Молочное скотоводство одна из самых сложных отраслей животноводства и его успешное развитие определяется многими факторами, кроме того в последнее время в России взят курс на крупные молочно-товарные фермы и молочные комплексы закрытого типа. Интенсификация животноводства и высокий уровень распространенности инфекционных и неинфекционных заболевании приводят к развитию различных патологических процессов, в основе которых лежат изменения гомеокинеза, регулируемого иммунной системой, что обусловливает развитие дисфункциональных процессов, приводящих к развитию первичных и вторичных иммунодепрессивных состояний. Кроме того, эти изменения могут усугубляться в динамике течения патологического процесса, вызванного различными этиологическими факторами. Одной из основных причин, сдерживающих реализацию продуктивного потенциала популяции молочных коров, является нарушение их воспроизводительной функции, которая регистрируется в виде абортов, мертворождаемости, патологии родового акта в форме задержания последа, послеродовыми и хроническими заболеваниями половых органов [1, 2, 4, 5, 6].
Истоки возникновения эндометрита у большинства продуктивных животных закладываются задолго до родов и являются следствием очень сложного комплекса многочисленных факторов. В связи с этим терапия и профилактика послеродовых осложнений у коров должны носить комплексный характер, включать в себя эффективные средства этиотропного, патогенетического и симптоматического воздействия, способствующие купированию воспалительного процесса и восстановлению поврежденных тканей матки не только после родов, но в период беременности [8,9, 10]. Микробиоценоз организма коровы, в том числе и ее половой сферы, определяется уровнем ее иммунного статуса во время беременности. Эндометрит, как правило, проявлялся уже в первые дни после родов, даже при отсутствии родовспоможения, и сопровождался признаками субинволюции матки [8].
Даже в условиях современной интенсивно развивающейся фармакологической промышленности в комплексе мероприятий по борьбе с воспалительными заболеваниями матки чаще всего используются традиционные средства терапии, включающие антибиотики, сульфаниламиды, нитрофураны и другие химиотерапевтические средства. Не стоит забывать, что в конечном итоге такая этиотропная и патогенетическая терапия приводит к контаминации животноводческой продукции сульфаниламидами, нитрофуранами, антибиотиками, гормонами и другими препаратами, что может привести к развитию токсикозов, аллергических реакций и дисбактериозов у человека [3, 8].
Поэтому наиболее приемлемой альтернативой использования широко применяемых в настоящее время в ветеринарной гинекологии антимикробных препаратов является использование современных экологически безопасных поликомпонентных средств из биологического сырья эмбрионального происхождения.
В качестве такого иммуномодулятора нового поколения был использован препарат «НИКА-ЭМ», предложенный и разработанный коллективом ученых Ставропольского государственного университета, Южного научного центра РАН и ООО НПО «БиоМодуль».
Таким образом, проблема коррекции иммунного статуса и репродуктивных качеств коров посредством использования иммуномодулятора нового поколения в условиях современного промышленного животноводства является актуальной.
Целью исследований являлась разработка схемы иммуннокоррекции для профилактики осложнений послеродового периода у коров. Задачами исследований являлось изучение уровня неспецифической реактивности и фагоцитарной активности у коров до и после опыта, а так же состояния репродуктивных органов.
Работа выполнена в течение 2014 года на кафедре терапии и пропедевтики ФГБОУ ВПО «Донской государственный аграрный университет», лаборатории «Молекулярной диагностики и биотехнологии» ДГАУ. Научно-производственные опыты, апробация и производственные испытания были проведены в ООО «Учхоз «Донское» Октябрьского района Ростовской области.
Для проведения эксперимента были подобраны 2 группы животных: опытная и контрольная по 15 голов коров на последнем месяце стельности.
Коровам опытной группы вводили препарат «НИКА-ЭМ» подкожно в дозе 0,05 мл на кг массы (в среднем 15-20 мл на животное) трижды, с интервалом 7 дней за месяц до отела. Животным контрольной группы вводили подкожно физиологический раствор в этом же объеме.
С целью контроля течения послеродового периода осуществляли клинические наблюдения за животными опытных и контрольных групп в первые дни после родов, на 7–8 сутки после отёла ректальное и вагинальное исследования коров с патологическими родами, ректальное и вагинальное исследование всех коров опытных и контрольных групп на 12–14 день после отёла.
