Scientific journal
Modern problems of science and education
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,813

GENETIC BACKGROUND OF SALPINGOOPHORITIS DEVELOPMENT IN PUBERTAL AGE GIRLS

Gumennaya E.Yu. 1
1 Bukovinian State Medical University
Целью данного исследования был анализ связи полиморфизма гена 511C/T IL-1β с специфическими и неспецифическими сальпингоофоритами у девочек подростков (12–18лет). Полиморфизм IL-1β 511C/T гена определялся с помощью полимеразной цепной реакции у 88 пациентов с сальпингоофоритами и у 31 здоровой девочки. У пациентов с неспецифическими сальпингоофоритами Т-аллель в 4.99 раза чаще встречается в сравнении с СС-генотипом. Наличие ТТ-аллели или ТТ-генотипа гена IL-1β увеличивает риск развития воспалительных заболеваний придатков матки независимо от специфичности у девочек пубертатного возраста (особенно в возрасте от 15–18 лет) в 1.54-2.58 раз [OR=2.34-4.17, OR 95 % CI=1.07-12.6 p≤0.032-0.002]. С-аллели или СС-генотип несут защитную роль, и вероятность развития воспаления придатков матки резко снижается, особенно неспецифических сальпингоофоритов [OR = 0.28-0.43, p≤0.022- 0.001]. Итак, полиморфизм Т-аллели гена C-511T IL-1β есть один из определяющих факторов развития воспаления придатков матки у девочек пубертатного возраста.
The aim of the study was to analyze the association of 511C/T polymorphism of IL-1β gene (rs16944) with specific and nonspecific salpingoophoritis in juvenile girls (12–18 years). The IL-1β 511C/T gene polymorphism was analyzed by means of polymerase chain reaction in 88 patients with salpingoophoritis and 31 healthy individuals. Among patients with nonspecific salpingoophoritis T-allele frequency dominates the CC-genotype by 4.99 times. The presence of T-allele or TT genotype of IL-1β gene increases a predisposition risk for adnexal inflammation, regardless of their specificity, in girls of pubertal age (especially at the age of 15-18) by 1.54-2.58 times [OR=2.34-4.17, OR 95% CI=1.07-12.6 p≤0.032-0.002]. C-allele and CC genotype play a protective role and show the lowest probability of adnexal inflammation, especially nonspecific salpingoophoritis [OR = 0.28-0.43, p≤0.022- 0.001]. Thus, T-allele of IL-1β gene C-511T polymorphism is associated with adnexa inflammation in girls at the age of puberty.
juvenile girls
salpingoophoritis
IL-1β gene 511C/T
Воспалительные заболевания тазовых органов у девочек-подростков являются одной из важных проблем акушерства и гинекологии. В их числе сальпингоофориты занимают одно из первых мест. Несвоевременная диагностика и лечение острого воспаления придатков у девочек пубертатного возраста являются ключевыми причинами нарушения менструального цикла, частых рецидивирующих обострений, хронического болевого синдрома, бесплодия в будущем, эндокринных и иммунологических изменений. Комплекс причин развития воспаления придатков у девочек-подростков включает как специфические, так и неспецифические факторы, в том числе и генетические.

Отдельные генетические полиморфизмы модифицируют влияние факторов окружающей среды на организм (курение, стрессы, качество и стиль питания, радиационный фон, загрязнение атмосферы, воды и другие), которые потенциально играют важную роль в смене генной экспрессии и соответственно унаследовании рисков [1-6]. Именно поэтому изучение генетики воспаления придатков у девочек пубертатного возраста приобретает важное медицинское значение сегодня.

Генетически обусловленная дисрегуляция воспалительного ответа в зоне поражения может быть последствием точечной мутации генов семейства интерлейкинов (IL) [7; 8].

Активность продукции IL-1 закодирована двумя отдельными генами: интерлейиін-1-альфа (IL-1α) и интерлейкин-1 бета (IL-1β), размещённых в локусе хромосомы 2q14 (q13-21), в кластере какого также имеется ген антагониста рецептора IL-1 (IL-1Ra) [9; 10]. Функцией последнего является антагонизм рецептора IL-1 и блокада биологических эффектов IL-1α и IL-1β соответственно. В такой способ гены цитокинов регулируют характер иммунного ответа и активность воспалительных реакций организма в ответ на эндогенные и экзогенные факторы. Наиболее выучены биаллельные полиморфизмы IL-1β в позициях -511, -31 и +3954, что есть однонуклеотидными транзициями [11].

