Цель данного исследования - сравнительная оценка гепатопротекторных свойств оксиметилурацила (в форме комплексного соединения с натрия сукцинатом) и референтного силимарина на модели сочетанного токсического поражения печени ПХБ-содержащим препаратом «совтол-1» и этанолом.
Материалы и методы исследования
В ходе экспериментального исследования отобрана модель токсического поражения печени [7,10] для изучения сравнительной гепатопротекторной активности гепатопротектора силимарина и комплексного соединения «оксиметилурацил+натрия сукцинат». На модели отправления сочетанием ПХБ-содержащего препарата «совтол-1» и этанола крысы (n=48) были разделены на 4 равные группы. Животным 1-ой группы вводили 50%-ный раствор совтола-1 на оливковом масле из расчета 0,25 мл на 100 г массы тела дважды в неделю в течение 4-х недель. На протяжении опыта для питья животным давали 10%-ный раствор этанола. Животным 2-й и 3-й групп, используя те же дозы, вводили токсиканты (ПХБ+этанол), однако во 2-ой группе животные дополнительно получали комплекс «оксиметилурацил+натрия сукцинат». Препарат вводили перорально в течение 12 суток в дозе 50 мг/кг начиная с 14 дня эксперимента, а в 3-й - гепатопротектор силимарин в аналогичной дозе по вышеприведенной схеме. Все манипуляции выполнены в соответствии с международными нормативными документами, регламентирующими правила гуманного обращения с животными.
Проведена оценка показателей, характеризующих функциональное состояние печени: активность уроканиназы (УрН) [1], аланиновой аминотрансферазы (АлАТ), аспарагиновой аминотрансферазы (АсАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ) определяли по кинетическому методу Henry на биохимическом анализаторе согласно прилагаемым инструкциям, а также концентрацию SH-групп, билирубина, холестерина, триглицеридов и содержание в крови общего белка [5, 9]. Состояние процессов перекисного окисления липидов (ПОЛ) исследовали методом прямой спектрофотометрии путем определения содержания в гомогенатах печени количества диеновых конъюгатов (ДК), триеновых конъюгатов (ТК) [2,3]. Одновременно с процессами ПОЛ регистрировали активность супероксиддисмутазы (СОД) [11] и каталазы [4].
Результаты обрабатывали статистически. После проверки нормальности распределения изучаемых параметров в сравниваемых группах определяли средние величины (М), ошибку средних величин (m) при соответствии распределения признака закону нормального с расчетом сравнения групп показателей по критерию Стьюдента (t). Минимальный уровень статистически значимости различий верифицировали при р<0,05. Математическую обработку выполняли на компьютере с применением стандартных пакетов программы Statistica 6.0 и программного обеспечения Microsoft Excel. Комплексное соединение «оксиметилурацил+натрия сукцинат» синтезировано в Уфимском институте химии РАН к.х.н. Гимадиевой А.Р.
Результаты и их обсуждение
Полученные результаты свидетельствуют о том, что токсическое поражение печени, вызванное совтолом-1 и этанолом, сопровождается нарушением белково-синтетической, детоксицирующей, липосинтезирующей функции печени, признаками цитолиза и холестаза, активацией процессов ПОЛ и подавлением антиокислительной системы. Эксперименты проведены в два этапа. На первом этапе исследовали активность ПОЛ, систему антиоксидантной защиты и функционально-метаболическое состояние печени при сочетанном поражении ее совтолом-1 и этанолом, на втором - сравнительную эффективность применения комплексного соединения «оксиметилурацил+натрия сукцинат» и референтного препарата силимарина. Как следует из данных, представленных в таблице 1, при развитии токсического процесса происходит накопление продуктов ПОЛ в ткани печени. Содержание ДК увеличивается в печени в 2 раза, уровень ТК - в 1,47 раза. Накопление продуктов ПОЛ сопровождается снижением активности антиоксидантных ферментов - каталазы и супероксиддисмутазы соответственно в 2 и 3,5 раза. Нарушения в системе ПОЛ-АОЗ протекает при одновременном снижении в печени общих тиоловых групп, которое достигало к 30 суткам 42,2% от показателей интактных животных, что может быть обусловлено неферментативной реакцией SH-групп со свободными радикалами липидов в результате активации ПОЛ.
Таблица 1
Влияние перорального комплекса «оксиметилурацил+натрия сукцинат» и силимарина на активность процессов ПОЛ и антиоксидантной защиты в печени крыс при ее токсическом поражении (М±m)
Показатели |
Группы крыс |
|||
I |
II |
III |
IV |
|
ДК λ = 232), усл.ед/г |
2.95±0.23 |
1.1±0.1** |
1.0±0.02** |
1.52±0.09* |
ТК λ = 278), усл.ед/г |
1.0±0.12 |
0.88±0.07** |
1.1±0.2 |
0.68±0.05* |
СОД, усл.ед/мг белка |
1.36±0.07 |
4.22±0.13** |
4.0±0.15** |
4.83±0.66* |
Кат, моль в мин/г белка |
120.3±19.8 |
138.3±17.8** |
133.3±15.6** |
244.6±18.3* |
SH-группы, мкг/мг |
8.2±0.44 |
12.5±0.68** |
8.8±0.9 |
19.4±0.09* |
Примечание: * Р<0.05 между группами контроля
** Р<0.05 между группами, получавшими препараты по сравнению с I группой, получавшей только совтол-1 и этанол
Токсическое поражение печени вызывает снижение концентрации белка, увеличение уровня билирубина, холестерина и триглицеридов (таблица 2). В крови животных значительно повышается активность печеночно-специфического фермента - уроканиназы, а также активность АлАТ, АсАТ, ЩФ в 10,6; 2,4 и 1,9 раза соответственно.
