Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Дятлова Л.И. 1 Чеснокова Н.П. 2 Понукалина Е.В. 2 Рогожина И.Е. 2 Глухова Т.Н. 2

---

1 ГУЗ «Перинатальный центр Саратовской области»

2 ГБОУ ВПО «Саратовский Государственный медицинский университет им.В.И. Разумовского Минздрава России»

Проведен анализ состояния процессов липопероксидации у 64 беременных с преждевременным излитием околоплодных вод в сроки гестации 22 – 34 недели, находившихся на лечении в ГУЗ «Перинатальный центр Саратовской области» в 2012-2014гг. В задачи исследования входила сравнительная оценка содержания в крови и околоплодных водах обследованных беременных продуктов липопероксидации – диеновых коньюгатов и малонового диальдегида, количественное определение перекисей, а также оценка общего антиоксидантного статуса, активности супероксиддисмутазы и содержания церулоплазмина. Выявлена патогенетическая взаимосвязь между активацией процессов липопероксидации, проявляющейся избыточным накоплением в крови и околоплодных водах малонового диальдегида, диеновых конъюгатов на фоне относительной недостаточности антиоксидантной системы, и развитием дегенеративных процессов в амниотической и хориальной оболочках плода в условиях пролонгации беременности у пациенток с преждевременным разрывом плодных оболочек. Последнее свидетельствует о возможности использования показателей состояния процессов липопероксидации в крови в качестве объективных критериев оценки степени повреждения амниотической и хориальной оболочек плода у пациенток с преждевременным разрывом плодных оболочек.

Статья в формате PDF

921 KB

ультраструктура амниотической и хориальной оболочек

преждевременный разрыв плодных оболочек

беременность

липопероксидация

1.Активация липопероксидации как ведущий патогенетический фактор развития типовых патологических процессов и заболеваний /под ред. В.М. Попкова, Н.П. Чесноковой, М.Ю. Ледванова. Саратов: Изд–во СГМУ, 2012. 367 с.

2..Гаврилов В.Б., Мишкорудная М.И. Спектрофотометрическое определение содержания гидроперекисей липидов в плазме крови // Лаб. дело. – 1983. – № 3. – С. 33 – 35.

3. Дятлова Л.И., Чеснокова Н.П., Глухова Т.Н. Закономерности качественных и количественных изменений клеточного состава периферической крови при беременности, осложненной преждевременным отхождением околоплодных вод // Наука и современность: материалы международной научно-практической конференции.-Уфа, 2014.-С.165-169.

4. Максимович О.Н. Дородовое излитие околоплодных вод: причины, диагностика, ведение беременности и родов // Бюл. ВСНЦ СО РАМН. – Иркутск, 2006. – № 3(49). – С. 207–212.

5. Михайлов А.В., Дятлова Л.И., Глухова Т.Н. Ведение недоношенной беременности, осложненной преждевременным излитием околоплодных вод//Мать и дитя: материалы ХV Всерос. форума.-М., 2014.- С.125-126.

6. Особенности метаболического и цитокинового гомеостаза при беременности, осложненной преждевременным разрывом околоплодных мембран/ Глухова Т.Н., Дятлова Л.И., Чеснокова Н.П., Понукалина Е.В. // V съезд акушеров-гинекологов России: материалы форума.-М., 2013.-С.43-44.

7.Сидельникова В.М. Привычная потеря беременности. М.: «Триада-Х», 2005, 304 с.

8. Суплонов С.Н., Баркова Э.Н. Суточные и сезонные ритмы перекисей липидов и активности супероксиддисмутазы в эритроцитах у жителей средних широт и крайнего севера // Лаб. дело. – 1986. – № 8. – С. 459 – 463.

Проблемы невынашивания беременности, обусловленные преждевременным излитием околоплодных вод, остаются актуальными до настоящего момента. Это обусловлено тем фактом, что в 50-60% наблюдений преждевременные роды начинаются с несвоевременного излития околоплодных вод на фоне чрезмерного истончения амниотической оболочки [ 4,7]. Следует отметить, что нередко преждевременные роды наступают в сроки гестации 22-34 недели, когда формирование нервной, гормональной, иммунной систем плода далеко не завершено, в этой группе недоношенных детей высока перинатальная и неонатальная смертность.

