Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,737

БЕЗОПАСНОСТЬ И ФАРМАКОКИНЕТИКА НОВОЙ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ ДИИНДОЛИЛМЕТАНА В ВИДЕ СУППОЗИТОРИЕВ

Киселев В.И. 1 Друх В.М. 1 Кузнецов И.Н. 2 Муйжнек Е.Л. 3 Пчелинцева О.И. 1
1 ФГОУ высшего профессионального образования «Российский университет дружбы народов»
2 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования «Московский государственный медико-стоматологический университет им. А.И. Евдокимова» Министерства здравоохранения Российской Федерации
3 Закрытое акционерное общество «МираксБиоФарма»
Проведено изучение безопасности и фармакокинетики нового препарата Цервикон-ДИМ на основе дииндолилметана (ДИМ), представленного в лекарственной форме «суппозитории вагинальные». В исследование безопасности было включено19 пациенток с диагнозом CIN1-2. Экспериментальная группа получала препарат Цервикон-ДИМ в дозе 100 мг ДИМ в суткиили 200 мг ДИМ в сутки в течение 90 дней. В ходе исследования в опытной группе было зафиксировано 7 нежелательных явлений (НЯ)и 3 НЯ в контрольной группе. Все зарегистрированные НЯ имели незначительную выраженность. Связь НЯ с приемом исследуемого препарата была в основном оценена как маловероятная. Серьезных НЯ ни в одной группеотмечено не было.На 10 здоровых пациентках было показано, чтопрепарат Цервикон-ДИМ не обладает системнойбиодоступностью, что дополнительно увеличивает безопасность лечения.
клинические исследования.
фармакокинетика
безопасность
CIN
суппозитории
3´-дииндолилметан (ДИМ)
3
1. Киселев В.И. Вирусы папилломы человека в развитии рака шейки матки.– М: Димитрейд График Групп,2004.– С. 180.
2. Auborn K.J.The interaction between HPV infection and estrogen metabolism in cervical carcinogenesis/Auborn K.J., Woodworth C., DiPaolo J.A. et al.//Int. J. Cancer.– 1991.– Vol. 49. - № 6. – P. 867-9.
3. Chung S.H.Requirement for estrogen receptor α in a mouse model for human papillomavirus-associated cervical cancer /Chung S.H., Wiedmeyer K., Shai A. et al. //Cancer Res.– 2008. – Vol. 68. - № 23. – P. 9928-34.
4. Morimoto Y., Conroy S.M., Pagano I.S., et al. Urinary estrogen metabolites during a randomized soy trial/Morimoto Y., Conroy S.M., Pagano I.S. et al. //Nutr. Cancer.– 2012.– Vol. 64. - № 2. – P. 307-14.
5. Banerjee S. Attenuation of multi-targeted proliferation-linked signaling by 3,3'-diindolylmethane (DIM): From bench to clinic/Banerjee S., Kong D., Wang Z. et al. // Mutat. Res. – 2011.– Vol. 728. -№1-2.– P. 47-66.
6. Zhu J. Anti-proliferative and pro-apoptotic effects of 3,3'-diindolylmethane in human cervical cancer cells/Zhu J., Li Y., Guan C. et al. // Oncol. Rep.– 2012.– Vol. 28. - №3.– P.1063-8.
7. Carter T.H. Diindolylmethane alters gene expression in human keratinocytes in vitro/Carter T.H., Liu K., Ralph W.J. et al.// J. Nutr.– 2002. – Vol. 132. - №11.– P.3314-24.
8. Chen D.Z. Indole-3-Carbinol and Diindolylmethane Induce Apoptosis of Human Cervical Cancer Cells and in Murine HPV16-Transgenic Preneoplastic Cervical Epithelium/Chen D.Z., Qi M., Auborn K.J. et al.// J. Nutr. – 2001.– Vol. 131. - №12.– P.3294-302.
9. Sepkovic D.W. Diindolylmethane inhibits cervical dysplasia, alters estrogen metabolism, and enhances immune response in the K14-HPV16 transgenic mouse model/Sepkovic D.W., Stein J., Carlisle A.D.et al.// Cancer Epidemiol. Biomarkers Prev.– 2009.– Vol. 18. -№11.– P.2957-64.
10. Zeligs M.A. Absorption-enhanced 3,3’-diindolylmethane: human use in HPV-related, benign and pre-cancerous conditions/Zeligs M.A., Sepkovic D.W., Manrique C.// Proc. Am. Assoc. Cancer Res.– 2003.– Vol. 43.– P.3198.
11. КиселевВ.И. Суппозиториивагинальныенаоснове 3,3’-дииндолилметана (метиндола) (RU 2318510).
12. Castañon A. Effect of diindolylmethane supplementation on low-grade cervical cytological abnormalities: double-blind, randomised, controlled trial/Castañon A., Tristram A., Sasien P.et al. // Br J Cancer.– 2012.– Vol. 106. - № 1.– P. 45–52.
13. Reed G.A.Single-dose pharmacokinetics and tolerability of absorption-enhanced 3,3'-diindolylmethane in healthy subjects /Reed G.A., Sunega J.M., Sullivan D.K., et al. // Cancer Epidemiol. BiomarkersPrev.– 2008.– Vol. 17. - №10. – P.2619-24.