Образцы крови у коров опытной и контрольной групп брали трижды до начала опыта, после родов и через месяц после родов. В крови определяли содержание эритроцитов, лейкоцитов, концентрацию гемоглобина, цветовой показатель на автоматическом ветеринарном гематологическом анализаторе РСЕ -90 VET. Для изучения морфологического состава периферической крови мазки окрашивали по методу Павловского. Оценку уровня неспецифической резистентности организма коров осуществляли путем выведения следующих лейкоцитарных индексов: индекс соотношения лимфоцитов и сегментоядерных нейтрофилов (ЛНс), индекс сдвига лейкоцитов (ИСЛ); лимфоцитарно-гранулоцитарный индекс (ИЛГ); индекс соотношения нейтрофилов и лимфоцитов (ИСНЛ); индекс соотношения нейтрофилов и моноцитов (ИСНМ); индекс соотношения лимфоцитов и моноцитов (ИСЛМ); индекс соотношения лимфоцитов и эозинофилов (ИСЛЭ). Для определения функциональной активности нейтрофилов крови использовали реакцию восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-тест по А.Н.Маянскому и др., 1979).
В результате проведения гематологических исследований до опыта было установлено, что у коров опытной группы морфологические показатели крови соответствовали физиологическим показателям 8-ми месячной стельности (табл. 1), а у коров контрольной группы наблюдался незначительный лейкоцитоз.
Таблица 1
Динамика морфологических показателей крови у коров
Показатели |
Группы животных |
|||||
Опытная |
Контрольная |
|||||
До опыта |
После отела |
На 28-й день после отела |
До опыта |
После отела |
На 28-й день после отела |
|
Эритроциты, х1012 /л |
6,2±0,18 |
6,3±0,2 |
6,89±0,45 |
6,46±0,62 |
6,8±0,7 |
9,08±0,30** |
Гемоглобин, г/л |
102±4,72 |
105±4,5 |
111,4±5,1 |
103,2±3,47 |
103,0±3,5 |
103,6±6,32 |
Лейкоциты, х109 /л |
10,14±1,51 |
10,5±1,6 |
12,25±2,5 |
14,58±1,93 |
12,8±1,8 |
9,74±1,76 |
Гематокрит,% |
31,32±0,91 |
31,5±0,9 |
34,46±1,21 |
32,32±1,23 |
32,5±1,3 |
33,04±1,56 |
Лейкограмма, % |
||||||
базофилы |
0,56±0,09 |
0,6±0,09 |
0,3±0,07* |
0,1±0,01 |
0,1±0,01 |
0,1±0,01 |
эозинофилы |
8,93±0,92 |
8,9±0,92 |
8,54±0,90 |
3,0±0,84 |
2,0±0,4 |
1,2±0,95 |
юные нейтрофилы |
1,22±0,20 |
1,0±0,20 |
0,19±0,13 |
0,1±0,01 |
0,2±0,01 |
0,1±0,01 |
палочкоядерные нейтрофилы |
4,89±0,59 |
4,85±0,6 |
3,82±0,62 |
0,2±0,13 |
5,2±0,1** |
6,6±1,4** |
сегментоядерные |
22,39±1,19 |
22,42±1,1 |
23,97±1,35 |
30,2±3,42 |
35,3±3,2 |
38,0±4,12 |
лимфоциты |
57,83±2,25 |
55,53±2,3 |
55,72±5,74 |
62,2±4,59 |
50,8±3,9* |
47,0±4,97* |
моноциты |
4,17±0,75 |
6,7±0,75 |
7,46±1,0* |
4,4±1,0 |
6,4±1,0* |
7,0±1,3* |
Примечание: * - Р< 0,05; ** - Р< 0,01; *** - Р< 0,001
После отела показатели крови у коров опытной группы были в пределах физиологических колебаний, а у коров контрольной группы наблюдалась тенденция развития нейтрофильного лейкоцитоза. После опыта было установлено, что у коров опытной группы отмечалось незначительное повышение уровня гемоглобина на 9,4 г/л; лейкоцитов – на 2,11х109/л, что соответствовало верхнему пределу физиологических колебаний, показатели лейкоцитограммы находились в пределах физиологических колебаний.
У коров контрольной группы после проведения эксперимента были отмечены следующие изменения в морфологических показателях крови: повышение уровня физиологических колебаний эритроцитов на 2,62х1012/л и тромбоцитов – на 405х109/л; нормализация уровня лейкоцитов до 9,74±1,76х109/л. В результате изучения лейкоцитограммы был установлен нейтрофильный лейкоцитоз с дегенеративным сдвигом, причем уровень лимфоцитов находился на нижних пределах физиологических колебаний, что свидетельствовало о развитии острого воспалительного процесса в организме животных контрольной группы (табл. 1).
