Электронный научный журнал
Современные проблемы науки и образования
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 0,791

АНАЛИЗ ВКЛАДА ПОЛИМОРФИЗМОВ ГЕНОВ ФОЛАТНОГО ОБМЕНА В ГЕНЕТИЧЕСКУЮ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬ К РАЗВИТИЮ ПРЕЭКЛАМПСИИ

Тверская А.В. 1
1 ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»
В статье приведены результаты исследования ассоциаций молекулярно-генетических маркеров генов фолатного цикла с развитием преэклампсии у беременных русской национальности, являющихся уроженками Центрального Черноземного региона России. Проведен комплексный анализ частот аллелей и генотипов у беременных с преэклампсией и контрольной группы (беременных с нормально протекающей беременностью). В группу беременных с преэклампсией вошли 315 пациенток, контрольную группу составили 179 беременных без преэклампсии. Установлено, что наибольшие различия частот генетических полиморфизмов генов фолатного обмена у беременных с преэклампсией и контрольной группы выявлены по +1298АС MTHFR (35,74% и 41,52%, соответственно), +1298СС MTHFR (20,96% и 13,45%), MTR+2756GG (5,35% и 2,41%), +1420ТТ SHMT1 (14,14% и 8,72%), IVS6-68CT TYMS (8,36% и 4,24%).
преэклампсия
беременность
гены фолатного обмена
1. Айламазян Э.К. Гестоз: теория и практика [Текст] /Э.К.Айламазян, Е.В. Мозговая.– М.: А36 МЕДпресс информ, 2008. – 272 с. : ил.
2. Баев О. Р. Гестоз: клиника, диагностика, акушерская тактика и интенсивная терапия: монография [Текст]/Под общ. ред. А. Н. Стрижакова, А. И. Давыдова, З. М., Мусаева Л. И. М.: Инфомед, 2007. -79 с.
3. Баранов В.С. Генетический паспорт – основа индивидуальной и предиктивной медицины [Текст]/В.С. Баранов – СПб.: Издательство Н-Л, Санкт-Петербург, 2009.
4. Радзинский В. Е. Проблемы гестоза и подходы к их решению / В.Е. Радзинский,Т. В. Галина - //Казанский медицинский журнал. 2007, т. 88, № 2.- С. 114–117.
5. Серов В.Н. Гестоз — современная лечебная тактика /В.Н.Серов //РМЖ. —2005. — Т. 13, № 1 (225). — С. 2–7.
6. Сидорова И.С. Молекулярно-генетические маркеры в оценке степени тяжести гестоза /И.С. Сидорова, О.И. Гурина и др.//Акушерство и гинекология.- 2008.- №4.-С. 6-11.
Преэклампсия (ПЭ) - это патологическое состояние, которое осложняет течение беременности и характеризуется нарушением нервной, сосудистой, иммунной, эндокринной систем и системы гемостаза, а также, изменениями в функциях жизненно-важных органов (почек, печени, головного мозга, различными метаболическими изменениями адаптационных систем организма [1].Существует более 30 аргументированных этиопатогенетических суждений о возникновении преэклампсии, однако, к сожалению, ни одно из них не объясняет однозначно и в полной мере многообразие происходящих при данном осложнении беременности морфофункциональных изменений и клинических манифестаций [4, 5].Важным маркером развития осложнений беременности и её неблагоприятного исхода служит гомоцистеин. Гипергомоцистеинемия во время беременности приводит к таким осложнениям, как: преэклампсия, привычная потеря плода, плацентарная недостаточность, задержка развития плода [2].Исследования, посвящённые этиологии и патогенезу преэклампсии, свидетельствуют, что существует прямая зависимость риска данного осложнения беременности от низкого содержания фолатов и гипергомоцистеинемии. «Семейная» преэклампсия или преэклампсия в анамнезе сопряжена с дефицитом фолатов и высоким уровнем гомоцистеина, участвующих в развитии преэклампсии [3].

