Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,931

ДИНАМИКА ЭРИТРОЦИТОВ В ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫЙ ПЕРИОД ПРИ ЗАВОРОТЕ ЖЕЛУДКА У СОБАК

Сазонова В.В. 1 Боженова Е.Ю. 2
1 ФГБОУ ВПО «Орловский государственный аграрный университет»
2 Ветеринарная клиника «101 далматинец»
В работе представлены результаты исследований динамики морфофункциональных параметров эритроцитов в постоперационный период при завороте желудка у собак. Заворот желудка вызывает выраженные негативные сдвиги в динамике эритроцитов, при этом структура эритроцитов подвергается значительной деформации, снижается количество дискоцитов и нормоцитов, появляются такие клетки, как эхиноциты, шизоциты, большое количество монетных столбиков. Эти данные свидетельствуют о развитии сложной функциональной перестройки эритрона. Происходит увеличение разнородности эритроцитов при 6-8-часовом завороте, отмечены тяжелые изменения в эритроцитарном звене, налицо все признаки геморрагической и гемолитической анемии.
клинический контроль
анемия
эритроциты
заворот желудка
собаки
1. Алексеев Н.А. Анемии. - СПб. : Гиппократ, 2004. – 512 с.
2. Ватников Ю.А. Организация репаративного остеогенеза животных. Экспериментальные и клинические исследования. – М. : ООО «Франтера», 2004. – 144 с.
3. Ватников Ю.А. Характеристика кроветворения при множественных травмах у собак // Ветеринарная патология. – 2012. – № 4 (42). – С. 45-48.
4. Голева А.А., Ватников Ю.А. Динамика функциональной активности эритроцитов при завороте желудка у собак // Российский ветеринарный журнал (мелкие домашние животные). – 2014. – № 5. – С. 15-17.
5. Кутафина Н.В., Медведев И.Н. Вопросы эритроцитарно-тромбоцитарных взаимодействий // Наука и образование: инновации, интеграция и развитие : материалы Международной научно-практической конференции : в 2-х частях. - 2014. – С. 72-75.
6. Макинтайр Д.К., Дробац К.Д., Хаскингз С.С. с соавт. Скорая помощь и интенсивная терапия животных / пер. с англ. Лисициной Т.В. – М. : Аквариум-Принт, 2008. – 560 с.
7. Медведев И.Н., Завалишина С.Ю., Краснова Е.Г., Кутафина Н.В. Методические подходы к оценке агрегации и поверхностных свойств тромбоцитов и эритроцитов // Фундаментальные исследования. – 2014. – № 10-1. – С. 117-120.
8. Медведев И.Н., Завалишина С.Ю., Краснова Е.Г., Белова Т.А. Способ нормализации спонтанной агрегации эритроцитов у новорожденных телят с функциональными нарушениями пищеварения : Патент на изобретение RUS 2412696, приоритет 15.10.2009.
9. Сазонова В.В. Анемия собак и кошек, её дифференциальная диагностика и комплексная терапия : автореф. дис. … д-ра вет. наук. – СПб., 2009. – 51 с.
Уиллард М.Д., Тведтен Г., Торнвальд Г. Лабораторная диагностика в клинике мелких домашних животных / под ред. В.В. Макарова; пер. с англ. Л.И. Евелевой, Г.Н. Пимочкиной, Е.В. Свиридовой. – М. : ООО «Аквариум БУК», 2004. – 432 с.
Заворот желудка у собак- одно из самых тяжелых заболеваний, при котором гибель составляет 100%, при этом данные научной литературы показывают, что развитие структурных и функциональных нарушений желудка у собак представляет собой сложный каскад изменений, который требует не только всесторонней клинической оценки, но и понимания патогенетических особенностей постоперационного периода, что является главным звеном в лечении тяжелой абдоминальной патологии [2]. Нашими исследованиями установлено, что осложнения и гибель собак при завороте желудка в различные сроки после операций следующие: количествоосложнений с заворотом желудка до 2 часов составило 10%, при длительности заворота 2-4 часа - 23% и смертность - 6%. Заворот в течение 4-6 часов сопровождался 75% осложнений и 25% гибели. При увеличении продолжительности заворота до 6-8 часовколичество осложнений составляет 100%, смертность - 50%. Выраженные патоморфологические изменения цитоархитектоники эритроцитов не имеют породной и возрастной зависимости. В этой связи понимание и клинический контроль, основанные на анализе структурных и функциональных особенностей эритроцитов, открывают перспективное направление в поиске причин, вызывающих осложнения и гибель животных [8], в т.ч. в постоперационный период при абдоминальной патологии, связанной с заворотом желудка [3; 4]. На сегодняшний день в клинической ветеринарии недостаточно полно отработана система методов, дающих возможность обеспечить надежное, научно обоснованное влияние на течение постоперационного периода при завороте желудка. Структурные и функциональные изменения периферической крови заставляют уделять большее внимание всесторонним исследованиям организма, так как создание алгоритмов постоперационнойстабилизации является основой профилактики смертельных случаев и серьезных посттравматических осложнений. Наряду с этим статистические показатели, анализ научной литературы, собственные наблюдения показывают, что решение задач постоперационной стабилизации животных и создания условий контролируемой коррекции основных систем организма на сегодняшний день осуществляется недостаточно. Нетнаучно обоснованных критериев, дающих полное представление о контроле над развитием эритрогенеза. При этом углубленное изучение постоперационногосостояния с позиций морфофункциональных особенностей эритрогенеза в сравнительном аспекте при различных способах оперативного вмешательства в случае заворота желудка представляется актуальным. В этой связи цель настоящего исследования - изучить особенности структурных и функциональных изменений эритроцитов в постоперационный период при завороте желудка.

