Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,791

ВОЗДЕЙСТВИЕ ПРИРОДНЫХ ЦЕОЛИТОВ НА СВЕРТЫВАЮЩУЮ СПОСОБНОСТЬ КРОВИ

Никулина Е.Г. 1 Зиновьева А.В. 1
1 БУ ВО Ханты-Мансийская государственная медицинская академия
Проведена интегральная оценка влияния цеолитов на состояние сосудистого компонента гемостаза. Моделирование необратимой окклюзии крупного магистрального сосуда (яремной вены) вызвало у животных контрольной группы ускорение постоянно протекающего внутрисосудистого свертывания крови. Одновременно произошло удлинение тромбинового времени на фоне прироста содержания антитромбина-III, что следует расценивать как компенсаторную реакцию на появление в кровотоке высоких концентраций тромбина. У животных, получавших цеолиты, все обозначенные сдвиги были выражены в меньшей степени или отсутствовали. Данные результаты свидетельствуют о том, что введение цеолитов не усиливает, а, наоборот, снижает антикоагулянтный потенциал сосудистой стенки и способность выделять ингибиторы активации тромбоцитов в ответ на стресс-воздействие.
цеолиты
гемостаз
необратимая окклюзия
1.Баркаган З.С. Пути совершенствования и пролонгации антитромботической профилактики и терапии // Гематол. и трансфузиол. – 2005. – Т. 50. – № 4. – С.
2. Белозерцева И.В. Руководство по использованию лабораторных животных для научных и учебных целей в СПбГМУ им. Акад. И.П. Павлова / Белозерцева И.В. [и др.]. - СПбГМУ им. Акад. И.П. Павлова: СПб., 2003. - 57 с.
3. Гагаро М.А. Коррекция природными цеолитами гомеостатических сдвигов при активации свертывания крови: дисс. … канд. биол. наук / Гагаро М.А. – Тюмень, 2007. – С. 138
4. Курцинь О.Я. Инструкция по приготовлению основной диеты для крыс / О.Я. Курцинь. - М. Институт питания АМН ССР. – 1952. 5 с.
5. Папаян, Л.П. Современное представление о механизме регуляции свертывания крови / Л.П. Папаян // Тромбоз, гемостаз и реология. – 2003. – № 2(14). – С. 7-11.
6. Полякова Е.А. Метод моделирования обратимой окклюзии средней мозговой артерии / Е.А. Полякова, Н.В. Дранишников, Т.Д Власов // Регионарное кровообращение и микроциркуляция. – 2004. Т. 3.
7. Соловьев В.Г., Никулина Е.Г., Зиновьева А.В. Изменения коагуляционного потенциала при эндогенной тромбинемии и их коррекция // Актуальные проблемы теоретической и прикладной биохимии: материалы Российской конференции, посвященной 80-летию со дня рождения Р.И. Лифшица. – Челябинск: ЧелГМА, 2009. – С. 138-140.
8. Conception-Rosabal B. Development and featuring of the zeolitic active principle FZ: A glucose adsorbent / B. Conception-Rosabal, G. Rodriguez-Fuents, R. Simon-Carballo // Zeolites. – 1997. – 19. – Р. 47-50.

Доказано, что независимо от причины, обуславливающей ускорение постоянно протекающего внутрисосудистого свертывания, основным его разрешающим фактором служит избыточное образование тромбина – сериновой протеазы, вызывающей коагуляционные превращения фибриногена, активацию клеток крови и плазменных ферментных систем. Усилия гемостазиологов до настоящего времени в большей степени были направлены на борьбу с последствиями усиленного тромбиногенеза – в клинической практике широко используются различные формы гепарина, обладающие прямым антикоагулянтным эффектом, и ингибиторы синтеза витамин К-зависимых факторов свертывания [1]. Лечебное применение известных антикоагулянтов в целях профилактики ограничено необходимостью их парэнтерального введения (гепарин), их кумулятивными свойствами (антивитамины К), необходимостью постоянного контроля за гемокоагуляцией, и, наконец, возможностью развития тромбоцитопении и гиперагрегабельности тромбоцитов. В многочисленных исследованиях, проведенных за последние десятилетия, была показана возможность снижения угрозы тромбообразования с помощью неспецифических воздействий, в частности, синтетическими и природными антиоксидантами. Профилактическое использование антиоксидантов ограничивает чрезмерное ускорение непрерывно протекающего свертывания крови до степени, которая может рассматриваться в условиях эксперимента и клиники как синдром диссеминированного внутрисосудистого свертывания (ДВС) крови. К субстанциям, антиоксидантные свойства которых доказаны, относятся и цеолиты – природные модуляторы селективных энтеро-доноро-сорбентных взаимодействий между их собственной минеральной структурой и сложным биохимическим конвейером желудочно-кишечного тракта. Антиоксидантная активность цеолитов обусловлена способностью улавливать свободные радикалы [8].