Уровень неспецифической резистентности периферической крови до проведения эксперимента у коров опытной группы характеризовался следующим уровнем лейкоцитарных индексов: ЛНс - 2,7±0,27; ИСЛ - 0,62±0,05; ИЛГ - 15,89±1,6; ИСНЛ - 0,49±0,01; ИСНМ - 8,75±1,5; ИСЛМ - 20,26±4,2; ИСЛЭ - 7,73±1,5 , а в контрольной группе лейкоцитарные индексы равнялись: ЛНс - 2,57±0,54; ИСЛ - 0,55±0,01; ИЛГ - 24,5±5,54; ИСНЛ - 0,55±0,09; ИСНМ - 10,19±1,67; ИСЛМ - 29,66±9,56; ИСЛЭ - 22,1±8,46, таким образом, показатели неспецифической резистентности у обеих групп были в пределах физиологических колебаний, хотя из-за относительного лейкоцитоза у коров контрольной группы индексы ИЛГ, ИСЛМ и ИСЛЭ были выше (Рис. 1).
Рис. 1. Уровень лейкоцитарных индексов периферической крови у коров до опыта.
После отела у коров опытной группы наблюдалась тенденция снижения уровня индексов неспецифической резистентности ИСНЛ, ИСНМ, а у коров контрольной группы - ИЛГ, ИСЛМ, что свидетельствовало о низком уровне неспецифической резистентности у коров контрольной группы и возможности развития воспалительного процесса в послеродовой период.
Интегральные показатели периферической крови у коров опытной группы после проведения эксперимента характеризовались снижением ИСНЛ, ИСНМ, что свидетельствовало о повышении уровня неспецифической резистентности организма коров (Рис. 2), изменения других индексов были не достоверны. У коров контрольной группы после опыта наблюдалось снижение уровня ИЛГ, ИСЛМ и повышение уровня ИСЛЭ и ИСНЛ, что подтверждало развитие острого воспалительного процесса в организме.
Рис. 2. Уровень лейкоцитарных индексов периферической крови у коров после опыта.
Показатели НСТ-тета у коров обеих групп до проведения эксперимента были в пределах физиологических колебаний (табл. 2).
Таблица 2
Уровень функциональной активности нейтрофилов у коров
НСТ-тест (у.е.): |
||||||
Спонтанный |
32,6±2,74 |
62,8±1,4 |
165,6±1,9** |
52,8±7,14 |
42,3±5,4 |
14,4±3,56** |
Стимулирован-ный |
47,6±1,7 |
87,5±1,9 |
184,4±1,3** |
74,6±10,51 |
64,6±8,25 |
58,8±5,7 |
Индекс стимуляции |
1,51±0,19 |
1,39±0,19 |
1,12±0,2 |
1,41±0,07 |
1,53±0,03 |
4,14±0,2** |
Примечание: * - Р< 0,05; ** - Р< 0,01; *** - Р< 0,001
После отела у коров контрольной группы наблюдалось снижение показателей НСТ-теста: спонтанный НСТ-тест - 42,3±5,4; стимулированный НСТ-тест - 64,6±8,25; индекс стимуляции - 1,53±0,03, что указывало на развитие воспалительного процесса инфекционной этиологии и снижение уровня резистентности организма животных.
После завершения эксперимента у коров опытной группы показатели НСТ-теста характеризовались достоверным увеличением спонтанного НСТ-теста - 165,6±1,9; стимулированного НСТ-теста - 184,4±1,3; индекса стимуляции - 1,12±0,2, что подтверждало высокий уровень функциональной активности нейтрофилов.
У коров контрольной группы по сравнению с показателями опытной группы аблюдалось достоверное уменьшение спонтанного НСТ-теста – на 91,3%; стимулированного НСТ-теста – на 68,3 %, и увеличение индекса стимуляции на 269,6%, что обусловлено усугублением течения острого воспалительного процесса и низким уровнем резистентности организма.
При проведении клинико-акушерского исследования коров опытной группы в первые двое суток послеродового периода было установлено нормальное течение послеродового периода, а у 5 коров контрольной группы регистрировались симптомы острого послеродового эндометрита. В результате проведенных клинико-акушерских исследований было установлено, что у 33,3 % коров контрольной группы отмечался острый послеродовой эндометрит.
Таким образом, применение нового биологически активного препарата с системным иммуномодулирующим и лечебно-профилактическим действием на основе регионального экологически чистого сырья животного растительного и микробного происхождения в период стельности и после родов способствует повышению уровня неспецифической резистентности организма коров, а так же фагоцитарной активности нейтрофилов, что позволяет снизить риск развития осложнений послеродового периода острого послеродового более чем на 30% .
Рецензенты:
Виноходов В.В., д.в.н., профессор кафедры разведения с/х животных и зоогигиены ФГБОУ ВПО «Донской государственный аграрный университет», п. Персиановский;
Душкин Е.В., д.б.н., доцент кафедры терапии и пропедевтики ФГБОУ ВПО «Донской государственный аграрный университет», п. Персиановский.