Цервикальная интраэпителиальная неоплазия (CIN), или дисплазия шейки матки, характеризуется интенсивной пролиферацией клеток эпителия шейки матки с появлением в них атипических изменений. Различают легкую, умеренную и тяжелую форму дисплазии (CIN1, CIN2, CIN3, соответственно). При этом лечение данной патологии направлено на предупреждение процесса озлокачествления с целью не допустить развитие рака шейки матки (РШМ).

Главным фактором патогенеза CINсчитается инфицирование вирусом папилломы человека (ВПЧ). ДНК ВПЧ кодирует синтез онкобелков Е6 и Е7, отличающихся множественностью туморогенных функций.Во-первых, вирусные онкобелки индуцируют переход дифференцированных клеток цервикального эпителияв S-фазу клеточного цикла, что запускает ихактивную пролиферацию, ведущую к развитию CIN. Во-вторых, онкобелкиE6 и E7 обладают выраженным иммуносупрессивным действием. В-третьих, ВПЧ-онкобелки способны вызывать  мутации и аномальные эпигенетические изменения, приводящие к изменению экспрессии генов ибелков, отвечающих за противоопухолевую защиту и процессы ДНК-репарации, что вызывает прогрессию CIN1-2 в СIN3 и далее в РШМ [1].

В патогенезе папилломавирусной инфекции, приводящей к усилению пролиферациивирус-инфицированных клеток, значительную роль играют женские половые гормоны - эстрогены, которые стимулируют клеточный роств эстроген-чувствительных тканях [2, 3]. В настоящее время известно, что соотношение двух основных метаболитов эстрадиола: физиологического 2-гидроксиэстрона(2-ОНЕ1) к проканцерогенному16α-гидроксиэстрону (16α-ОНЕ1) является универсальным биомаркером при определении риска возникновения и прогноза течения эстроген-зависимых диспластических и неопластических процессов [4].

Таким образом, приразвитииCIN необходимо наличие и взаимодействие как минимум трех таких факторов какактивация метаболических механизмов конверсии эстрадиола в 16α-ОНЕ1, активнаяэкспрессия онкобелков Е6 и Е7 ВПЧ, а также индукция множественных повреждений хромосомной ДНК инфицированной клетки, завершающих процесс трансформации нормальной клетки в атипичную.

Известно, что3,3'-дииндолилметан (ДИМ)обладает способностью одновременно блокировать множество молекулярных механизмов, стимулирующих патологическую клеточную пролиферацию и последующий канцерогенез. Показано, что в условиях invitro и invivoДИМв тканях шейки маткистимулирует апоптоз опухолевых клеток, подавляет воспаление, оказывает антиангиогенный и антиметастатический эффекты [5].

В доклинических исследованияхпродемонстрированаантипролиферативная активность индол-3-карбинола (И3К) - метаболического предшественника ДИМ -вВПЧ-трансформированных клетках цервикального эпителия, а в пилотных клинических исследованиях была показанаспособность И3К повышать соотношение 2-ОНЕ1/16α-ОНЕ1в сторону 2-ОНЕ1 [6-8]. Кроме того, установлено, что И3К, блокирует эстрадиол-зависимуюактивацию онкогена Е7,в результате чего снижается уровень экспрессии онкобелка Е7 и тормозится гормон-зависимая пролиферациявирус-инфицированных клеток [8].

