Введение
Преждевременный разрыв околоплодных оболочек является одной из ведущих проблем современного акушерства, многие аспекты которой в значительной степени остаются неразрешенными. Установлено, что дородовое излитие околоплодных вод в 30-56 % случаев является причиной преждевременного прерывания беременности [1, 7]. В последние годы особую значимость приобрела проблема отхождения околоплодных вод при сроках гестации 22-34 недели. В этот период отсутствует готовность родовых путей к родам, что влечет за собой длительные затяжные роды и, соответственно, страдание плода и матери. В то же время в связи с незрелостью легочной ткани у недоношенных детей развивается респираторный дистресс-синдром, при этой патологии недоношенные дети находятся длительно на искусственной вентиляции легких (ИВЛ) с последующими неблагоприятными исходами. В этой группе недоношенных детей высока перинатальная и ранняя неонатальная смертность [4, 5].
В связи с вышеизложенным очевидна необходимость патогенетического обоснования тактики ведения беременных с преждевременным отхождением околоплодных вод в сроках гестации 22-34 недели и соответственно выявление объективных высокоинформативных критериев прогнозирования преждевременного разрыва околоплодных оболочек.
В настоящее время широко изучаются иммунологические аспекты невынашивания беременности. По мнению многих исследователей, модифицированная иммунореактивность материнского организма, безусловно, находит отражение в нарушениях цитокинового профиля крови и, соответственно, в изменениях аутокринных, паракринных и системных влияний цитокинов на маточно-плацентарный кровоток, гормональный баланс, формирование плода [8, 11, 12].
В процессе развития беременности материнский организм подвергается антигенной стимуляции со стороны плода, что особенно значимо при гипоксии, внутриутробном инфицировании и других стрессорных ситуациях, когда возникает резкое повышение проницаемости фетоплацентарного барьера, усиление экспрессии антигенов гистосовместимости MHC I и II классов на трофобласте с последующим развитием реактивных сдвигов со стороны моноцитарно-макрофагальной, лимфоидной и эндотелиальной систем матери, плаценты, плода.
При физиологической беременности клетки цитотрофобласта не экспрессируют антиген главного комплекса гистосовместимости и являются иммунодифферентными. По данным литературы, децидуальная оболочка при физиологически протекающей беременности секретирует цитокины Th2-типа (IL-4, IL-5, IL-10) [10].
Исследования последних лет показали, что изменения иммунитета в системе «мать - плацента - плод» возникают на фоне воспалительных процессов гениталий, таких как хронический эндометрит, цервицит, сальпингоофорит, сочетающихся нередко с внутриутробным инфицированием плода. Манифестными проявлениями указанных форм патологии являются изменения субпопуляционного состава лимфоцитов, дисбаланс цитокинов в периферической крови. Активация иммунных реакций со стороны матери может приводить к нарушению процессов плацентации, инвазии и развитии хориона и, в конечном итоге, к прерыванию беременности [2, 6].
До настоящего момента не систематизированы сведения о патогенетической взаимосвязи нарушений цитокинового профиля крови и дородового излития околоплодных вод, не установлены возможности прогнозирования преждевременного прерывания беременности на основе мониторинга показателей цитокинового профиля крови.
Цель исследования - изучение особенности продукции противовоспалительных цитокинов IL-4, IL-10, а также IL-2, инициирующего развитие реакций гуморального или клеточного типа в зависимости от специфики структуры антигена при беременности, осложненной преждевременным отхождением околоплодных вод при сроках гестации 22-34 недели.
Материалы и методы исследования
В основную группу исследования были включены 50 пациенток, поступивших в отделение патологии беременности Перинатального центра Саратовской области, беременность которых осложнилась преждевременным отхождением околоплодных вод при сроке гестации 22-34 недели. Контрольную группу составили 20 женщин с физиологически протекающей беременностью с аналогичными сроками гестации.
В обеих группах был исследован цитокиновый профиль в сыворотке крови. Уровень цитокинов IL-2, IL-4, IL-10 сыворотке крови определяли методом "сэндвич"-варианта твердофазного иммуноферментного анализа с помощью тест-систем производства ЗАО «Вектор-Бест» (Новосибирск, Россия).
Математическую обработку полученных результатов проводили методом параметрической статистики на персональном компьютере с использованием программы «Statistica 6.0».
Результаты исследования и их обсуждение
Прежде всего, было изучено содержание в крови пациенток IL-2. Как известно, IL-2 -Т-клеточный фактор роста с Мм 15 кД, играет важную роль в механизмах иммунного ответа организма, продуцируется преимущественно Th-1, а также дендритными клетками [3, 16].
Проведенные нами исследования содержания IL-2 в крови при физиологическом течении гестационного периода свидетельствовали о возможности индуцибельного синтеза этого цитокина, на что указывало наличие определяемого и достаточно высокого уровня этого цитокина в крови.