Экспериментальные и клинические наблюдения показали, что цеолиты, наряду с антиоксидантными свойствами, обладают ещё и широким спектром эффектов иного рода - иммуномодулирующим, регенераторным, антитоксическим, десенсибилизирующим, гепатопротекторным [3,7]. Вместе с тем крайне ограничены сведения о направленном воздействии цеолитов на процессы свертывания крови. Известно, что эффект цеолитов на биологические системы организма наиболее выражено проявляется в условиях реакций напряжения. Точками приложения цеолитов являются клетки крови и компоненты плазмокоагуляции.

В связи с этим целью данной работы стала интегральная оценка влияния цеолитов на свертывающую способность крови, точнее состояние сосудистого компонента гемостаза.

Материалы и методы: В эксперименте были использованы нелинейные белые крысы 3,5-месячного возраста, массой тела 180-220 г. Выбор животных был обусловлен:

1. Для крыс разработан и многократно апробирован оптимальный рацион питания, сбалансированный по важнейшим пищевым компонентам [4]

2. У крыс удобно отбирать пробы крови из яремной вены в количестве (до 4 мл на 100 г/ массы тела), достаточном для определения всех исследуемых показателей, не нарушая при этом гемостазиологических требований [2].

3. Изучение состояния гемостаза под влиянием разнообразных воздействий проводится в подавляющем большинстве случаев на этих животных.

Число крыс в группах сравнения составляло 12. Учитывая сезонные сдвиги гемостаза и его зависимость от метеофакторов, в каждую серию экспериментов включали контрольную группу [5]. Болезненные манипуляции производили, подвергая животных наркозу этоксиэтаном. Пробы крови брали в шприц из обнаженной овальным разрезом яремной вены, в симметричную вену осуществляли инъекции. Рану закрывали кожным швом (кетгут).

Изучаемыми субстанциями явились природные цеолиты – минералы вулканическо-пеплового происхождения Мысовского месторождения поймы реки Большая Люлья Березовского района Ханты-Мансийского автономного округа – Югры, относящиеся к каркасным алюмосиликатам, обладающие особо упорядоченным кристаллическим каркасом, полости которого заняты молекулами воды и, способными к перемещению, ионами.

Все экспериментальные процедуры выполнялись в полном соответствии с международными этическими нормами научных исследований.

Экспериментальные модели: Обратимую окклюзионную ишемию воспризводили, вызывая дозированное сдавление яремной вены [6]. Забор крови производили из симметричной вены через 4 минуты.

Необратимая окклюзионная ишемия моделировалась путем перевязки одной из яремных вен с забором крови из симметричной вены через 4 минуты.

Рис. 1 Устройство для фиксации средней мозговой артерии крысы [6]

Выбор дозы изучаемых субстанций

Животные содержались на смешанном сбалансированном рационе с оптимальным соотношением белков, липидов и углеводов, в состав суточных порций, которого вводили природные цеолиты в виде порошка в дозе 0,25 г/кг массы тела. Пероральное введение крысам цеолитов осуществляли в течение 10 суток – срок, достаточный для воссоздания должного эффекта без ущерба противосвертывающему потенциалу [3]. Дозы изучаемой субстанции для животных были адекватны рекомендуемым дозам для человека, не вызывающим токсических эффектов и неоднократно были апробированы ранее [7].

Лабораторные методы исследования

Состояние параметров коагуляционного гемостаза (протромбиновый индекс, тромбиновое время, активированное частичное (парциальное) тромбопластиновое время, содержание фибриногена) оценивали на коагулографе «Cormay» (Польша), определение активности антитромбина-III и растворимых комплексов мономерного фибрина проводили согласно инструкций к наборам фирмы «Технология-стандарт» (г. Барнаул). Определение показателей красной крови, проводили на гематологическом анализаторе «MaxM» фирмы «Coulter», США.

Результаты и обсуждение

Известно, что неповрежденные сосуды обладают тромборезистентностью – свойством, складывающимся из совокупности противосвертывающей, антиагрегационной, фибринолитической активностей и способности регулировать поступление в интравазальное пространство тромбопластических субстанций [6]. Не менее важно и то, как данное свойство изменяется в условиях реакций напряжения.