Материалы и методы. В работе представлены результаты исследований, полученные нами при анализе данных собак (n=12) гигантских пород с заворотом желудка до и после операции, прооперированных в период 6-8 часов после начала заворота. Стабилизацию животных до и после операции проводили по методу Макинтайр Д., Дробац К. с соавт. (2008) [6]. При изучении эритроцитов использовали метод Уиллард М., Тведтен Г.С. с соавт. (2004) [10].

Эритроцитарные параметры. Подсчет числа эритроцитов (RBC), уровень гемоглобина (HGB), гематокрит (НСТ); MCV (средний объем эритроцита); МСН (среднее содержание гемоглобина в эритроците); МСНС (средняя концентрация гемоглобина в эритроците); RDW (ширина распределения эритроцитов по объему). Наряду с этим проведены исследования тромбоцитов (PLT) [7].

Эритрограмму производили на гематологическом анализаторе РСЕ-90 (ERMAINC). Средний объём эритроцита (MCV) вычисляется по формуле как отношение гематокрита к количеству эритроцитов, измеряется в фемтолитрах (10-15/л). Один фемтолитр равен одному кубическому микрометру (одна миллионная часть метра), рассчитывается по формуле:MCV = HCTх10/ RBC (фл).

Среднее содержание гемоглобина в эритроците (MCH) отражает, сколько гемоглобина в среднем содержится в одном эритроците. Измеряется в пикограммах (одна триллионная часть грамма, 10-12)на эритроцит и рассчитывается как отношение гемоглобина к количеству эритроцитов,соответствует цветному показателю, который использовался ранее для отражения содержания гемоглобина в эритроцитах, и рассчитывается по формуле: MCH = HGBх10/RBC (пг).

Средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах (MCHC) - показатель насыщения эритроцита гемоглобином, в отличие от MCH, характеризует не количество гемоглобина в клетке, а «плотность» заполнения клетки гемоглобином, рассчитывается как отношение общего гемоглобина к гематокриту - объему, который занимают эритроциты в кровяном русле. Он измеряется в граммах на литр и является наиболее чувствительным показателем при нарушениях образования гемоглобина. Рассчитывается по формуле MCHC = HGBх100/HCT (г/дл).

Распределение эритроцитов по объему (RDW) измеряется в процентах и показывает, насколько объём эритроцитов отклоняется от среднего, демонстрируя разницу между самым маленьким эритроцитом и самым большим.

Данные животных, которые погибли в постоперационный период (n=3), мы учитывали до окончания наблюдений. Статистическую обработку результатов выполняли с помощью программы MedCalc для Windows.

