Изучение функционального состояния иммунокомпетентных клеток представляет интерес для поиска дополнительных предикторов ответа на лечение. Цель исследования – провести сравнительную оценку исходного иммунного статуса и функциональной активности мононуклеарных клеток периферической крови при воздействии берберина in vitro у пациентов с противоположным клиническим ответом на терапию (полный метаболический ответ и раннее прогрессирование с летальным исходом). В исследование включены два клинических случая впервые диагностированной лимфомы II стадии с сопоставимыми прогностическими характеристиками и различным исходом лечения. Иммунофенотипирование лейкоцитов периферической крови проводили методом проточной цитометрии с оценкой результатов на BD FACSCanto. Функциональную активность мононуклеарных клеток периферической крови оценивали in vitro методом колониеобразования при воздействии берберина в концентрациях 1, 2 и 4 мкМ в условиях базальной и митогенной (фитогемагглютинин 4 мкг/мл) стимуляции. Количественный анализ колоний выполняли с использованием автоматического клеточного анализатора Lionheart FX. Выявлены различия в субпопуляционном составе лимфоцитов и пролиферативном ответе клеток. Берберин оказывал дозозависимое стимулирующее влияние на колониеобразование, при этом пик ответа различался в зависимости от клинического исхода. Полученные данные свидетельствуют о возможной связи функционального состояния мононуклеарных клеток и их чувствительности к берберину с клиническим ответом при диффузной В-клеточной крупноклеточной лимфоме. Выявленные тенденции обосновывают целесообразность дальнейших исследований берберина как потенциального иммуномодулирующего агента.
Diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) is one of the most aggressive subtypes of non-Hodgkin lymphomas, in which a proportion of patients develop resistance to therapy. Investigation of the functional status of immunocompetent cells is of interest for identifying additional predictors of treatment response. Purpose of the study – to perform a comparative assessment of the baseline immune status and functional activity of peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) following in vitro exposure to berberine in patients with opposite clinical outcomes (complete metabolic response and early progression with fatal outcome). The study included two clinical cases of newly diagnosed stage II lymphoma with comparable prognostic characteristics and different treatment outcomes. Immunophenotyping of peripheral blood leukocytes was performed by flow cytometry using a BD FACSCanto system. The functional activity of PBMCs was evaluated in vitro using a colony formation assay after exposure to berberine at concentrations of 1, 2, and 4 μM under basal conditions and mitogenic stimulation (phytohemagglutinin, 4 μg/mL). Quantitative colony analysis was carried out using the automated cell imaging system Lionheart FX. Differences in lymphocyte subpopulation composition and proliferative response were identified. Berberine exerted a dose-dependent stimulatory effect on colony formation, with the peak response varying depending on clinical outcome. The obtained data suggest a possible association between the functional status of PBMCs and their sensitivity to berberine with clinical response in DLBCL. The identified trends substantiate the need for further studies of berberine as a potential immunomodulatory agent.
1. He M. Y., Kridel R. Treatment resistance in diffuse large B-cell lymphoma // Leukemia. 2021. Vol. 35 (8). P. 2151–2165. DOI: 10.1038/s41375-021-01285-3.
2. Autio M., Leivonen S. K., Brück O., Karjalainen-Lindsberg M. L., Mustjoki S., Leppä S. Immune cell constitution in the tumor microenvironment predicts the outcome in diffuse large B-cell lymphoma // Haematologica. 2021. Vol. 106 (3). P. 718–729. DOI: 10.3324/haematol.2019.243626.
3. Ioannou N., Jain K., Ramsay A. G. Immunomodulatory drugs for the treatment of B cell malignancies // International Journal of Molecular Sciences. 2021. Vol. 22 (16). P. 8572. DOI: 10.3390/ijms22168572.
4. Xiong R. G., Huang S. Y., Wu S. X., Zhou D. D., Yang Z. J., Saimaiti A. et al. Anticancer effects and mechanisms of berberine from medicinal herbs: an update review // Molecules. 2022. Vol. 27 (14). P. 4523. DOI: 10.3390/molecules27144523.
5. Тимофеева С. В., Филиппова С. Ю., Чембарова Т. В., Гненная Н. В., Межевова И. В., Златник Е. Ю., Новикова И. А., Мироненко И. Н., Гончарова А. С., Дженкова Е. А. Антипролиферативные свойства нового растительного алкалоида в отношении клеточных культур колоректального рака // Южно-Российский онкологический журнал. 2025. Т. 6. № 4. С. 16–25. URL: https://www.srjoc.ru/jour/article/view/550 (дата обращения: 12.03.2026). DOI: 10.37748/2686-9039-2025-6-4-2.
