Работа выполнена на 54 белых нелинейных крысах, разделенных на 3 группы: интактные животные, животные с термической травмой (ТТ), животные с термической травмой, которым вводили эритропоэтин (ЭПО). ТТ моделировали при контакте кожи в течение 30 с с нагретым до температуры 100 °С предметом (ожог IIIА степени), площадь ожога 4%. ЭПО («Рекормон», МНН: эпоэтин бэта, Roche, Швейцария) вводился внутрибрюшинно, в суммарной дозе 1500 МЕ/кг массы. В периферической крови у крыс определяли количество Т-лимфоцитов и В-лимфоцитов с использованием моноклональных антител CD3 и CD45RA соответственно. Гибель лимфоцитов путем некроза и апоптоза оценивали при окрашивании клеток конъюгированным с флюорохромом аннексином V (Annexin-5-FITC) и 7-аминоактиномицином D (7-AAD). Анализ окрашенных клеток проводили на проточном цитофлуориметре Navios (Beckman Coulter, США). Th1- и Th2-зависимый ответ оценивали соответственно в реакции гиперчувствительности и по количеству антителообразующих клеток в селезенке крыс после иммунизации. Установлено, что при ТТ на 3-и сутки в крови снижается количество Т- и В-лимфоцитов, угнетается Th1- и Th2-зависимый иммунный ответ, увеличивается количество лимфоцитов в крови с признаками апоптоза и некроза. Снижение количества Т- и В-лимфоцитов в крови, угнетение Th1- и Th2-зависимого иммунного ответа нарастает по мере увеличения количества лимфоцитов с признаками апоптоза и некроза. Применение ЭПО приводит к частичному или полному восстановлению количества Т- и В-лимфоцитов в крови, Th1- и Th2-зависимого иммунного ответа, снижению количества лимфоцитов в крови с признаками апоптоза и некроза. Восстановление количества Т- и В-лимфоцитов в крови, Th1- и Th2-зависимого иммунного ответа при ТТ в условиях применения ЭПО ассоциировано со снижением количества лимфоцитов в крови с признаками апоптоза и некроза.
The study examines 54 white nonlinear rats divided into 3 groups: intact animals, animals with thermal injury (TI), animals with thermal injury treated with erythropoietin (EPO). Skin burn injury was modeled by 100°C heat source application for 30 seconds (III-A degree burn) covering 4% of the surface. EPO ("Recormon" INN: epoetin beta, «Roche», Switzerland) was introduced intraperitoneally in a total dose of 1500 IU/kg. The amount of T-lymphocytes and B-lymphocytes with CD3 and CD45RA monoclonal antibodies respectively was determined in the rats’ peripheral blood. Apoptosis and necrosis of lymphocytes was assessed by staining of cells with fluorochrome-conjugated annexin V (Annexin-5-FITC) and 7-aminoaktinomitsin D (7-AAD). A flow cytometer «Navios» («Beckman Coulter», USA) is used to analyze the stained cells. Th1- and Th2-dependent response was evaluated in hypersensitivity reactions and the number of antibody-forming cells respectively in the rats’ spleens after immunization. The number of T-lymphocytes and B-lymphocytes decreases in the blood, Th1-dependent and Th2-dependent immune response is inhibited, number of lymphocytes in the blood with signs of apoptosis and necrosis increases on the 3rd day after TI. Reduction of the number of T-lymphocytes and B-lymphocytes in the blood, inhibition of Th1-dependent and Th2-dependent immune response increases as the number of lymphocytes with signs of apoptosis and necrosis increases. The use of EPO leads to a partial or full restoration of the number of T-lymphocytes and B-lymphocytes in the blood, Th1-dependent and Th2-dependent immune response, reducing the number of lymphocytes in the blood with signs of apoptosis and necrosis. Restoring the number of T-lymphocytes and B-lymphocytes in the blood, Th1-dependent and Th2-dependent immune response in case of TI with administration of EPO is associated with decreased number of lymphocytes in the blood with signs of apoptosis and necrosis.
1. Осиков М.В. Эфферентные и антиоксидантные свойства эритропоэтина при хронической почечной недостаточности / М.В. Осиков, Т.А. Григорьев, Ю.И. Агеев // Эфферентная терапия. - 2011. - Т. 17. - № 4. - С. 7-13.
2. Осиков М.В. Влияние эритропоэтина на функциональную активность тромбоцитов / М.В. Осиков, Т.А. Григорьев, А.А. Федосов, Д.А. Козочкин, М.А. Ильиных // Современные проблемы науки и образования. – 2012. – № 6. – URL: www.science-education.ru/106-7450 (дата обращения: 05.06.2015).
3. Осиков М.В. Роль эритропоэтина в реализации тромбоцитарно-клеточных взаимодействий в крови при хронической почечной недостаточности / М.В. Осиков, Т.А. Григорьев, А.А. Федосов // Фундаментальные исследования. – 2012. – № 10-2. – С. 285-289.
4. Осиков М.В. Современные представления о гемостазиологических эффектах эритропоэтина / М.В. Осиков, Т.А. Григорьев, А.А. Федосов // Фундаментальные исследования. – 2013. – № 5-1. – С. 196-200.
5. Осиков М.В. Эритропоэтин как регулятор экспрессии тромбоцитарных гликопротеинов / М.В. Осиков, Т.А. Григорьев, А.А. Федосов, Д.А. Козочкин, М.А. Ильиных // Современные проблемы науки и образования. – 2013. – № 1. – URL: www.science-education.ru/107-7731 (дата обращения: 05.06.2015).
6. Осиков М.В. Уровень эритропоэтина и иммунный статус организма у больных хронической почечной недостаточностью, находящихся на гемодиализе / М.В. Осиков, Л.Ф. Телешева, Ю.И. Агеев, А.А. Федосов // Современные проблемы науки и образования. – 2013. – № 4. – URL: www.science-education.ru/110-9973 (дата обращения: 05.06.2015).
7. Осиков М.В. Влияние эритропоэтина на показатели врожденного иммунитета в ранние сроки экспериментальной термической травмы / М.В. Осиков, Л.Ф. Телешева, А.М. Кишкин, А.А. Федосов // Фундаментальные исследования. – 2014. – № 7-2. – С. 334-339.
8. Buchanan I.B. The effect of burn injury on CD8+ and CD4+ T cells in an irradiation model of homeostatic proliferation / I.B. Buchanan, R. Maile, J.A. Frelinger et al. // J. Trauma. – 2006. – Vol. 61 (5). – P. 1062-1068.
9. Fazal N. Inhibition of T cell MAPKs (Erk 1/2, p38) with thermal injury is related to down-regulation of Ca2+ signaling / N. Fazal, M.A. Choudhry, M.M. Sayeed // Biochim. Biophys. Acta. – 2005. – Vol. 1741 (1-2). – P. 113-119.
10. MacConmara M.P. Regulatory T cells suppress antigen-driven CD4 T cell reactivity following injury / M.P. MacConmara, G. Tajima, F. O'Leary et al. // J. Leukoc. Biol. – 2011. – Vol. 89 (1). – P. 137-147.