В работеBradlowисоавт. 2009 г. [9] на К14-ВПЧ16-трансгенной мышиной модели была доказана способность ДИМ,получаемого животными с пищей, подавлять развитие цервикальных дисплазий и тормозить их переход в РШМ. Наконец, в пилотных клинических исследованиях при пероральном приеме высоких доз формулированного BioResponse-DIM (BR-DIM), представляющего собойкристаллический ДИМ в микродисперсном крахмале и имеющего в 1,5-2 раза большую биодоступность по сравнению с неформулированным ДИМ, наблюдалось разрешение умеренных и тяжелых дисплазий шейки матки[10].

Поскольку этиологический агент CIN - ВПЧ - размножается и персистирует только в эпителиальных клетках шейки матки, местно применяемая фармакологическая композиция на основе ДИМ должна иметь преимущество перед пероральными лекарственными формами за счет достижения более высоких концентрацийДИМ в пораженной ткани. Кроме того,при местном применении препаратабудет снижено егосистемное воздействие, что дополнительно увеличит безопасностьлечения.

С учетом вышеприведенных фактов был создан препарат Цервикон-ДИМ(суппозитории вагинальные), содержащий 100 мг3,3'-дииндолилметана [11]. Целью данного исследования былаоценка безопасности исследуемого препарата Цервикон-ДИМ (3,3'-дииндолилметан) у женщин с CIN1-2, а также изучение его системной биодоступностипри интравагинальном применении у здоровых женщин.

Материалы и методы

Тестовые композиции.Суппозитории вагинальные Цервикон-ДИМ(3,3'-дииндолилметан) (100 мг ДИМ на суппозиторий, ЗАО «ИльмиксГрупп», Россия), содержащие липофильную основу, поливинилпирролидон и бутилгидроксианизол; суппозитории с плацебо.

Пациенты и лечение.В исследование безопасности препарата Цервикон-ДИМбыло включено 19 пациенток в возрасте 18-39 лет с гистологически верифицированной цервикальной интраэпителиальной неоплазией 1-2 степени (CIN1-2).

За 45 дней до начала исследования испытуемые проходили скрининговое обследование, включающее сбор анамнеза, физикальный осмотр, кольпоскопию, биопсию шейки матки, клинический и биохимический анализ крови. Из исследования исключались пациентки с инфекцией мочеполовой системы в фазе активного воспаления, заболеваниями сердечно-сосудистой и нервной системы, почечной или печеночной недостаточностью, а также имеющие злокачественные новообразования любой локализации, цервикальную интраэпителиальную неоплазию 3-ей степени (CIN3) или CIS (cancerinsitu). Площадь участков дисплазии цервикального эпителия не должна была быть менее 1,5 см2. В качестве критериев исключения из исследования были также приняты положительные тесты RW или ВИЧ, беременность и лактация, злоупотребление алкоголем, наркотическая или лекарственная зависимость. Не допускалось использование других экспериментальных препаратов за 30 дней до приема первой дозы исследуемого препарата.

После подписания информированного согласияиспытуемыхраспределили на две группы- экспериментальную (12 пациенток) и контрольную (7 пациенток).Двум пациенткам из экспериментальной группыисследуемый препарат назначалсяв дозе 100 мг ДИМ в сутки(1 суппозиторий с плацебо + 1 суппозиторий исследуемогопрепаратав сутки) и десяти пациенткам изэкспериментальной группы - в дозе 200 мг ДИМ в сутки (1 суппозиторийисследуемогопрепарата2 раза в сутки). Семь пациентокиз второй группыполучали плацебо (1 суппозиторий с плацебо 2 раза в сутки).Активная терапия проводилась в течение 90 дней. Исследование предусматривало три контрольных визита: в начале исследования, через месяц и через 90 днейпосле начала исследования. Объединение в одну группу пациенток, принимавших разные дозы экспериментального препарата, было связано с небольшим числом пациенток, включенных в исследование на промежуточном этапе.