Клинический интерес имеет точечная мутация в 511-й позиции промотора гена IL-1β . Доказано, что полиморфные варианты данного гена высокоактивны в отношении продукции одноименного цитокина. У гомо- и гетерозиготных лиц за мутантным аллелем гена IL-1β продуцируется соответственно в 4 и 2 раза больше данного цитокина, чем у гомозигот за «диким» аллелем этого гена [12], наличие Т-аллели ассоциирует с тяжелым протеканием эндометриоза [8], язвенной болезни и эффективностью терапии [13], хроническим обструктивным заболеванием легких [14], высоким риском почечной недостаточности [15], хроническим и гнойным протеканием синуситов у детей [12].

Поскольку -511С/Т-полиморфизм гена ІЛ-1β (id.: rs16944) имеет важную роль в работе иммунной системы и может быть одной из главных причин генетически обусловленной дисрегуляции воспалительного ответа и возможной чувствительности к антибактериальной терапии, посчитали за необходимость провести анализ -511С/Т-поліморфізму гена ІЛ-1β (id.: rs16944) в структуре больных на сальпингоофориты девочек раннего (12-14 лет) и позднего (15-18 лет) подросткового возраста и определить его влияние на развитие специфического или неспецифического воспаления придатков.

Цель исследования

Анализ связи полиморфизма гена 511C/T IL-1β с специфическими и неспецифическими сальпингоофоритами у девочек подростков (12-18лет).

Материалы и методы

В исследовании приняли участие 95 больных на обостренные хронические сальпингоофориты, девочки-подростки 12-18 лет, что проходили стационарное лечение в гинекологическом отделении родильного дома № 1 г. Черновцы в 2011-2013 годах. У родителей несовершеннолетних взято письменное согласие на участие детей в клиническом исследовании.

Отбор пациенток, постановка диагноза, распределение по группам проводили согласно критериям и классификациям отечественного, международных обществ акушерства и гинекологии (International Societies of Obstetrics&Gynecology, European Society of Gynecology), а также действующих приказов МОЗ Украины [16-18].

Этап скрининга прошли 88 девочек-подростков с обострением хронических сальпингоофоритов. Среди пациентов 59,1 % (52) - с специфичным сальпингоофоритом, 40,9 % (36) - с неспецифическим сальпингоофоритом, 34,1 % (30) девочки 12-14 лет, 65,9 % (58) девочек 15-18 лет. Контрольную группу составили здоровые девочки-подростки (n=31) соответственного возраста: 12-14 лет - 32,3 % (10) лиц, 15-18 лет - 67,7 % (21) лиц соответственно (р> 0,05).

Всем больным проведен комплекс обследований: общеклинические, гинекологические, лабораторные, инструментальные (УЗИ органов малого таза).

Для исследования -511 (C/T)-полиморфизма гена IL-1β выделили ДНК из лимфоцитов периферической венозной крови пациентов с помощью набора реагентов «ДНК-сорб-В» (Россия). ПЛР-реакцию проводили с использованием Taq-ДНК-полимеразы и специфических праймеров (прямого 5′-TGG CAT TGA TCT GGT TCA TC -3′ и обратного 5′- GTT TAG GAA TCT TCC CAC TT-3) [19].

Статистическую обработку проводили с помощью прикладных программ Statistica® 7.0 (StatSoftInc., США). Анализ качественных признаков проводили за критерием c2 (при частотах менше 5 - точный тест Фишера). Определяли соответствие распределения генотипов в популяции равновесия Харди - Вайнберга. Влияние факторов развития сальпигоофоритов оценивали за величиной относительного риска (RelR), отношение рисков (RR) и отношение шансов (OR) с 95 % доверительным интервалом [95 % CI] с учетом критерия c2(df = 1), использовали модель логистической регрессии. Разницу считали вероятной при р< 0,05.

Результаты

Распределение генотипов С-511Т - полиморфизма гена IL-1β свидетельствует вероятное преобладание благоприятного СС-генотипа у лиц контрольной группы у 2,04 раза (c2 = 5,49, p = 0,019) без существенных отличий в частоте наблюдения промежуточного генотипа (р> 0,05) (таблица 1). Мутантные ТТ-гомозиготы чаще определяли у лиц основной группы в 2,33 раза c2( = 6,59, p = 0,01). Относительная частота анализированных генотипов у лиц 12-14 и 15-18 лет, как в контрольной группе, так и в основной группе вероятно не отличалась. Но соотношение С:Т- аллелей у девочек-подростков, болеющих сальпингоофоритом, 15-18 лет преобладала в пользу мутантного Т-аллели 44:72 (c2 = 6,39, p = 0,041), при невероятной диспропорцийности у пациенток 12-14 лет - 22:38 (c2 = 4,95, p = 0,085). При этом ТТ-генотип у девочек 12-14 лет выявляли в 2,33 раза чаще, чем СС-генотип (c2 = 4,80, p = 0,028), аналогично у подростков 15-18 лет ТТ-генотип регистрировали в 2,16 раза чаще, чем СС-вариант (c2 = 7,67, p = 0,006) соответственно.

