Выполнена валидация ВЭЖХ-методики качественного и количественного анализа метилурацила и метронидазола в составе экспериментального препарата «Ремелтоп». Исследования проведены на жидкостном хроматографе LC-20 фирмы «SHIMADZU» (Япония) с УФ-детектором, с последующей компьютерной обработкой результатов исследования с использованием программы «LCsolution version 1.4». Неподвижная фаза – хроматографическая колонка 4,6×150 мм PerfectChrom C-18, размер частиц 5 нм («MZ-Analysentechnik», Германия). Подвижная фаза – А: трифторуксусная кислота раствор 0,1 %, Б: ацетонитрил 100 %. Температура колонки – 35 °С, скорость подачи элюента – 100 мкл/мин, объем пробы – 20 мкл, градиентное элюирование – изменение концентрации элюента Б от 10 % до 50 %, продолжительность анализа – 8 мин. Разработанная методика качественного и количественного анализа метилурацила и метронидазола методом ВЭЖХ может быть использована для оценки качества экспериментального препарата «Ремелтоп», порошка для приготовления суспензии для приема внутрь, так как экспериментальным путем установлены параметры линейности (R2=0,9991 при y=233600×x-19,458; R2=0,9993 при y=7490576×x+0,246), диапазона применения (от 50 до 150 %), прецизионности в условиях повторяемости (RSD = 0,50 %; 1,04%), правильности ( =95,52±0,56%, 99,96±0,16 %) для метилурацила и метронидазола соответственно, которые не превышают рекомендуемых значений.
Validation HPLC-methods of qualitative and quantitative analysis of methyluracile and metronidazole in the structure of the experimental drug, «Remeltop» was performed. In liquid chromatograph LC-20 of the company «SHIMADZU» (Japan) with UV detector with further computer processing of the results of research using the program «LCsolution version 1.4» studies were conducted. Stationary phase - chromatography column 4,6 x 150 mm PerfectChrom C-18, a particle size of 5 nm («MZ-Analysentechnik», Germany). The mobile phase: trifluoroacetic acid a solution of 0.1%, B: acetonitrile 100%. Gradient elution concentration changes of eluent B from 10% to 50%, duration of the analysis 8 min. The technique for quality assessment Remeltop (a powder for oral suspension) can be used, as experimentally defined settings linearity (R2=0,9991, y=233600×x-19,458; R2=0,9993, y=7490576×x+0,246), application range (50 to 150%), precision in terms of the frequency of occurrence (RSD=0,50%; 1,04%; 1,75%), correctness ( =95,52±0,56%, 99,96±0,16%) for methyluracile and metronidazole respectively, which do not exceed the recommended values.
1. Воробьева В. М. Технология и биофармацевтическая оценка экспериментальных препаратов «Премелтоп» и «Ремелтоп» / В. М. Воробьева, Д. Г. Полухин // Современные проблемы медицины: теория и практика: материалы международной заочной научно-практической конференции. (02 июля 2012 г.). – Новосибирск: Изд. «Сибирская ассоциация консультантов», 2012. – С. 49–54.
2. Государственная фармакопея Российской Федерации XII, ч.2 / Изд-во «Научный центр экспертизы средств медицинского применения», 2010 // farmakopeya12.ru
3. Патент РФ № 2286781 Способ лечения химических ожогов пищевода у детей / В. А. Кожевников, В. М Воробьева, А. К. Смирнов, В. Ф. Турецкова, Д. Г. Полухин (РФ), заявка 2003121575/14 от 11.07.2003 г., патент РФ №2286781, опубликовано 10.11.2006 г., Бюл. № 31. 8 с.
4. Шатц В. Д., Сахартова О. В. Высокоэффективная жидкостная хроматография. – Рига: Зинанте, 1988. – 390 с.
5. Эпштейн Н. А. Оценка пригодности (валидация) ВЭЖХ методик в фармацевтическом анализе // Химико-фармацевтический журнал. – 2004. – Т. 38. – № 4. – С. 40–55.
6. European Pharmacopoeia, 7th ed. European Directorate for the Quality of Medicines, Council of Europe. – Strasburg, France, 2010.
7. ICH Harmonized Tripartite Guidelines. ICH Q2A «Text on Validation of Analytical Procedures». – ICH, Geneva, 1995.
8. ICH Harmonized Tripartite Guidelines. ICH Q2B «Validation of Analytical Procedures: Methodology». – ICH, Geneva, 1997.