Результаты проведенных нами ранее исследований по изучению состояния иммунного и цитокинового статусов при беременности, осложненной преждевременным разрывом плодных оболочек (ПРПО) в сроки 22 -34 недели, позволили разработать и патогенетически обосновать ряд объективных критериев возможности пролонгации беременности при указанной патологии гестации, в частности, отсутствие нарастания в крови пациенток с ПРПО нейтрофильного лейкоцитоза с палочкоядерным сдвигом, температурной реакции, изменения характера подтекающих вод, повышения уровня С-реактивного белка и провоспалительных цитокинов в крови, ухудшения состояния плода по данным кардиотокографии и допплерометрии кровотока в системе мать-плацента-плод, выраженного маловодия [3,5,6]. Однако представляет большую практическую значимость установление патогенетической взаимосвязи развития синдрома системного воспалительного ответа с характером нарушений структуры околоплодных мембран на фоне пролонгации беременности у пациенток с ПРПО.

Как известно, типовым эфферентным звеном дезорганизации биологических систем на фоне развития патологии различного генеза является свободнорадикальная деградация клеток различной морфофункциональной организации [1]. До настоящего момента остаются открытыми вопросы патогенетической взаимосвязи активации процессов липопероксидации в системе мать-плацента-плод и развития несостоятельности околоплодных оболочек, влияние пролонгации беременности на фоне ПРПО на характер ультраструктурных изменений околоплодных мембран.

Целью настоящего исследования явилось изучение состояния процессов липопероксидации и антирадикальной защиты клеток в системе мать-плацента-плод у пациенток с ПРПО, а также изучение ультраструктуры околоплодных мембран на фоне пролонгации беременности при указанной патологии.

Материалы и методы. Проведено комплексное клинико-лабораторное обследование 64 пациенток, находившихся на лечении в ГУЗ «Перинатальный центр Саратовской области» в 2012-2014 гг. Критериями включения пациенток в исследование явилось осложнение беременности ПРПО при сроках гестации 22-34 недели, отсутствие клинических и лабораторных признаков реализации восходящей инфекции, в частности, лихорадки, тахикардии, лейкоцитоза с нейтрофильным сдвигом влево в периферической крови. Критерии исключения: многоплодная беременность, тяжелые формы преэклампсии и экстрагенитальной патологии, наличие у пациентки синдрома задержки роста плода II и III степени.

Контрольную группу составили 40 женщин с физиологически протекающей беременностью в аналогичные сроки гестации.

Комплексное клинико-лабораторное обследование включало оценку общего состояния беременных, 3-х часовую термометрию, контроль гемодинамических параметров, количества и характера подтекающих вод, ежедневный клинический анализ крови. Одновременно проводилось исследование вагинального мазка на микрофлору каждые 2-3 дня, бактериологический посев отделяемого из цервикального канала, определение С-реактивного белка в крови 1 раз в 3 дня. Для антенатальной диагностики состояния плода использовали ультразвуковую фетометрию и плацентометрию, оценку индекса амниотической жидкости, а также допплерографическое исследование кровотока в артерии пуповины, аорте плода, маточных артериях с интервалом в 2-3 дня на ультразвуковом аппарате Voluson e8 Еxpert. Оценка показателей проведена при поступлении беременной с ПРПО в стационар (до проведения терапии) и после пролонгации беременности, в момент начала родовой деятельности, Околоплодные оболочки получены после родоразрешения.

Определение уровня диеновых коньюгатов (ДК) и малонового диальдегида (МДА) проводилось спектрофотометрическими методами [2,8]. Для количественного определения перекисей (OxyStat) использован иммуноферментный анализатор «Alfa Prime» фирмы «Meredith Diagnostics» и реактивы фирмы «Bender Medsystems».Для оценки общего антиоксидантного статуса (TAS), активности супероксиддисмутазы (СОД) были использованы реактивы «Bender Medsystems» (Австрия).