Таблица 1

Распределение генотипов С-511Т-полиморфизма гена IL-1β у девочек пубертатного возраста

Генотипыгена IL-1β

Группы обследования, n (%)

c2

Р

Пациенты,

n=88 (%)

Контроль,n=31 (%)

OR [95% CI]

1

СС-генотип,

n=31 (%)

18 (20,5)

13 (41,9)

0,36

[0,15-0,86]

c2=5,49 p=0,019

2

ТС-генотип, n=42 (%)

30 (34,1)

12 (38,7)

0,82

[0,35-1,91]

c2<1,0 p>0,05

3

ТТ-генотип,n=46 (%)

40 (45,4)

6 (19,5)

3,47

[1,30-9,30]

c2=6,59 p=0,01

У больных подростков распределение частот генотипов за полиморфизмом С-511Т-вариантом гена IL-1β соответствует ожидаемому равновесию Hardy-Weinberg с невероятной тенденцией к гетерозиготному дефициту (F = 0,25-0,28, р> 0,05), что не повлияло на нормальность популяционного распределения в обследуемой популяции (таблица 2).

Таблица 2

Аллельное состояние С-511Т полиморфизма гена IL-1β и гетерозиготность у девочек пубертатного возраста

Группы

Алели, n (%)

РС

РТ

НО

НЕ

F

c2

Р

С

Т

Основнаягруппа, n=176

66 (37,5)

110 (62,5)

0,38

0,62

0,34

0,47

0,27

3,51

0,06

Контрольнаягруппа, n=62

38 (61,3)

24 (38,7)

0,61

0,39

0,39

0,47

0,18

1,31

0,25

Всего, n=238

104 (43,7)

134 (56,3)

0,44

0,56

0,35

0,49

0,28

3,75

0,053

Примичание:

1. Рс - относительная частота Салеля; Рт - относительная частота Т алеля.

2. Н0 - фактическая гетерозиготность; НЕ - ожидаемая гетерозиготность; F - коэффициент инбридингу (относительное отклонение частот генотипов от панмиксии).

3. c2p - критерий справедливости «нулевой» гипотезы между фактической и ожидаемой гетерозиготностью.

4. n (%) - количество (процент) наблюдений.

Благоприятный СС-генотип наблюдали у каждого пятого подростка с сальпингоофоритами (20,5 %) и почти у каждого второго (41,9 %) группы контроля. Промежуточный гетерозиготный СТ-вариант регистрировали почти у каждой третьей девочки (34,7 % в основной группе, 38,7 % у здоровых). «Неблагоприятный» ТТ-генотип выявлен почти у половины лиц основной группы (45,4 %) и только у каждого пятого здорового подростка (19,4 %).

Распределение генотипов С-511Т полиморфизма гена IL-1β в приделах каждой возрастной группы с учетом специфичности воспалительного процесса наведены в таблицы 3. Вероятных различий в дистрибуции аллельных вариантов анализируемого гена IL-1β в возрасте девочек 12-14 лет не установлено. У пациенток 15-18 лет при специфичном воспалении также существенных изменений не выявлено, причём при неспецифическом воспалении преобладал мутантный Т-аллель - 32-й (72,7 %) над 12-м (27,3 %) С-аллелям (χ2 = 10,4, р = 0,006). СС-генотип часто наблюдался у подростков с неспецифическим сальпынгоофоритом 12-14 лет в 2,29 раза (χ2 = 5,94, р = 0,048), тогда как у девочек 15-18 лет наоборот: гомозиготный С-вариант чаще встречался при наличии специфического воспаления в 3,06 раза (χ2 = 7,11, р = 0,038) (табл. 3).

Специфичные сальпингоофориты чаще встречались у девочек-носителей СС-генотипа в возрасте 15-18 лет в 2,22 раза, чем у таких 12-14 лет (χ2 = 5,88, р = 0,049). Неспецифические сальпингоофориты, наоборот, встречались реже у владелец данного генотипа в возрасте 15-18 лет в 3,15 раза, чем у подростков из аналогичного генотипа 12-14 лет (χ2 = 7,22, р = 0,031).

Таблица 3

Дистрибуция генотипов С-511Т полиморфизма гена IL-1β у девочек пубертатного возраста больных сальпингоофоритом с учетом специфичности воспаления в зависимости от возраста обследуемых.