Оценка безопасности и переносимости терапии проводилась клинически и с помощью инструментально-лабораторных методов исследования. Все нежелательные явления (НЯ), наблюдавшиеся в процессе исследования, регистрировались с учетом иххарактера, степени выраженности, длительности и установленнойсвязи с приемомисследуемого препарата. Мониторинг безопасности исследуемой терапии проводился на основании клинического анализа крови, общего анализа мочи, биохимического анализа крови (определение уровня глюкозы, белка, креатинина, общего билирубина, активности аспартатаминотрансферазы (АСТ), аланинаминотрансферазы (АЛТ)).Проводилось измерение температуры тела,частоты сердечных сокращений (ЧСС), частоты дыхательных движений (ЧДД), систолического и диастолического артериального давления (САД и ДАД), регистрация ЭКГ.

Исследование фармакокинетики препарата Цервикон-ДИМ.Для исследования фармакокинетики препаратабыло отобрано10 здоровых испытуемых женского пола. Введение суппозиториев препарата Цервикон-ДИМосуществлялось интравагинально, натощак, в дозировке 400 мг ДИМ(4 суппозитория по 100 мг ДИМ с промежутком в 30 минут). Добровольцы находились в гинекологическом кресле и препарат вводился врачом-гинекологом. Первый прием пищи разрешался через 4 часа после введения препарата.

Сбор и подготовка образцов крови. Пациенткам был установлен кубитальный катетер, через который проводился забор проб крови. Катетер удалялся не позднее чем через 24 часа после постановки. До применения препарата отбиралась исходная проба крови. Повторные заборы крови производились в пластиковые пробирки (содержащие гепарин) через 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 12 и 24 ч после введения последнегосуппозитория. Пробы крови центрифугировали (центрифугаОПн-8 УХЛ4.2, Россия) в течение 10 минут при 3000 об\мин, после чегоплазму переносили в чистые пробирки, замораживали и хранили до начала проведенияанализа при температуре -35ºС.

Количественное определение в крови. Определение концентрацииДИМв образцах плазмы крови проводилиметодом ВЭЖХ на колонке EclipseXDBC18 (150´2,1 мм, 5 мкм) (Agilent, США) на жидкостном хроматографе SystemGoldHPLC (Beckman, США) с УФ-спектрометрическим детектированием (280 нм).В качестве элюента использовалиацетонитрил. Скорость элюирования составляла 1,0 мл/мин. Хроматографирование проводили при температуре 20°С.

Статистическая обработка.Для выявления зависимости между частотой НЯ и группой исследованияиспользовали критерий хи-квадрат (c2). Оценка 95% доверительных интерваловпроводилась с использованием метода Клоппера-Пирсона. Статистическая обработка результатов исследования проводилась с помощью программыStatistica 8.0.

Результаты

Всегов ходе исследования в опытной и контрольной группахбылозафиксировано 10 нежелательных явлений (НЯ) у 7 испытуемых.При этомв группе пациенток, получавших исследуемыйпрепарат,через месяцпосле начала терапии было зафиксировано 4 НЯ, через три месяца от начала исследования - еще3 НЯ. В группе испытуемых, получавших плацебо, в течение недели после начала наблюдения было зафиксировано 1 НЯи через месяц -еще2 НЯ (Таблица 1).Случаи развития нескольких НЯ зафиксированы у двух испытуемых, у одной испытуемой одно и тоже НЯ было зафиксировано на двух визитах.

 

Таблица 1  Количество нежелательных явлений,отмеченных в ходе визитов 1-3 в группах исследования.

Проявление НЯ на визитах

Количество НЯ в группе

Цервикон-ДИМ

(n=12)

Плацебо

(n=7)

Всего

(n=19)

НЯ (1-й день)

Нет

12 (100,0%)

6 (86,0%)

18 (95,0%)

Да

0 (0,0%)

1 (14,0%)

1 (5,0%)

НЯ (30-й день)

Нет

8(67,0%)

5 (71,0%)

13 (68,0%)

Да

4 (33,0%)

2 (29,0%)

6 (32,0%)

НЯ (90-й день)

Нет

9(75,0%)

7(100,0%)

16 (84%)

Да

3(25,0%)

0 (0,0%)

3(16 %)

 

В ходе визитов 2-3 в экспериментальной группе и группе плацебо регистрировались следующие типы НЯ: обильные "хлопьевидные" выделения из половых путей, задержка менструации на 14 дней, повышение активности ферментов АЛТ и АСТ, симптомы ОРВИ, насморк, жжение и зуд во влагалище, жидкий стул, повышение СОЭ. Распределение НЯ в исследуемых группах по типу и количеству представлено в Таблице 2.

