Разработан пьезокварцевый иммуносенсор для высокочувствительного определение хлорамфеникола (ХАФ) в конкурентном формате анализа. Формирование рецепторного слоя сенсора проводили в три этапа: получение полимерной подложки, активация поверхности глутаровым альдегидом и ковалентное закрепление конъюгата хлорамфеникола с белковой молекулой. Электрогенерирование подложки на основе полианилина осуществлялось в потенциодинамическом режиме с линейной и циклической разверткой потенциала в диапазоне -0,2 ÷ +1,4 В со скоростью 10 мВ/с. Методом Скетчарда установлены константы скорости образования и разрушения иммунокомплекса, константа аффинности антител. Показано, что рецепторное покрытие сенсора характеризуется высокой аффинностью и устойчивостью при длительной эксплуатации в жидкости, минимальной массой. Разработанный сенсор апробирован при определении хлорамфеникола в мясе, молоке, яйцах и меде.
The piezoelectric sensor for highly sensitive detection of chloramphenicol in competitive format of analysis was developed. The processes of the preparation of immunoaffinity coating included three stages: formation of polymeric film, activation by glutaraldehyde and covalent binding of hapten-protein conjugate. The electrosynthesis of the polyaniline applied as a substrate is carried out in the potentiodynamic mode with linear and cyclic potential sweep in the range between -0.2 and +1.4 V at the scan rate of 10 mV/sec. The constants of the destruction rate and of the immunocomplex formation rate and the affinity constant were calculated by the Scаtchard method. It was shown that receptor coating is characterized highly affinity, stability during long exploitation in liquid media and minimum mass. The sensor was tested in analyzing samples of meat, milk, eggs and honey.
1. Андреев В.Н. Электрохимический синтез и свойства пленок полианилина, сформированных на различных подложках // Электрохимия. – 1999. – Т. 35. – № 7. – С. 824-829.
2. Перечень веществ, продуктов, производственных процессов, бытовых и природных факторов, канцерогенных для человека : Гигиенические нормативы ГН 1.1.725-98 (утв. постановлением Главного государственного санитарного врача РФ от 23 декабря 1998 г. № 32).
3. Еремин С.А. Определение хлорамфеникола в молоке методом поляризационного флуоресцентного иммуноанализан / С.А. Еремин, Н.В. Гасилова // Журнал аналитической химии. – 2010. – Т. 65. – № 3. – С. 261-265.
4. Ермолаева Т.Н. Пьезокварцевые сенсоры: аналитические возможности и перспективы: монография / Т.Н. Ермолаева, Е.Н. Калмыкова. – Липецк : ЛГТУ, 2007. – 190 с.
5. Карасева Н.А. Изучение условий получения иммуноаффинных покрытий пьезокварцевых сенсоров для определения хлорамфеникола / Н.А. Карасева, Т.Н. Ермолаева // Аналитическая химия – новые методы и возможности : тезисы докл. съезда аналитиков России (Москва, 26-30 апреля 2010 г.). – Москва, 2010. – С. 141.
6. Овсянникова Е.В. Автокаталитический характер анодной полимеризации анилина в водно-органических кислых растворах / Е.В. Овсянникова, М.Ю. Трошева, Н.М. Алпатова // Электрохимия. – 2004. – Т. 40. – № 10. – С. 1265-1268.
7. Тимонов А.М. Электронная проводимость полимерных соединений / А.М. Тимонов, С.В. Васильева // Соросовский образовательный журнал (Химия). – 2000. – Т. 6. – № 3. – С. 33-39.
8. Briseno A.L. Electrochemical polimerization of aniline monomers infiltrated into well-ordered truncated eggshell structures of polyelectrolyte multilayers // Langmuir. – 2004. – Vol. 20, Issue 1. – P. 219-226.
9. Cosnier S. Affinity biosensors based on electropolymerized films // Electroanalysis. – 2005. – Vol. 17, Issue 19. – P. 1701–1712.
10. Fujita K. Determination of chloramphenicol residues in bee pollen by liquid chromatography/tandem mass spectrometry // Journal of AOAC INTERNATIONAL. – 2010. – V. 91, Issue 5. – P. 1103-1109.