В связи с этим, мы изучили влияние цеолитов на коагулотропные свойства сосудистой стенки.

В первом опыте моделировалась ишемия путем необратимой окклюзии крупного магистрального сосуда. Для этого наркотизированным животным перевязывали одну из яремных вен и, ровно через 4 минуты, производили забор крови из симметричной вены. Как и ранее, часть животных получала за 10 дней до воздействия в составе рациона природные цеолиты. Ишемия вызвала у животных контрольной группы активацию гемостаза. На 27,7% укоротился протромбиновый индекс, и возросло содержание РФМК (в 3,3 раза). Существенно удлинилось тромбиновое время (на 164,5%), что сопровождалось увеличением содержания в плазме крови АТ-III. Таким образом, ишемия вызвала развитие ДВС-синдрома I стадии (еще отсутствует потребление ФГ и АТ-III, а удлинение ТВ можно связать, в том числе, с приростом продуктов паракоагуляции).

У животных, получавших цеолиты, все перечисленные выше сдвиги были менее выражены. Так, степень укорочения тромбопластинового времени составила лишь 9,9%, удлинения ТВ - 43,2%, а содержание РКМФ возросло в 1,5 раза.

Со стороны тромбоцитарного гемостаза наблюдались следующие изменения: у контрольных животных после воздействия на 23,6% выросло общее содержание клеток за счет прироста на 78,5% (в абсолютных значениях) активированных форм. Их относительное количество увеличилось на 20,2%. У крыс опытной группы содержание тромбоцитов выросло на 4%, абсолютное количество активированных форм - на 32,5% (что более чем в 2 раза ниже, чем в контроле), а относительное - лишь на 11,4%.

Таким образом, введение цеолитов ограничивает развитие эндогенной тромбинемии, вызываемой необратимой окклюзией крупного сосуда, провоцирующей ишемию тканей. Связан ли этот эффект с их прямым влиянием на свойства сосудов, то есть, на способность противостоять стресс-воздействиям, мы оценили во втором эксперименте.

Для его воспроизведения моделировалась обратимая окклюзия магистрального сосуда [6]. После воздействия из кубитальной вены отбирали кровь и оценивали параметры гемостаза. При этом часть животных в течение 10 дней до проведения опыта получала цеолиты.

Как оказалось, механическое воздействие привело в контрольной группе к удлинению на 17% тромбинового времени, на 49% - АЧТВ, и уменьшению ПТИ на 18%. Это сопровождалось приростом уровня фибриногена (на 37%) и AT-III (на 45%). Одновременно почти в 2 раза увеличилось количество тромбоцитов без существенного изменения соотношения активированных и неактивированных форм.

Тенденции в опытной группе оказались схожими, но, вместе с тем, степень гипокоагулемии была менее выражена (удлинение АЧТВ на 19%, уменьшение ПТИ - на 8%). Очевидно, это связано с меньшим приростом содержания AT-III (на 25%). Количество тромбоцитов достоверно не изменилось, но наблюдался сдвиг в сторону относительного увеличения активированных форм.

Заключение

Данные результаты свидетельствуют о том, что введение цеолитов не усиливает, а, наоборот, снижает антикоагулянтный потенциал сосудистой стенки и способность выделять ингибиторы активации тромбоцитов в ответ на стресс-воздействие. Учитывая сведения о том, что реакция напряжения воспринимается как сигнал возможного повреждения, можно предположить, что, ограничивая величину индукции стресса, цеолиты уменьшают необходимость существенной интенсификации антистрессорных механизмов. Представляется важным, и то, что эти механизмы включаются лишь при более выраженном возмущающем воздействии (опыт с ишемией).

Рецензенты:

Будук – оол Л.К., д.б.н., профессор кафедры анатомии, физиологии и безопасности жизнедеятельности, ФГБОУ ВПО «Тувинский государственный университет», г. Тува;

Лихачев С.Ф., д.б.н., профессор, декан факультета экологии ФГБОУ ВПО «Челябинский государственный университет», г. Челябинск.


Библиографическая ссылка

Никулина Е.Г., Зиновьева А.В. ВОЗДЕЙСТВИЕ ПРИРОДНЫХ ЦЕОЛИТОВ НА СВЕРТЫВАЮЩУЮ СПОСОБНОСТЬ КРОВИ // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=16658 (дата обращения: 08.12.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074