Таблица 2  Типы и количествонежелательных явлений, отмеченных в ходе визитов 2-3 в группах исследования.

Тип НЯ

(0-й - 90-й дни)

Количество НЯв группе

95% доверительный интервал

Цервикон-ДИМ

(n=12)

Плацебо

(n=7)

Всего

(n=19)

Нет

6 (50%)

4 (57,1%)

10 (52,6%)

28,9%-75,6%

Обильные "хлопьевидные выделения" из половых путей

1 (8,3%)

0 (0%)

1 (5,3%)

0,1%-26,0%

Задержка менструации

1 (8,3%)

0 (0%)

1 (5,3%)

0,1%-26,0%

Повышение активности ферментов АЛТ и АСТ

1 (8,3%)

1 (14,3%)

2 (10,5%)

1,3%-33,1%

Симптомы ОРВИ, насморк

1 (8,3%)

0 (0%)

1 (5,3%)

0,1%-26,0%

Жжение и зуд во влагалище

2 (16,7%)

0 (0%)

2 (10,5%)

1,3%-33,1%

Жидкий стул в первые три дня от начала исследования

0 (0%)

1 (14,3%)

1 (5,3%)

0,1%-26,0%

Повышение СОЭ

0 (0%)

1 (14,3%)

1 (5,3%)

0,1%-26,0%

            Для каждого из визитов по критерию c2 было проведено сравнение доли НЯвисследуемых группах. Значимость критерия c2 для визита 1 (1-й день)составила 0,368,для визита 2 (30-й день)- 0,621, для визита 3(90-й день)- 0,385. Таким образом,не было выявлено корреляции между группами исследования и наличием НЯ, то есть НЯ на фоне применения препарата Цервикон-ДИМ развивались не чаще, чем на фоне применения плацебо.

В ходе исследования не было отмечено клинически значимого изменения параметров жизненно важных функций организма (САД, ДАД, ЧСС, ЧДД, температуры тела). У пациенток экспериментальной группы не быловыявлено статистически значимых изменений содержания гемоглобина, эритроцитов, тромбоцитов и лейкоцитовв крови.

Необходимо отметить, чтонастоящий отчет о результатах исследования является промежуточным и в нем имеется ряд пропущенных значений для некоторых исследуемых показателей (общий белок, альбумин, креатинин, глюкоза, общий билирубин, АЛТ, АСТ,PQ, QRS,QT). В связи с этим для некоторых пациенток не представляется возможным сравнить динамику указанных показателей от начального скрининга до последнего визита.Долгосрочную безопасность применения препарата Цервикон-ДИМ можно будет оценить после получения окончательных результатов.

Отметим, что случаи смертей, а также серьезные нежелательные реакции в ходе настоящего исследования отмечены не были. Связь наблюдавшихся НЯ с приемомпрепарата была расценена как сомнительная в трех случаях, как возможная- в трех случаях, как вероятная- в двух случаях. Связь наблюдавшихся НЯс приемомпрепарата присутствовала в одном случае. Еще в одном случае связь имевшихся у пациенток НЯс приемомпрепарата не подлежала классификации.

В четырех случаях из десяти было проведено медикаментозное лечение НЯ.

На основании полученных и проанализированных данных можно сделать вывод о благоприятном профиле безопасности препарата Цервикон-ДИМ.

Исследование фармакокинетики препарата Цервикон-ДИМ.Динамика концентрации ДИМ в плазме крови исследоваласьна 10 здоровых пациенткахпосле интравагинального введения препарата в дозе 400 мг ДИМ (4 суппозитория по 100 мг ДИМкаждый). Полученные результаты представлены в Таблице 3.

Таблица 3   Динамика концентрации дииндолилметана в плазме крови здоровых пациенток.