Результаты исследований. Изучение данных научной литературы показывает, что патофизиологическим особенностям развития послеоперационного периода после исправления заворота желудка, особенно в части, касающейся состояния крови, уделяется очень мало внимания, тем более что помимо травматического шока, вызываемого перекрутом желудка, зачастую данный процесс сопровождается массивной интраоперационной кровопотерей, что большинство исследователей не относит к сфере своих интересов, ограничиваясь хирургическим методом. Но практика показывает, что динамика функциональных и структурных изменений эритроцитов в постоперационный период характеризуется тяжелыми изменениями. Исследованиями установлено, что количество эритроцитов на момент первичного приема составило 4,1±0, 3х106/мкл, на 3-и сутки было на уровне 3,1±0,02х106/мкл. На 7-е сутки после операциипоказатель RBС продолжал снижаться, и в этот день установлено самое низкое их значение - 1,3±0,01х106/мкл. К11-мсуткамколичествоэритроцитовнезначительно увеличивалось, а к 15-м составило2,9±0,2х106/мкл (табл. 1). Несмотря на капельное восстановление кровопотери, анемия нарастает, снижение числа эритроцитов обусловлено не только кровопотерей, но и повышенным их потреблением вследствие гиперагрегации и разрушения. Эритроцит является сложным образованием, характеризуется наличием мембраны, цитоскелета мембраны и гемоглобина, особенностями метаболизма. Все это способствует выполнению этими клетками определенных функций. Нарушение структуры и метаболизма эритроцитов приводит к изменению их структуры и преждевременной гибели. На момент приема концентрация гемоглобина (HGB) составила 8,2±1,4 г/дл, к 7-м суткам мы отмечали самое сильное снижение гемоглобина до 6,6±0,3 г/дл, после чего его концентрация начала увеличиваться и к 15-м суткам составила 9,7±1,6 г/дл.

По результатам исследования величина гематокрита (НСТ) на момент первичного приема составила 24,6±2,3, на 3-и сутки - 33,6±1,6%, на7-е сутки - 18,1±3,1%. С 11-х суток (11,7±2,3) происходило увеличение данного показателя, и к 15-м суткам он достиг 18,1±3,1%. Данные изменения мы связываем с нарастанием токсического воздействия за счет появления мертвых тканей, накопления протеолитических ферментов и экзотоксинов [2; 4]. Важным элементом диагностики степени кровопотери является изучение гематологических показателей. Кровопотеря ведет к снижению числа эритроцитов и гемоглобина в периферической крови, уменьшению уровня гематокритной величины и удельного веса крови [9].

Исследованием среднего объёма эритроцита (MCV) установлено, что на 3-и сутки после операции увеличение его объема было до 108,3±6,3 фл, к 7-м суткам объем увеличился до 139,2±7,2 фл, после чего снизился до 68,8±6,6 фл, а к окончанию исследования объем снизился до 62,4±3,3 фл. Среднее содержание гемоглобина (MCH) в эритроците на 3-и сутки после операции не отличалось от ФП, в дальнейшем динамика содержания гемоглобина имела волнообразную направленность (табл. 1).

Таблица 1

Динамика функционального состояния эритроцитов собак при завороте желудка

Показатели крови

 

 