Цель исследования: изучить клиническое значение полиморфных генов-кандидатов фолатного обмена при преэклампсии.

Материалы и методы

Проведено изучение 501 женщины: 315 беременных с диагнозом преэклампсия и 179 женщин с нормальным течением беременности (контрольная группа). В настоящее исследование вошли лица русской национальности, не имеющие между собой родства, являющиеся уроженками Центрально-Черноземного региона России. Клинико-лабораторное обследование женщин основной и контрольной группы проводилось на сроке родоразрешения на базе Перинатального центра Белгородской областной клинической больницы им. Святителя Иоасафа.

В основную группу включены беременные с диагнозом преэклампсия. Диагноз преэклампсии ставился на основании генерализованных отеков, артериальной гипертензии и протеинурии. Средний возраст женщин с ПЭ составил 27,19±6,4 лет (варьировал от 18 до 44 лет).

В контрольную группу вошли беременные без диагноза преэклампсия в возрасте от 19 до 41 года (средний возраст женщин составил - 26,71±6,36 лет) (р>0,05). Таким образом, контрольная группа беременных не отличалась от основной группы по полу, месту рождения, возрасту и национальности.

Клинико-лабораторное обследование проводилось на базе перинатального центра Белгородской областной клинической больницы им. Св. Иоасафа. Материалом для исследования послужила венозная кровь, полученная в объеме 8-9 мл из локтевой вены пробанда. Забор венозной крови производили в пробирки с консервантом, содержащим 0,5М раствор ЭДТА (рН=8.0).Выделение геномной ДНК из периферической крови проведено методом фенольно-хлороформной экстракции. Анализ локусов MTHFR +677C>T, MTHFR +1298A,TYMS-1053C>T, TYMS IVS6-68C>T, TYMS -1122А>G, SHMT1 +1420C>T, MTR+1166А>G, MTRR +66А>G генов фолатного обмена осуществлялся с помощью полимеразной цепной реакции (ПЦР) с использованием стандартных олигонуклеотидных праймеров и зондов с последующим анализом полиморфизма методом детекции TaqMan зондов. Расчет фенотипических и генных частот проводили стандартными методами.Выбор данных генетических полиморфизмов обусловлен их возможной вовлеченностью в патогенез преэклампсии [6].

Результаты исследования и их обсуждение

Популяционно - генетический анализ распределения изучаемых полиморфных маркеров ферментов фолатного цикла проводили на выборке женщин с диагнозом ПЭ и беременных без ПЭ (контрольной группы). Результаты генотипирования женщин с диагнозом ПЭ и контрольной группыпо локусам MTHFR +677C>T, MTHFR +1298A,TYMS -1053C>T, TYMS IVS6-68C>T, TYMS -1122А>G, SHMT1 +1420C>T, MTR+1166А>G, MTRR +66А>G, представлены в таблицах 1 и 2.

Таблица 1

Распределение генотипов, наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготности, индекса фиксации полиморфных маркеров ферментов фолатного цикла у беременных с преэклампсией и в контрольной группе

Локусы

показатели

Беременные с преэклампсией

(n=322)

Беременные без преэклампсии

(n=179)

 

MTHFR +677C>T

(rs 1801133)

ΣN

302

177

 

N0 (NE)

СС

141 (144,64)

82 (84,78)

СТ

136 (128,72)

81 (75,44)

ТТ

25 (28,64)

14 (16,78)

χ2(HWE) (p)

0,97 (>0,05)

0,96 (>0,05)

H0 (HE)

0,45 (0,43)

0,46 (0,43)

D (t)

+0,06 (0,75)

+0,07 (0,75)

 

TYMS -1053C>T

(rs 699517)

ΣN

305

173

 

N0 (NE)

CC

160 (157,25)

89 (91,77)

СТ

118 (123,50)

74 (68,46)

TT

27 (24,25)

10 (12,77)

χ2(HWE) (p)

0,61 (>0,05)