Время забора крови после введения препарата (часы)

Концентрация ДИМ (нг/мл)

в образцах крови здоровых пациенток

001

002

003

004

005

006

007

008

009

010

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

0

1

5

0

0

5

0

0

0

0

0

0

2

0

0

0

5

0

0

0

0

0

0

3

0

0

0

5

0

0

0

0

0

0

4

0

0

0

9

0

0

0

0

0

0

5

0

0

0

8

0

0

0

0

0

0

6

0

0

0

9

0

0

0

0

0

0

7

0

0

0

9

0

0

0

0

0

0

8

0

0

0

9

0

0

0

0

0

0

12

0

0

0

8

0

0

0

0

0

0

24

0

0

0

*

0

0

0

0

0

0

 

 

 

 

 

 

 

 

 

0 - ДИМ не обнаружен, * проба отсутствовала

 

Нами установлено, что при интравагинальном применениисуппозиториев Цервикон-ДИМ у здоровых пациенток активное веществоДИМпрактически не попадает в системный кровоток. ДИМв концентрациях до 9 нг/мл в плазме кровирегистрировался лишь у одной пациентки. На основании полученных данных можно сделать вывод о том, что препарат Цервикон-ДИМ не обладает системной биодоступностью.

Обсуждение

По результатам проведенного исследования была показана хорошая переносимость препарата Цервикон-ДИМ, произведенного на основе активной субстанции ДИМ, при интравагинальном применении у женщин с диагнозом CIN1-2.

Полученные данные подтверждают результаты исследований, проведенных ранее другими авторами. Так в исследовании 2012 г, проведенномCastañonисоавт.[12], ежедневный пероральный прием 150 мг формуляцииBR-DIM в течение 6 месяцев хорошо переносилсяпациентками с легкими поражениями эпителия шейки матки (CIN1). При этом наиболее частым наблюдавшимсянегативным эффектомбыло потемнение мочи, обусловленное присутствием в ней безвредного побочного продукта. Кроме этого,было зарегистрировано несколько незначительных НЯ, таких как диарея, головные боли и тошнота.Однако статистически значимых различий между количеством НЯ вэкспериментальной и контрольной группахотмечено не было.В другом, более раннем исследовании безопасности BR-DIMна здоровых добровольцах было показано, что однократный пероральный прием BR-DIM в дозах до 200 мг не вызывает отрицательных побочных эффектов. При приеме дозы 300 мгBR-DIMодин из шести пациентов сообщил о легкой тошноте и головной боли, ещеу одного была зарегистрирована рвота, которая была оценена как вероятно связанная с приемомисследуемогопрепарата[13].

     В нашем исследовании зафиксированныеНЯ имели незначительную выраженность, а связь с приемом препарата была в основном оценена как маловероятная.        

Помимо исследования безопасности нами было показано отсутствие системной биодоступности активного веществаДИМпри интравагинальном применении препарата Цервикон-ДИМ, что подтверждает его высокую биодоступность при местных аппликациях.

Для последующего изучения эффективности препарата Цервикон-ДИМ, а также для расширенного исследования показателей безопасности планируется проведение дальнейших клинических исследований.

Научно-исследовательские и опытно-конструкторские работы были выполнены в ФГБОУ ВПО «Российский университет дружбы народов» в рамках исполнения комплексного проекта по созданию высокотехнологичного производства «Производство лекарственных средств на основе биотехнологий для лечения социально-значимых заболеваний», финансируемого Министерством образования и науки Российской Федерации в соответствии с постановлением Правительства РФ №218.

Рецензенты:

Миронова Э.М., д.б.н., главный научный сотрудник отдела клинических исследований ФГБУ «МНТК "Микрохирургия глаза" им. акад. С.Н. Федорова», г. Москва;

Провалова Н.В., д.м.н., заместитель главного врача по научной работе НМУ «Лечебно-диагностический центр, г. Томск.


Библиографическая ссылка

Киселев В.И., Друх В.М., Кузнецов И.Н., Муйжнек Е.Л., Пчелинцева О.И. БЕЗОПАСНОСТЬ И ФАРМАКОКИНЕТИКА НОВОЙ ФАРМАЦЕВТИЧЕСКОЙ КОМПОЗИЦИИ НА ОСНОВЕ ДИИНДОЛИЛМЕТАНА В ВИДЕ СУППОЗИТОРИЕВ // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=16081 (дата обращения: 23.08.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.252