ФП

Состояние на момент поступления

Исследования после операции

3-е сутки

7-е сутки

11-е сутки

15-е сутки

Динамика функционального состояния эритроцитов

RBC х106/мкл

7,3±0,3

4,1±0,3

3,1±0,02

1,3±0,01

1,7±0,03

2,9±0,2

HGB, г/дл

16,2±0,6

8,2±1,4

7,1±0,3

6,6±0,3

6,9±0,3

9,7±1,6

HCT, %

48,6±2,2

24,6±2,3

33,6±1,6

18,1±3,1

11,7±2,3

18,1±3,1

MCV, фл

66,4±3,4

60,0±3,1

108,3±6,3

139,2±7,2

68,8±6,6

62,4±3,3

MCH, пг

22,2±1,7

20,0±3,3

22,9±3,1

50,7±2,6

40,5±3,2

33,4±1,6

MCHC, г/дл

33,3±2,2

34,1±5,1

21,1±4,1

36,4±3,4

59,0±3,6

53,6±3,3

RDW, %

12,7±0,3

18,8±3,3

10,0±2,2

14,8±1,3

16,4±1,4

13,2±1,3

COЭ, мм/ч

3,2±0,08

6,3±0,3

11,3±0,6

13,8±1,4

19,6±2,3

8,0±0,8

Динамика структурных изменений эритроцитов

Нормоциты

78,5±3,2

53,6±3,3

36,8±3,9

29,1±3,6

24,6±2,7

31,1±3,3

Микроциты

12,3±0,5

19,7±2,1

6,6±0,7

3,3±0,6

3,1±0,01

4,2±0,7

Макроциты

9,2±1,1

26,7±2,3

56,6±4,2

67,6±6,6

72,3±7,3

64,7±6,3

Дискоциты

88,6±3,3

73,2±3,1

69,7±3,7

51,5±3,6

41,6±3,6

49,6±3,6

Эхиноциты

7,5±0,8

9,8±0,8

18,9±3,3

26,1±3,1

21,3±3,6

16,6±3,1

Шизоциты

0

0,2±0,01

0,4±0,02

1,9±0,07

3,6±0,7

8,1±0,3

Монетные столбики

0

2,7±0,1

6,7±0,3

8,9±1,0

9,7±0,7

6,8±2,2

RBC с т Жолли

1,3±0,05

1,7±0,8

3,3±0,3

8,1±1,1

13,3±2,6

12,8±2,1

Примечание. Р≥0,05. ФП - Физиологический показатель

Концентрация гемоглобина (MCHC) увеличивалась на протяжении всего периода наблюдений, и наибольший ее показатель был на уровне 59,0±3,6 г/дл. Исследование RDW выявило снижение показателя на 3-и сутки после операции до 10,0±2,2%, к 7-м суткам данный показатель увеличился до 14,8±1,3%, а на 11-е- до 16,4±1,4%, а к 15-м суткам отклонение от среднего значения составило 13,2±1,3%. Следует отметить, что гипоксия в результате анемии и тяжелейшего токсического воздействия на организм может указывать на нарастание гемолитической анемии, при этом повышенное разрушение эритроцитов поддерживает гиперагрегацию, нарушение микроциркуляции и развитие осложнений [1]. Нами установлено, что скорость оседания эритроцитов на 3-и сутки составила 11,3±0,6 мм/ч, к 7-м увеличилась до 13,8±1,4 мм/ч, на 11-е сутки была на уровне 19,6±2,3 мм/ч, и к окончанию исследований скорость снизилась и составила 8,0±0,8 мм/ч.

Большой интерес представляет изучение динамических изменений поверхностей мембраны эритроцитов при различных шоковых состояниях в короткий промежуток времени. Наряду с изучением молекулярных механизмов изменения формы эритроцитов, большое значение для ветеринарной медицины имеет выявление и описание изменений формы эритроцитов, характерных для каждого патологическо­го процесса. В настоящее время многие специалисты признают важную роль изменений формы поверхностной мембраны эритроцитов в процессе межклеточного взаимодействия, являющегося основой агрегации [5]. Однако успехи в решении этого вопроса сдерживались отсутствием метода, позволяющего адекватно изучать форму эритроцитов в процессе их агрегации [3].

Структура эритроцитов собак при завороте желудка с операцией, выполненной в период 6-8 часов после заворота, показала, что количество нормоцитов на момент первичного приема было 53,6±3,3%, к 3-м суткам постоперационного периода составило 36,8±3,9%, в дальнейшем эта направленность имела волнообразную динамику, и к заключительному дню количественный показатель составил 31,1±3,3%. Количество микроцитов на момент первичного приема было на уровне 19,7±2,1%,в процессе наблюдений количественный показатель снижался, и на 15-е сутки их количество составило 4,2±0,7% (табл. 1). Количество макроцитов увеличивалось на протяжении 11 суток, где их содержание составило 72,3±7,3% при показателе первичного приема 26,7±2,3%. Аналогичной была динамика эхиноцитов, котораяпроявилась увеличением их количества к 11-м суткам (21,3±3,6%), а к окончанию наблюдений отмечено снижение их числа до 16,6±3,1%. Следует отметить, что изменение формы клетки можно объяснить агрегацией спектрина, вызванной кальцием, и связанным с этим изменением конфигурации и площади мембраны [5; 10].