В группе беременных с дородовым излитием околоплодных вод содержание IL-2 в крови достоверно возрастало. Анализируя значимость этого феномена, следует отметить, что IL-2 в основном обеспечивает процессы дифференцировки и пролиферации Т-лимфоцитов, а также повышает митотическую активность NK-клеток, моноцитов, тканевых макрофагов, лимфоцитов, в меньшей степени стимулирует В-систему лимфоцитов. Причем продукция IL - 2 является индуцибельной, покоящиеся лимфоциты не экспрессируют ген IL - 2. В связи с этим выявленный нами факт возрастания уровня IL-2 на фоне дородового излития околоплодных вод свидетельствует, по всей вероятности, об активации клеточно-опосредованных иммунных реакций в системе «мать - плацента - плод».
Таблица 1
Уровень цитокинов в крови беременных с преждевременным отхождением околоплодных вод
Уровень цитокинов в крови (пг/мл) |
Группа контроля (пациентки с физиологически протекающей беременностью) |
Основная группа (беременные с дородовым излитием околоплодных вод при сроке 22-34 недели гестации) |
|||
n |
M ± m |
n |
M ± m |
P |
|
IL-2 |
20 |
0,072±0,01
|
50 |
1,34±0,03 |
<0,001. |
IL-4 |
20 |
5,04±0,30
|
50 |
3,7±0,28 |
<0,01 |
IL-10 |
20 |
3,37±0,3
|
50 |
1,8± 0,2 |
<0,001 |
Примечание. Р рассчитано по отношению к показателям группы пациенток с физиологически протекающей беременностью в аналогичные сроки гестации.
Целью последующих исследований явилось определение содержания IL-4 в крови беременных с указанной гестационной патологией. Результаты проведенных исследований свидетельствовали о том, что уровень IL-4 в крови беременных с дородовым излитием околоплодных вод снижался, что соответствует данным литературы [1].
Как известно, IL-4, или В-клеточный фактор роста, продуцируется Th-2, а также макрофагами, клетками стромы, тучными клетками. IL-4 является антагонистом IL-1, IL-6, TNF-α, усиливает экспрессию МНС-1 и МНС-2, усиливает пролиферацию NK-клеток, Т-лимфоцитов, В-лимфоцитов, усиливает синтез иммуноглобулинов, обеспечивает подавление реакций клеточного иммунитета [3, 14].
Предметом дальнейших исследований явилось определение IL-10 в крови беременных с указанной гестационной патологией. Семейство IL - 10 включает несколько сходных по структуре цитокинов, в частности IL - 19, IL - 20, IL - 22, IL - 24, IL - 26, неповторяющих полностью биологические эффекты друг друга [3].
Как известно, IL-10 вырабатывается клетками Th-0, Th-1, Th-2 типа, СD 8+ Т лимфоцитами, тучными клетками, моноцитами, цитотоксическими клетками, является иммуномодулятором широкого спектра действия, тормозит секрецию активированными моноцитами IL-1β, IL-6, TNF-α, в то же время стимулирует пролиферацию В-лимфоцитов, IgA, IgM, IgE, усиливает экспрессию антигенов МСН-2 [9].
IL - 10 подавляет синтез провоспалителдьных цитокинов, свободных радикалов кислорода, является антагонистом IL - 12, IL - 2, TNFα, IFNγ, подавляет процессы киллинга в макрофагах [13, 17].
Как показали проведенные нами исследования, содержание IL-10 в крови беременных с дородовым излитием околоплодных вод резко снижалось, что свидетельствовало о развитии дисрегуляции в лимфоидной и моноцитарно-макрофагальной системах маточно-плацентарно-плодового комплекса в условиях срыва иммунологической толерантности матери против антигенов плода.
Выводы
1. Закономерными сдвигами цитокинового профиля крови при беременности на фоне дородового излития околоплодных вод в сроки гестации, составляющие 22-34 недели беременности, являются возрастание уровня IL-2 при одновременном снижении содержания IL-10, IL-4, что свидетельствует о необходимости мониторинга содержания этих цитокинов в крови для прогнозирования развития беременности.
2. Дисбаланс уровня цитокинов IL-2, IL-4, IL-10 в сроки гестации, равные 22-34 неделям, при абсолютном возрастании в крови IL-2 свидетельствует о срыве иммунологической толерантности матери против антигенов плода, нарушении аутокринных и паракринных взаимодействий в моноцитарно-макрофагальной и лимфоидной системах матери, плаценты, плода.
Рецензенты:
Рогожина И. Е., д-р мед. наук, доцент кафедры акушерства и гинекологии ФПК ППС ГБОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В. И. Разумовского» Минздрава РФ, г. Саратов.
Андронов Е. В., д-р мед. наук, профессор кафедры нормальной физиологии им. И. А. Чуевского ГБОУ ВПО «Саратовский ГМУ им. В. И. Разумовского» Минздрава РФ, г. Саратов.