Таблица 2
Коррекция функционально-метаболических нарушений в печени на модели ее токсического повреждения сочетанием совтола-1 и этанола (М±m)
Показатели |
Группы крыс |
|||
I |
II |
III |
IV (контроль) |
|
Число выживших животных |
42.5 |
100 |
100 |
100 |
УрН, нмоль/г·л Сдвиг показателей (Δ) |
54.9±3.5
|
32.6±7.2 -22.3* |
43.6±6.3 -11.3* |
0.89±0.03 -54.1* |
АлАТ, ммоль/г·л Сдвиг показателей (Δ) |
9.45±0.45
|
4.0±0.16 -5.45* |
3.8±0.22 -5.65* |
0.89±0.03 -6.15* |
АсАТ, ммоль/г·л Сдвиг показателей (Δ) |
25.7±0.43 |
13.2±0.66 -12.5* |
23.0±0.5 -2.7* |
10.7±0.14 -15.0* |
ЩФ, ммоль/г·л Сдвиг показателей (Δ) |
28.5±0.94 |
17.8±0.91 -10.7* |
15.3±0.74 -13.2* |
15.1±0.4 -13.4* |
Билирубин, мкмоль/г·л Сдвиг показателей (Δ) |
19.2±8.8
|
7.3±2.9 -11.9* |
18.0±5.6 -1.2 |
2.9±0.39 -16.3* |
Холестерин, ммоль/л Сдвиг показателей (Δ) |
4.3±0.33
|
2.3±0.21 -2.0* |
3.2±0.3 -1.1* |
2.9±0.29 -1.4* |
Триглицериды, ммоль/л Сдвиг показателей (Δ) |
1.9±0.12 |
0.18±0.09 -1.72* |
0.88±0.07 -1.02* |
0.23±0.97 -1.47* |
Общий белок, г/л Сдвиг показателей (Δ) |
59.5±3.7 |
64.3±5.2 +4.8 |
63.5±2.8 +4.0 |
65.4±2.9 +5.9 |
* Сдвиг показателя (Д) - разница между группами животных контроля, а также получавших комплексное соединение «оксиметилурацил+натрия сукцинат» и силимарин по сравнению с I-й группой крыс, получавших только совтол-1 и этанол
Лечение отравленных крыс комплексным препаратом, также как и силимарином, благоприятно влияет на функционально-морфологическое состояние их печени. Препараты оказывают гепатопротекторное действие: снижают гиперферментемию, частично нормализуют практически все исследованные показатели, характеризующие метаболическое состояние органа (табл.2). Силимарин менее эффективен, поскольку не изменяет концентрацию билирубина и холестерина, а также уровень АсАТ в крови отравленных крыс. В основе гепатозащитного действия препаратов лежат их антиоксидантные свойства.
Заключение
Гепатопротекторное действие силимарина и комплексного соединения «оксиметилурацил+натрия сукцинат» реализуется на метаболическом уровне. Метаболический эффект препаратов проявляется в снижении цитолиза, холестаза, а также уменьшении интенсивности липопероксидации. Антиоксидантные свойства препаратов подтверждаются благоприятным влиянием на активность антиоксидантных ферментов - супероксиддисмутазы и каталазы. С точки зрения получения конечного результата, комплексное соединение имеет преимущество перед референтным гепатопротектором силимарином в условиях модельной патологии, вызванной сочетанным применением совтола-1 и этанола. Возможно, при данном патологическом состоянии наиболее перспективными по механизму действия являются препараты, содержащие интермедиаты цикла трикарбоновых кислот, что требует дальнейшего экспериментального изучения.
Рецензент:
Миннебаев М.М., д.м.н., профессор кафедры патофизиологии ГБОУ ВПО Казанского государственного медицинского университета, г. Казань;
Фролов Б.А., д.м.н., профессор, зав. кафедрой патофизиологии ГБОУ ВПО Оренбургской государственной медицинской академии, г. Оренбург.
Библиографическая ссылка
Мышкин В.А., Срубилин Д.В., Гимадиева А.Р., Еникеев Д.А. СРАВНИТЕЛЬНАЯ ОЦЕНКА КОМПЛЕКСНОГО СОЕДИНЕНИЯ «ОКСИМЕТИЛУРАЦИЛ+НАТРИЯ СУКЦИНАТ» И СИЛИМАРИНА НА МОДЕЛИ ПОРАЖЕНИЯ ПЕЧЕНИ СОЧЕТАНИЕМ ПХБ-СОДЕРЖАЩЕГО ПРЕПАРАТА «СОВТОЛ-1» И ЭТАНОЛА // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 6. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=22950 (дата обращения: 13.02.2025).