1,13 (>0,05)

H0 (HE)

0,39 (0,40)

0,43 (0,40)

D (t)

-0,04 (0,56)

+0,08 (0,74)

 

SHMT1+1420C>T

(rs 1979277)

ΣN

297

172

 

N0 (NE)

CC

136 (128,69)

86 (85,93)

CT

119 (133,62)

71 (71,35)

TT

42 (34,69)

15 (14,83)

χ2(HWE) (p)

3,56 (>0,05)

0,004 (>0,05)

H0 (HE)

0,40 (0,45)

0,41 (0,41)

D (t)

-0,11 (1,59)

-0,005 (0,05)

 

MTR +2756A>G

(rs 1805087)

ΣN

299

166

 

N0 (NE)

AA

183 (181,57)

99 (102,59)

АG

100 (102,86)

63 (55,82)

GG

16 (14,57)

4 (7,59)

χ2(HWE) (p)

0,23 (>0,05)

2,75 (>0,05)

H0 (HE)

0,33 (0,34)

0,38 (0,34)

 

MTRR +66A>G

(rs 1801394)

ΣN

302

171

 

N0 (NE)

GG

106 (101,99)

55 (53,89)

AG

139 (147,02)

82 (84,21)

AA

57 (52,99)

34 (32,89)

χ2(HWE) (p)

0,90 (>0,05)

0,12(>0,05)

H0 (HE)

0,46 (0,49)

0,48 (0,49)

D (t)

-0,05 (0,90)

-0,03 (0,33)

 

TYMS IVS6-68C>T

(rs 1059394)

ΣN

287

165

 

N0 (NE)

CC

158 (154,36)

89 (92,44)

CT

105 (112,22)

69 (62,14)

TT

24 (20,39)

7 (10,44)

χ2(HWE) (p)

1,19 (>0,05)

2,02 (>0,05)

H0 (HE)

0,37 (0,39)

0,42 (0,38)

D (t)

-0,06 (0,76)

+0,11 (0,92)

 

TYMS -1122A>G

(rs 2790)

ΣN

297

172

 

N0 (NE)

AA

202 (201,28)

121 (121,40)

АG

85 (86,44)

47 (46,21)

GG

10 (9,28)

4 (4,40)

χ2(HWE) (p)

0,08 (>0,05)

0,05(>0,05)

H0 (HE)

0,29(0,29)

0,27 (0,27)

D (t)

-0,02 (0,15)

+0,02 (0,11)

 

MTHFR +1298A>C

(rs 1801131)

ΣN

291

171

N0 (NE)

AA

126 (108,88)

77 (74,01)

AC

104 (138,24)

71 (76,97)

CC

61 (43,88)

23 (20,01)

χ2(HWE) (p)

17,85 (<0,001)

1,03 (>0,05)

H0 (HE)

0,36 (0,48)

0,42 (0,45)

D (t)

-0,25 (3,99)

-0,08 (0,85)

примечание: σn - объем выборки; n0 - наблюдаемое распределение генотипов; ne - ожидаемое распределение генотипов; χ2(hwe) показатель соответствия наблюдаемого распределения ожидаемому, исходя из равновесия харди-вайнберга; p - достигнутый уровень значимости для χ2(hwe); h0 - наблюдаемая гетерозиготность; he - ожидаемая гетерозиготность; d - индекс фиксации райта t; - критерий стьюдента, характеризующий индекс фиксации;

Таблица 2

Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров ферментов фолатного цикла у беременных с преэклампсией и в контрольной группе женщин

Гены

Аллели, генотипы

Беременные с преэклампсией

n=322

Беременные без преэклампсии

n=179

χ2, p

 

OR

(95%CI)

 

n

%

n

%

MTHFR +1298A>C

(rs 1801131)

А

356

61,17

225

65,79

χ2=1,79

p=0,18

0,82

(0,61-1,09)

С

226

38,83

117

34,21

1,22

(0,92-1,63)

