В мире проживает более 1 блн. человек, инфицированных Herpessimplexvirus (HSV) - 1 и 2, ежегодно прирост инфицированных составляет не менее 25 млн человек [49]. Распространенность и частота возникновения инфекции определяется наличием вирус-специфических антител у восприимчивых организмов. В 85-90 % случаев первичная инфекция протекает бессимптомно и только в 10-15 % - в виде клинической инфекции [38]. Около 1 млрд человек - одна шестая часть населения мира, инфицированы ВПГ-2 типа [29]. Генитальный герпес (ГГ) занимает 3-е место среди инфекций, передаваемых половым путем, уступая по частоте лишь гонорее и негонококковым уретритам [19]. Рост числа этого заболевания среди работоспособных людей репродуктивного возраста представляет социально-экономическую проблему для многих стран мира, у мужчин и женщин распространенность ВПГ-2 возрастает с увеличением возраста пациентов [25; 24; 16; 23; 43]. Вирусы герпеса обладают уникальными свойствами, оказывая непосредственное цитопатическое, тератогенное или мутагенное действие [15; 2; 7; 25]. Хроническая рецидивирующая герпесвирусная инфекция ассоциирована со многими соматическими болезнями. Рецидивы заболевания HSV являются основным фактором повышенного риска развития слепоты, энцефалита, сахарного диабета 2 типа, ожирения, сердечно-сосудистых заболеваний, в т.ч. васкулопатий (в связи с увеличением продукции провоспалительных цитокинов и факторов роста в эндотелии сосудов), болезни Альцгеймера [28; 36; 39].
Терапия больных HSV индивидуальна и зависит от формы инфекции, тяжести, частоты рецидивов. Она включает этиотропное, патогенетическое и симптоматическое направления. Целью этиопатогенетической терапии ГГ является прекращение выделения вируса из мочеполовых органов и предотвращение распространения инфекции [10]. Согласно клиническим рекомендациям стандартом фармакотерапии пациентов с ГГ является эпизодическая или супрессивная терапия ациклическими нуклеозидами, высокая эффективность которых в терапии различных форм герпесвирусных инфекций доказана многочисленными исследованиями [9; 20; 1; 17]. Однако стали появляться работы, свидетельствующие об увеличении резистентности к лечению ацикловиром [22; 6; 13]. При герпесе, как и при других хронических заболеваниях с персистенцией вируса, развиваются иммунодефицитные состояния, обусловленные недостаточностью различных факторов иммунной системы и ее неспособностью элиминировать вирус из организма, и монотерапия противовирусными препаратами не позволяет достигать желаемых результатов [11]. Большинство авторов считают, что лечение герпетической инфекции должно быть комплексным: этиологическим и патогенетическим, с использованием комбинации различных лекарственных средств с различным механизмом действия как в остром периоде (первичная инфекция или рецидив), так в периоде реконвалесценции и в межрецидивном периоде [14; 9; 18; 20; 1; 8; 11].
Вакцинопрофилактика является более эффективной стратегией профилактического подхода, направленной на снижение заболеваемости генитальным герпесом [37; 47], хотя ряд исследователей считает, что надежды, возлагаемые на специфическую вакцинопрофилактику, не оправдали себя [8; 45].
Попытки разработки вакцины против HSV были предприняты еще в 1930 году. Вакцины были оценены как профилактические и терапевтические. Профилактические вакцины предотвращают заражение HSV-2-инфекцией и/или допускают развитие заболевания, в то время как терапевтические вакцины минимизируют тяжесть заболевания и/или предотвращают рецидивы HSV у уже инфицированных лиц. По мнению многих ученых, усилия должны, в первую очередь, сосредоточиться на развитии профилактических вакцин, пока не будет больше изучена биология и иммунология реактивации [34]. Терапевтические вакцины уменьшают число латентных копий ДНК HSV в ганглиях и способность уклонения HSV от иммунного ответа организма, стимулируют усиление CD8+ и CD4+ Т-клеточных ответов, систему комплемента и образование нейтрализующих антител в месте развития инфекции [34]. Поэтому большинство существующих вакцин полагаются на нейтрализующие антитела [44], которые способны индуцировать совершенно другие типы иммунных реакций, в том числе местный ответ В-клеток, для того, чтобы защитить организм человека от вируса герпеса при условии достаточной концентрации антител [45].