Изменения формы эритроцитов могут иметь большое диагностическое значение и нести дополнительную информацию наряду с их количеством, цветовым показателем и концентрацией гемоглобина. В норме большая частьэритроцитов- это двояковогнутые диски, которые обладают высокой пластичностью и способностью быстро восстанавливать свою обычную форму после прохождения капилляров. Выполняя важные для организма функции (дыхательную, пластическую, транспортную, буферную), эти клетки должны одновременно обеспечивать и свой внутриклеточный метаболизм, поддерживать функциональную пригодность гемоглобина, функции и сохранность элементов в условиях постоянной угрозы аутоиммунного или осмотического лизиса. Противостоять такой угрозе клетка может благодаря активности цитолеммы, регулирующей обмен кислорода и углекислого газа, степень гидратации и электролитное равновесие, связывание антител и антигенов. Вместе с тем эритроциты относительно дефектны в связи с потерей функций, свойственных ядру и органеллам. Отсутствие ядер снижает возможности клеточной регенерации, устойчивость к изменениям экстрацеллюлярной среды и к воздействию ряда внешних физических факторов. Нарушения энергетических, иммунологических, осмотических, онкотических и реологических условий внутренней среды организма предъявляют повышенные требования к таким «функционально неполноценным» клеткам, а на субклеточном уровне - к их мембранному аппарату, нагрузки на который первоначально сказываются на форме клетки.

Изменения реологических свойств крови и структуры эритроцитов могут происходить в период развития катаболической фазы реакции организма на острое воспаление, когда отмечается интенсификация процессов катаболизма. Следует отметить, что изменение структуры эритроцитов, возможно, происходит под воздействием низкого уровня рН, а также под влиянием белков острой фазы. Изменения реологии крови усугубляют нарушения микроциркуляции, повышая угрозу ишемических повреждений органов, а вместе с этим на поверхности эритроцитарной мембраны могут адсорбироваться продукты метаболизма и иммунные комплексы, что позволяет рассматривать эритроциты и как неспецифические клетки иммунной системы [9]. Монетные столбики обнаружены на момент первичного приема в количестве 2,7±0,1%, в дальнейшем их процентное содержание возрастало, к 11-м суткам их число составило 9,7±0,7%, а в заключительный день отмечено их некоторое снижение до 6,8±2,2%. Этот процесс является агрегацией эритроцитов в виноградоподобные грозди. Истинная аутоагглютинация эквивалентна положительной реакции Кумбса и верный признак гемолитической анемии. Как аутоагглютинация, так и выраженные «монетные столбики» могут быть видимыми под микроскопом в пробирке. Образование «монетных столбиков» - это связывание эритроцитов в цепочки, напоминающие монеты. У собак в норме содержится незначительное количество «монетных столбиков»[10].

Анализ научной литературы показывает многообразие проблем, сопровождающих серьезность вопроса, при этом развитие структурных и функциональных нарушений в постоперационный периодпредставляет собой сложный каскад изменений, который требует не только всесторонней клинической оценки, но и понимания процессов, происходящих в системе крови, как основы успешной коррекции постоперационного состояния. При этом не достаточно внимания уделено эритробластическому ростку костного мозга, его структурному и функциональному состоянию при завороте желудка. Данная патология при неоказании лечения смертельна для животных, и развитие патологических процессов во времени демонстрирует необходимость скрупулезного изучения системы крови, так как по изменению ее показателей мы сможем осуществлять контроль над пред- ипостоперационным периодом, тем более что структурные изменения эритрона не изучены, нет в доступной литературе данных об изменениях пойкилоцитов и анизоцитов.

Таким образом, заворот желудка вызывает выраженные негативные сдвиги в динамике эритроцитов, при этом структура эритроцитов подвергается значительной деформации, снижается количество дискоцитов и нормоцитов, появляются такие клетки, как эхиноциты, шизоциты, большое количество монетных столбиков. Эти данные свидетельствуют о развитии сложной функциональной перестройки эритрона. Происходит увеличение разнородности эритроцитов при завороте, отмечены тяжелые изменения в эритроцитарном звене, налицо все признаки геморрагической и гемолитической анемии. Увеличивается количество эритроцитов с тельцами Жолли. Пойкилоцитоз нарастает прямо пропорционально времени от начала заворота, и наибольшее количество приходится на 7-11-е сутки.

Рецензенты:

Позябин С.В., д.вет.н., профессор кафедры ветеринарной хирургии ФГБОУ ВПО «Московская государственная академия ветеринарной медицины им. К.И. Скрятина», г. Москва;

Ватников Ю.А., д.вет.н., профессор, зав. кафедрой клинической ветеринарии Российского университета дружбы народов, г. Москва.


Библиографическая ссылка

Сазонова В.В., Боженова Е.Ю. ДИНАМИКА ЭРИТРОЦИТОВ В ПОСЛЕОПЕРАЦИОННЫЙ ПЕРИОД ПРИ ЗАВОРОТЕ ЖЕЛУДКА У СОБАК // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 1-1.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=18697 (дата обращения: 07.03.2021).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074