АА

126

43,30

77

45,03

χ2=0,07

p=0,79

0,93

(0,63-1,39)

 

АС

104

35,74

71

41,52

χ2=1,29 p=0,26

0,78

(0,52-1,17)

СС

61

20,96

23

13,45

χ2=3,60 p=0,06

1,71

(0,98-2,98)

MTR +2756A>G

(rs 1805087)

A

466

77,93

261

78,61

χ2=0,03

p=0,87

0,96

(0,68-1,35)

G

132

22,07

71

21,39

1,04

(0,74-1,46)

АА

183

61,20

99

59,64

χ2=0,05 p=0,82

1,07

(0,71-1,60)

AG

100

33,44

63

37,95

χ2=0,77

p=0,38

0,82

(0,54-1,24)

GG

16

5,35

4

2,41

χ2=1,59

p=0,21

2,29

(0,70-8,25)

 

SHMT1+1420C>T

(rs 1979277)

C

391

65,82

243

70,64

χ2=2,09

p=0,15

0,80

(0,59-1,08)

T

203

34,18

101

29,36

1,25

(0,93-1,68)

CC

136

45,79

86

50,00

χ2=0,61 p=0,43

0,85

(0,57-1,25)

CT

119

40,07

71

41,28

χ2=0,03 p=0,87

0,95

(0,64-1,42)

TT

42

14,14

15

8,72

χ2=2,51 p=0,11

1,72

(0,89-3,37)

MTRR +66A>G

(rs 1801394)

G

351

58,11

192

56,14

χ2=0,27

p=0,60

1,08

(0,82-1,43)

A

253

41,89

150

43,86

0,27

(0,70-1,22)

GG

106

35,10

55

32,16

χ2=0,30 p=0,58

1,14

(0,75-1,73)

AG

139

46,03

82

47,95

χ2=0,10 p=0,76

0,93

(0,63-1,37)

AA

57

18,87

34

19,88

χ2=0,02

p=0,88

0,94

(0,57-1,55)

 

 

TYMS -1053C>T

(rs 699517)

 

C

n

%

n

%

438

71,80

252

72,83

 

TYMS -1053C>T

(rs 699517)

 

TYMS IVS6-68C>T

(rs 1059394)

 

-1122

A/G TYMS

Т

172

28,20

94

27,17

 

χ2=0,07 p=0,79

 

 

0,95

(0,70-1,29)

CC

160

52,46

89

51,44

1,05

(0,78-1,43)

CT

118

38,69

74

42,77

χ2=0,01

p=0,91

1,04

(0,71-1,54)

 

TT

27

8,85

10

5,78

χ2=0,61 p=0,44

0,84

(0,57-1,26)

 

C

423

73,69

247

74,85

χ2=1,06 p=0,30

1,58

(0,71-3,60)

 

 

TYMS IVS6-68C>T

(rs 1059394)

 

-1122

A/G TYMS

 

TYMS -1122A>G

(rs 2790)

 

+677

C/T

MTHFR

T

151

26,31

83

25,15

 

χ2=0,09

p=0,76

 

0,94

(0,68-1,30)

CC

158

55,05

89

53,94

1,06

(0,77-1,47)

CT

105

36,59

69

41,82

χ2=0,09

p=0,76

χ2=0,02 p=0,90

1,05

(0,70-1,57)

 

TT

24

8,36

7

4,24

χ2=1,00 p=0,32

0,80

(0,53-1,21)

 

A

489

82,32

289

84,01

χ2=8,73 p=0,004

3,65

(1,47-9,48)

 

 

TYMS -1122A>G

(rs 2790)

 

+677

C/T

MTHFR

 

MTHFR +677C>T

(rs 1801133)

G

105

17,68

55

15,99

 

χ2=0,33 p=0,57

 

0,89

(0,61-1,29)

AA

202

68,01

121

70,35

1,13

(0,78-1,64)

AG

85

28,62

47

27,32

χ2=0,18 p=0,67

0,90

(0,58-1,38)