Больные сальпингоофоритами

Генотипы гена IL-1β, n (%)

c2 р

СС, n=18

ТС, n=30

ТТ, n=40

12-14 лет,

n=30 (%)

Специфичное воспаление, n=16 (%)

1

2 (12,5)

6 (37,5)

8 (50,0)

c2=5,25

р=0,072

Неспецифичное воспаление, n=14 (%)

2

4 (28,6)

4 (28,6)

6 (42,9)

c2<1,0

p>0,05

c2 р

c2=5,94

р=0,048

c2<1,0

p>0,05

c2<1,0

p>0,05

-

15-18

лет,

n=58 (%)

Специфичное воспаление, n=36 (%)

1

10 (27,8)

12 (33,3)

14 (38,9)

c2=1,0

р>0,05

Неспецифичное воспаление, n=22 (%)

2

2 (9,09)

8 (36,4)

12 (54,5)

c2=10,4

р=0,006

c2 р

c2=7,11

p=0,038

c2<1,0

p>0,05

c2=1,35

p=0,24

-

Эпидемиологический анализ риска появления сальпингоофоритов всех форм в зависимости от возраста свидетельствует, что Т-аллель и ТТ-генотип являются факторами риска воспаления придатков у девочек 15-18 лет [OR = 2,95-4,87, OR 95 % СІ = 1,29-18,4, р ≤ 0,013-0,006], влиятельней - неспецифического сальпингоофорита [OR = 4,80-7,20, OR 95 % СІ = 1,63-31,7, р ≤ 0,0012-0,006] и не влияют на появление данного воспаления в возрасте 12-14 лет независимо от его формы. С-аллель уменьшает шансы на появление сальпингоофоритов, но только в возрасте 15-18 лет [OR = 0,34, р = 0,003], особенно неспецифической формы воспаления придатков [OR = 0,21, р = 0,0006] и с наибольшим риском у обладательниц СС-генотипа [OR = 0,13, р = 0,011].

Высновки

У девочек-подростков, болеющих сальпингоофоритами, 15-18 лет преобладает мутантный Т-аллель гена IL-1β (id.: rs16944) над С-аллелям в соотношении 72:44 (р = 0,041), при невероятной диспропорционности у пациенток 12-14 лет - 38:22 (р > 0,05). Благоприятный СС-генотип наблюдали у каждого пятого подростка с сальпингоофоритами (20,5 %) и почти у каждого второго (41,9 %) группы контроля. Промежуточный гетерозиготный СТ-вариант регистрировали почти у каждой третьей девочки (34,7 % в основной группе, 38,7 % у здоровых). «Неблагоприятный» ТТ-генотип выявлен почти у половины лиц основной группы (45,4 %) и только у каждого пятого здорового подростка (19,4 %). Специфичные сальпингоофориты чаще встречались у девочек-носителей СС-генотипа в возрасте 15-18 лет в 2,22 раза, чем у таких 12-14 лет (χ2 = 5,88, р = 0,049). Неспецифические сальпингоофориты, наоборот, встречались реже у владелец данного генотипа в возрасте 15-18 лет в 3,15 раза, чем у подростков с аналогичным генотипом 12-14 лет (χ2 = 7,22, р = 0,031). Т-аллель и ТТ-генотип являются факторами риска воспаления придатков у девочек 15-18 лет [OR = 2,95-4,87, OR 95 % СІ = 1,29-18,4, р ≤ 0,013-0,006], влиятельней - неспецифического сальпингоофорита [OR = 4,80-7,20, OR 95 % СІ = 1,63-31,7, р ≤ 0,0012-0,006] и не влияют на появление данного воспаления в возрасте 12-14 лет независимо от его формы. С-аллель уменьшает шансы на появление сальпингоофоритов, но только в возрасте 15-18 лет [OR = 0,34, р = 0,003], особенно неспецифической формы воспаления придатков [OR = 0,21, р = 0,0006] и с наибольшим риском у обладательниц СС-генотипа [OR = 0,13, р = 0,011]. В перспективе планируется провести анализ ассоциации изменений гормонального зеркала из С-511Т - полиморфизма гена IL-1β у больных на сальпингоофорит девочек пубертатного возраста.

Рецензенты:

Сидорчук Л.П., д.м.н., профессор, зав. кафедрой семейной медицины, Буковинский государственный медицинский университет, г. Черновцы;

Юзько О.М., д.м.н., профессор, зав. кафедрой акушерства и гинекологии, Буковинский государственный медицинский университет, г. Черновцы.