Большое количество исследований было направлено на развитие эпитоп-опосредованной Т-клеточной вакцины против герпеса, которая основана на идентификации и включении иммуногенных эпитопов Т-клеток, которые бы подавили вирус [29]. H. Shinetal. (2012) описывает стратегию создания вакцины «primeandpull»: обычная парентеральная вакцинация для выявления системного Т-клеточного ответа и забор активированных Т-клеток с применением хемокинов для создания долгосрочных пулов, которые опосредуют защитный иммунитет [44]. В 2013 году H. Shin с соавт. провели профилактические испытания вакцины против HSV-2. Две субъединичные вакцины, направленные против любого HSV-2 гликопротеина B и D (Хирон) или гликопротеина D (Herpevac, GSK) в одиночку. Ученые выявили, что обе вакцины стимулируют Th1 ответ [45].
Следуя концепции, которая определяет генитальный герпес как воспалительное состояние, опосредованное провоспалительными цитокинами и хемокинами [26], была разработана стратегия вакцинации «простое хемокиновое притяжение». Это альтернатива прямой иммунизации половых путей, которая устанавливает надежный, длительный иммунитет (до 12 недель) с минимальным местным воспалением. Местное применение хемоаттрактантов стимулирует приток (выход) Т-клеток и формирует долгосрочные пулы Т-клеток в периферических тканях, в результате чего сначала генерируются стойкие системные клеточные иммунные ответы, которые затем перенаправляются в половые пути [44]. S. Goranderetal. (2012) испытывали зрелую форму гликопротеина G (MGG-2) HSV-2 для иммунизации мышей в виде моноварианта, либо в сочетании с адъювантной вакциной CpG, после чего была проведена провокация: во влагалище была введена летальная доза штамма HSV-2. Установлено, что рассматриваемая сочетанная вакцина может явиться перспективной для иммунизации людей [35]. Другое исследование было посвящено изучению эпитопов гликопротеинов HSV-2, которые обнаруживали на плазматических мембранах клеток, и выступали в качестве антигенных структур для клеточных и гуморальных реакций. Таким образом, только пять эпитопов показали высокую антигенность, это позволило стимулировать выработку антител к HSV-2 у мышей, что было подтверждено экспериментальным путем [41].
В исследовании F. Chiuppesietal. (2012) оценивалась вакцина HSV-1 gB1 против HSV-1 и HSV-2 у мышей. Ученые заключили, что вакцинация gB1 вызвала образование перекрестно-нейтрализующих антител и клеточно-опосредованный иммунный ответ, который защитил 100 % особей от HSV-1 и 75 % особей от HSV-2 [30]. Важно отметить, что вакцинация предотвратила смерть 83 % животных, инфицированных HSV-2 такой дозой, которая убила 78 % невакцинированных особей [30]. Другой кандидат вакцины состоит из 32 синтетических пептидов, полученных из конъюгированного HSV с белками теплового шока человека 70 (hsp70) (Agenus). Эта вакцина вызывает продукцию IFNγ и Т-клеточные реакции, она безопасна и хорошо переносима для человека [45].
В качестве терапевтического средства также целесообразно применение G2 пептида, который способен выполнять роль молекулы доставки, уменьшать цитотоксичность в отношении здоровых клеток и оказывать противовирусное действие. G2 пептид предотвращает прикрепление вируса и его слияние с клетками хозяина, тем самым уменьшая его проникновение, а также подавляет передачу вирионов от клетки к клетке и образование бляшек, индуцированных HSV [26].
Североамериканские ученые разработали высокоочищенную версию вакцины против HSV-2 ACAM529, которая может быть применима в вакцинировании людей [40]. Целью исследования итальянских ученых было изучить возможность интраназальной иммунизации с помощью неионных поверхностно-активных везикул, содержащих либо переработанный гликопротеин B вируса герпеса 1 типа, или полилизин-пептиды для иммунизации мышей против HSV [31]. R. Cortesietal. (2013) пришли к выводу, что вакцинация мышей препаратом гликопротеина B приводит к Th 1-зависимому иммунному ответу и выражается в повышении уровня Ig2a в плазме, кроме того, интраназальная иммунизация везикулами гликопротеина B может обеспечить защиту от HSV-2.