 

GG

10

3,37

4

2,32

χ2=0,04

p=0,85

1,07

(0,69-1,66)

 

C

418

69,21

245

69,21

χ2=0,13 p=0,72

1,46

(0,41-5,63)

 

 

MTHFR +677C>T

(rs 1801133)

T

186

30,79

109

30,79

 

χ2=0,01 p=1,00

 

1,00

(0,75-1,34)

CC

141

46,69

82

46,33

1,00

(0,75-1,34)

 

CT

136

45,03

81

45,76

χ2=0,015

p=1,00

1,02

(0,69-1,50)

 

 

TT

25

8,28

14

7,91

χ2=0,004 p=1,95

0,97

(0,66-1,43)

Исследование распределения генотипов изучаемых полиморфных маркеров ферментов фолатного цикла показало, что для большинства рассмотренных маркеров у беременных с ПЭ и беременных женщин без ПЭ, эмпирическое распределение генотипов соответствует теоретически ожидаемому при равновесии HWE (p>0,05). По локусу MTHFR +1298A>Су женщин с ПЭ выявлено отклонение от равновесия Харди-Вайнберга за счет снижения фактической гетерозиготности по сравнению с теоретической (Но=0,36, Не=0,48,

D=-0,25, χ2=17,85, p<0,001).Уровень аллельного разнообразия по изученным локусам варьировал от Но=0,27 (для локуса TYMS -1122А>G) до Но=0,48 (для локуса MTRR +66А>G) в группе беременных без ПЭ и от Но=0,29 (TYMS -1122А>G) до Но=0,46 (для локуса MTRR +66А>G)среди беременных с ПЭ.

При сравнительном анализе распределения частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров ферментов фолатного цикла в группах беременных с ПЭ и здоровых беременных установлена более высокая частота (практически в 2 раза) генетического варианта IVS6-68 ТT TYMS (8,36%) у женщин с ПЭ по сравнению с беременными контрольной группы (4,24%; χ2=8,73; р=0,004; OR=3,65; 95%Cl 1,47-9,48).

По другим исследуемым генетическим полиморфизмам достоверных различий в концентрациях аллелей и генотипов не обнаружено (p>0,05).

Выводы

Таким образом, полученные результаты свидетельствует о том, что наибольшие различия частот генетических полиморфизмов генов фолатного обмена у беременных с преэклампсией и контрольной группы выявлены по +1298АС MTHFR (35,74% и 41,52%, соответственно), +1298СС MTHFR (20,96% и 13,45%), MTR+2756GG (5,35% и 2,41%), +1420ТТ SHMT1 (14,14% и 8,72%), IVS6-68CT TYMS (8,36% и 4,24%).

Рецензенты:

Чурносов М.И., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой медико-биологических дисциплин, медицинский факультет фгаоу впо «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»), г. Белгород;

Сорокина И.Н., д.м.н., доцент, профессор кафедры медико-биологических дисциплин, медицинский факультет фгаоу впо «Белгородский государственный национальный исследовательский университет» (НИУ «БелГУ»), г. Белгород.


Библиографическая ссылка

Тверская А.В. АНАЛИЗ ВКЛАДА ПОЛИМОРФИЗМОВ ГЕНОВ ФОЛАТНОГО ОБМЕНА В ГЕНЕТИЧЕСКУЮ ПРЕДРАСПОЛОЖЕННОСТЬ К РАЗВИТИЮ ПРЕЭКЛАМПСИИ // Современные проблемы науки и образования. – 2014. – № 6.;
URL: http://science-education.ru/ru/article/view?id=15921 (дата обращения: 07.12.2019).

Предлагаем вашему вниманию журналы, издающиеся в издательстве «Академия Естествознания»
(Высокий импакт-фактор РИНЦ, тематика журналов охватывает все научные направления)

«Фундаментальные исследования» список ВАК ИФ РИНЦ = 1.074