6. Rauf A., Abu-Izneid T., Khalil A. A., Imran M., Shah Z. A., Emran T. B. et al. Berberine as a potential anticancer agent: A comprehensive review // Molecules. 2021. Vol. 26 (23). P. 7368. DOI: 10.3390/molecules26237368.
7. Златник Е. Ю., Енин Я. С., Буров О. Н., Бондаренко Е. С., Сагакянц А. Б., Кутилин Д. С., Дзигунова Ю. В., Ишонина О. Г., Шалашная Е. В., Ушакова Н. Д. Молекулярно-клеточные аспекты воздействия вторичных метаболитов барбариса обыкновенного и белокопытника гибридного на клеточную линию HeLa // Research'n Practical Medicine Journal. 2023. № 10 (4). С. 31–47. DOI: 10.17709/2410-1893-2023-10-4-3.
8. Ren S., Cai Y., Hu S., Wang J., Zhao Y., Ding Y. et al. Berberine exerts anti-tumor activity in diffuse large B-cell lymphoma by modulating c-myc/CD47 axis // Biochemical Pharmacology. 2021. Vol. 188. P. 4576. DOI: 10.1016/j.bcp.2021.114576.
9. Mohammadian Haftcheshmeh S., Musavi M., Lotfi S., Khosrojerdi A., Farshbaf A., Mohammadi A. et al. Berberine as a natural immunomodulator of B lymphocytes // Inflammopharmacology. 2025. Vol. 33 (8). P. 4191–4204. DOI: 10.1007/s10787-025-01852-5.
10. Lusila P., Toivonen A., Jarva H., Vettenranta K., Lehtimäki S., Kekäläinen E. FASCIA Method in the Assessment of Lymphocyte Mitogen Responses in the Laboratory Diagnostics of Primary Immunodeficiencies // Journal of Clinical Immunology. 2023. Vol. 43. P. 6561. DOI: 10.1007/s10875-022-01417-z.
11. Al-Hamaly M. A., Blackburn J. S. A high-throughput workflow for assessing self-renewal using colony formation assays // Stem Cell Research. 2025. Vol. 87. P. 13757. DOI: 10.1016/j.scr.2025.103757.
12. Zhu Q., Yang Y., Chen K., Zhang Q., Huang Y., Jian S. Diffuse large B-cell lymphoma: the significance of CD8+ tumor-infiltrating lymphocytes exhaustion mediated by TIM3/Galectin-9 pathway // J. Transl Med. 2024 Feb 18. Vol. 22 (1). P. 174. DOI: 10.1186/s12967-024-05002-3.
13. Jia H., Yang H., Xiong H., Luo K. Q. NK cell exhaustion in the tumor microenvironment // Front. Immunol. 2023. Vol. 14. P. 1303605. DOI: 10.3389/fimmu.2023.1303605
14. Ikeda D., Oura M., Uehara A., Tabata R., Narita K., Takeuchi M., Machida Y., Matsue K. Prognostic relevance of tumor-infiltrating CD4+ cells and total metabolic tumor volume-based risk stratification in diffuse large B-cell lymphoma // Haematologica. 2022. Vol. 109 (9). P. 2822–2832. DOI: 10.3324/haematol.2024.285038.
15. Гуськова Н. К., Селютина О. Н., Новикова И. А., Максимов А. Ю., Ноздричева А. С., Абакумова С. В. Морфологические и иммунофенотипические особенности моноклональной популяции В-лимфоцитов при хроническом лимфолейкозе // Южно-Российский онкологический журнал. 2020. № 1 (3). С. 27–35. URL: https://www.srjoc.ru/jour/article/view/47 (дата обращения: 01.04.2026). DOI: 10.37748/2687-0533-2020-1-3-3.
16. Cioroianu A. I., Stinga P. I., Sticlaru L., Cioplea M. D., Nichita L., Popp C. et al. Tumor microenvironment in diffuse large B‐cell lymphoma: role and prognosis // Analytical Cellular Pathology. 2019. Vol. 2019. P. 8586354. DOI: 10.1155/2019/8586354.
17. Tamma R., Ranieri G., Ingravallo G., Annese T., Oranger A., Gaudio F. et al. Inflammatory cells in diffuse large B cell lymphoma // Journal of Clinical Medicine. 2020. Vol. 9 (8). P. 2418. DOI: 10.3390/jcm9082418.
18. Klanova M., Oestergaard M. Z., Trněný M., Hiddemann W., Marcus R., Sehn L. H. et al. Prognostic impact of natural killer cell count in follicular lymphoma and diffuse large B-cell lymphoma patients treated with immunochemotherapy // Clinical Cancer Research. 2019. Vol. 25 (15). P. 4634–4643. DOI: 10.1158/1078-0432.CCR-18-3270.