M. Skoberne et al. (2013) оценивали вакцину GEN-003/MM-2 по ее способности индуцировать широкий спектр иммунного ответа у мышей и терапевтическую эффективность HSV-2 у инфицированных морских свинок. GEN-003 состоит из HSV-2 гликопротеина D2 (GEN-0032TMR340) и укороченной формы полипептида 4 (ICP4383-766), соединенной с матрицей М-2 (ММ-2). Вакцинация мышей GEN-003/MM-2 привела к значительному сокращению как распространенности, так и тяжести повреждений у HSV-2 инфицированных морских свинок. Авторами сделаны выводы о возможной роли иммунотерапевтической вакцинации GEN-003/MM-2 в качестве жизнеспособной альтернативы противовирусных препаратов в лечении и контроле генитального герпеса [42].
Ряд исследований MahajanB.B. et. al. (2013) подтвердили эффективность Zn2 + в подавлении вирусов герпеса. Местное применение 4 % сульфата цинка (ZnSO4) оказывает эффективное терапевтическое воздействие (образование корок в течение 1-3 дн.; полное заживление в течение 6-12 дн.) не только для лечения генитального герпеса, но и для предотвращения рецидивов и продления ремиссии, без каких-либо побочных эффектов, что было доказано с помощью рандомизированного двойного слепого плацебо-контролируемого клинического исследования [37].
Более новый подход получения вакцины из инактивированных субъединиц основан на попытке сгенерировать сбалансированный ответ Т-клеток и антител посредством использования Т-клеточных эпитопов, полученных из белка ICP4 и антител, продуцируемых на гликопротеин gD-2, в сочетании с фирменным адъювантом Matrix-M [46].
Рекомбинантная CJ9-gD вакцина вызывает сильные защитные иммунные ответы против первичной и рецидивирующей HSV-инфекций половых органов и подавляет степень латентной инфекции [47]. Синтетические агонисты TLR2,3,7 и 9 разработаны для активации врожденного иммунного ответа, тем самым увеличивая порог инфекции или ослабляя текущие эпизоды [47].
Вакцины из гликопротеина С HSV-1 (С1) и гликопротеина С HSV-2 (С2) используются в комбинации, как субъединичные антигены (gD1 и gD2), предотвращающие уклонение вируса от иммунных ответов, опосредованных компонентом комплемента C3b, который приводит к нейтрализации вируса, лизису инфицированных клеток и повышению В- и Т-клеточных реакций (двухвалентные субъединичные вакцины С2 / gD2 обеспечили лучшую защиту от регулярных эпизодов HSV-2, чем одновалентные, особенно в присутствии человеческого комплемента, на моделях животных) [27].
Попытки создания живой ослабленной вакцины против HSV были сосредоточены на «конструировании» ослабленных вирусов, которые могли бы генерировать более стойкую активацию гуморальных и клеточных иммунных реакций и сводить к минимуму потенциальную вирулентность патогенов в организме человека [46]. В ходе эксперимента на мышах был сконструирован мутантный вирус VC2 с делециями в пределах генов, кодирующих гликопротеин K (gК) и белок UL20, который эффективно реплицируется в инфицированных клетках в пробирке. Одна такая внутримышечная вакцинация вирусом VC2 (при высокой инфекционной дозе - 107 БОЕ) обеспечила надежный гуморальный и клеточно-опосредованный иммунный ответ, поэтому ей присвоена 100 % защита от летального интравагинального заражения вирусами HSV-1 (McKrae) и HSV-2 (G) типов. Более того, показано, что VC2 выявляет чужеродные антигены и может обеспечить сильный адъювантный эффект, который вызывает генерацию защитных адаптивных иммунных ответов слизистых оболочек против других передаваемых половым путем патогенов, таких как ВИЧ и хламидиоз [46].
Сенсационная публикация J. Wangetal. (2014) гласит о создании онколитического вируса простого герпеса G47(∆)delta для лечения гепатоцеллюлярной карциномы человека. Вирус реплицируется в опухолевых клетках, после чего большинство из них регрессируют (>70%) [48].
