M±m, %) в разных опытных группах

У группы крыс, лечившихся бальзамом «Спасатель», количество лимфоцитов увеличилось. При сравнении крыс, лечившихся спреем «Д-пантенол», с контрольной группой наблюдалось снижение количества лимфоцитов, а у крыс, лечившихся настойкой календулы, количество лимфоцитов практически не отличалось от 2 группы.

При ожоге наблюдалось изменение показателей эозинофилов: увеличение этого показателя в группе 2 (ожог без терапии), в сравнении с группами крыс, получавших лечение (р<0,05). У животных, лечившихся спреем, количество эозинофилов повысилось на 22 %, по сравнению с контролем, при терапии настойкой календулы оно понизилось, что не достоверно (рис. 3).

Рис. 3. Количество эозинофилов (M±m, %) в разных опытных группах

Как видно из круговой диаграммы на рис. 4, термическое воздействие без лечения приводило к снижению количества моноцитов, терапия аппликациями бальзамом «Спасатель» и спреем «Д-пантенол» стимулировало незначительное увеличение количества моноцитов в крови, по сравнению с контрольной группой подопытных животных (рис. 4).

Рис. 4. Количество моноцитов (M±m, %) в разных опытных группах

Заключение

Исследование таких гематологических показателей, как количество эритроцитов, лейкоцитов, уровень гемоглобина и состояние перекисной резистентности эритроцитов, свидетельствует о значительном поражении системы крови под воздействием местного воздействия термического фактора. Наиболее результативными оказались эксперименты терапии ожогов крыс аппликациями спрея «Д-пантенол» и бальзама «Спасатель».

Таким образом, применение в эксперименте лекарственных средств для лечения ожогов (спрей Д-пантенол, бальзам «Спасатель») способствует существенному ингибированию свободнорадикального окисления, к повышению прочности клеточных мембран компонентов крови.


Библиографическая ссылка

Ажикова А.К., Журавлева Г.Ф. ИССЛЕДОВАНИЕ ГЕМАТОЛОГИЧЕСКИХ ПОКАЗАТЕЛЕЙ КРЫС В НОРМЕ И В УСЛОВИЯХ ТЕРМИЧЕСКОГО ВОЗДЕЙСТВИЯ // Современные проблемы науки и образования. – 2016. – № 2.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=24350 (дата обращения: 20.11.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074