«Витагерпавак» (г. Москва) впервые разработана в России (в мировой практике подобного рода вакцин - нет), представляет собой лиофилизированный инактивированный антиген вируса простого герпеса 1 и 2 типов, выращенного на перевиваемой линии клеток почек зеленой мартышки - Vero B, разрешенных ВОЗ в качестве субстрата для производства вирусных вакцин. Десятилетний опыт применения вакцины «Витагерпавак» для внутрикожного введения в целях профилактики рецидивов герпетической болезни, свечевой вакцины по оригинальной прописи на территории Российской Федерации выявил высокую эффективность специфической профилактики рецидивов ХГИ [3]. Максимальное сохранение генетической последовательности ДНК - вируса в вакцине «Витагерпавак» обеспечивает высокую специфическую активность вакцины. Вакцина, разработанная в ФГБУ НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН и прошедшая клинические испытания, используется в лечебной практике с 1985 г. Ранее производство препарата осуществлялось на Одесском предприятии бакпрепаратов, с 1994 г. - и в Институте вакцин и сывороток Минздрава России (Санкт-Петербург), а с 2005 г. - в Москве фирмой «Витафарма». Курс вакцинации состоит из 5 внутрикожных инъекций 0,2 мл препарата с интервалом 1 неделя. С целью профилактики рецидивов инфекции проводят два курса вакцинации в год в период отсутствия острых проявлений вирусного заболевания [4]. Однако специалисты наблюдают также отсутствие эффекта от применения вакцины «Витагерпавак». К примеру, исследователями было отмечено наличие слабовыраженного терапевтического эффекта или его отсутствие при лечении герпетической инфекции у довольно широкого диапазона пациентов от 11,6 %-42,5 % даже на фоне подготовительной противовирусной терапии, кроме того, рецидивы наблюдали у 41,0 %-52,5 % пациентов через 6 месяцев после вакцинотерапии [5; 13]. Таким образом, представленные данные неоднозначны, что требует дополнительного изучения механизмов влияния вакцины «Витагерпавак» на герпетическую инфекцию.
Интересными в клиническом плане являются противогерпетические вакцины на основе дендритных клеток. Так, Останин А. А. и соавт. (2011) опубликовали патент RU(11) 2 485 962(13) C1 [21], в котором представлены результаты исследования аутологичных IFN-α индуцированных дендритных клеток, нагруженных рекомбинантным антигеном вируса герпеса, которые вводят больному подкожно 2 курсами в комбинации с препаратом рекомбинантного интерлейкина-2 в качестве адъюванта, что позволило уменьшить число рецидивов и выраженность клинических проявлений герпесвирусной инфекции за счет индукции эффективного антиген-специфического клеточного иммунного ответа. Заявляемый способ иммунотерапии был применен у 7 больных с орофациальной локализацией герпесвирусной инфекции. Лечение проводили на фоне полной отмены противовирусных препаратов и каких-либо других иммуномодуляторов. У больных регистрировалось достоверное уменьшение числа обострений. При этом у 3 пациентов в период 6-месячного наблюдения не было зарегистрировано ни одного обострения, а у 4-х, имевших рецидивы, обострения протекали в более легкой форме с меньшей площадью высыпаний и менее выраженной интоксикацией [18]. Следует сделать вывод, что предлагаемый способ лечения и профилактики герпетической инфекции является весьма перспективным и требует дополнительных исследований.
Таким образом, мнения ученых о ключевом звене успешности вакцин расходятся: одни считают таковым гуморальные иммунные реакции (HSV - нейтрализующие антитела), а другие - клеточный иммунитет (CD4+ и CD8+ Т-клетки), имеющиеся вакцины-кандидаты могут послужить основой для дальнейших клинических исследований.
Рецензенты:
Беседнова Н.Н., д.м.н., профессор, главный научный сотрудник лаборатории иммунологии Федерального государственного бюджетного научного учреждения «Научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии имени Г.П. Сомова», г. Владивосток;
Хотимченко Ю.С., д.м.н., профессор, директор Школы биомедицины ФГОУ ВПО «Дальневосточный федеральный университет» Министерства образования Российской Федерации, г. Владивосток.
Библиографическая ссылка
Чепурнова Н.С., Маркелова Е.В., Яковлева Ю.В. ПЕРСПЕКТИВЫ ПРИМЕНЕНИЯ ПРОТИВОГЕРПЕТИЧЕСКИХ ВАКЦИН // Современные проблемы науки и образования. – 2015. – № 5. ;URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=22629 (дата обращения: 19.04.2024).