Изучение стереоультраструктуры плодных оболочек проведено с использованием сканирующего электронного микроскопа «Hitachi S-450» при увеличении в 130 и 900 раз на базе лаборатории электронной микроскопии (ФБУН ГНЦ ПМБ, руководитель лаборатории доктор биологических наук В.Н. Герасимов).

Статистический анализ данных проводили с использованием параметрических статистических методов с помощью программы Microsoft Office Excel (версия 2007, Microsoft Corporation, США, 2007) и программного пакета для статистического анализа Statistica (версия 5.5 А, StatSoft Inc., США, 1999).

Результаты и обсуждение. Результаты проведенных нами исследований убедительно свидетельствуют о том, что ПРПО формируется на фоне системных и локальных метаболических расстройств. Так, при беременности, осложненной ПРПО, имеет место возрастание уровня в крови беременных содержания промежуточных продуктов липопероксидации, а также показателя суммарного оксидативного статуса на фоне компенсаторной активации антиоксидантной системы крови и околоплодных вод, на что указывали повышение показателя общего антиоксидантного статуса, уровня церулоплазмина, активация СОД (табл.1,2).

Таблица 1

Показатели OxyStat, содержания продуктов липопероксидации, молекул средней массы и активности антиоксидантной системы крови беременных с преждевременным разрывом околоплодных мембран и пролонгацией беременности

Примечание: Р рассчитано по отношению к показателям группы женщин с физиологическим течением беременности; p1- рассчитано по отношению к показателям беременных с дородовым излитием околоплодных вод при поступлении в стационар.

Таблица 2

Показатели OxyStat, содержания продуктов липопероксидации, молекул средней массы и активности антиоксидантной системы околоплодных вод беременных с преждевременным разрывом околоплодных мембран

Примечание: Р - рассчитано по отношению к показателям группы женщин с физиологическим течением беременности; p1 - рассчитано по отношению к показателям беременных с дородовым излитием околоплодных вод при поступлении в стационар.

В указанной группе пациенток, как указывалось выше, удалось пролонгировать беременность в среднем на 10 дней (10,8±2,4 дня) в асептических условиях на фоне адекватной комплексной терапии. Объективными критериями для завершения пролонгации явился ряд показателей общесоматического и акушерского статуса беременных, а также изменения метаболического статуса пациенток, в частности, состояние процессов свободнорадикальной дестабилизации биоструктур. Как оказалось, в указанный период наблюдения имела место дальнейшая активация процессов липопероксидации, достигающая максимума в период начала родовой деятельности у беременных с ПРПО, на что указывало нарастание уровня ДК, МДА и показателя OxyStat в крови и околоплодных водах беременных с ПРПО, в то же время не было выявлено адекватной активации антиоксидантной системы крови и околоплодных вод (табл.1,2 ).

Таким образом, проведенный нами мониторинг традиционных показателей синдрома системного воспалительного ответа и рекомендуемых нами критериев свободнорадикальной дестабилизации биосистем позволил дать объективную оценку общесоматического статуса матери и плода, свидетельствующую о необходимости завершения пролонгации беременности.

Пролонгация беременности завершалась, как правило, спонтанным развитием родовой деятельности- преждевременными родами через естественные родовые пути. Две пациентки (3,2%) в связи с наличием рубца на матке при вступлении в роды были родоразрешены путем операции кесарево сечение. Антенатальной и ранней неонатальной смертности у детей обследованных нами пациенток не было, послеродовый период у наблюдаемых пациенток протекал без осложнений.

Далее представлялось целесообразным установить патогенетическую взаимосвязь между характером выявленных нами метаболических расстройств с характером морфологических изменений в структуре амниона и хориона. О степени выраженности деструктивных процессов судили при помощи метода электронной микроскопии, который впервые использовался при данном виде патологии в сочетании с описанными выше методами оценки системных метаболических расстройств у пациенток с преждевременным разрывом плодных оболочек.

Как показали результаты проведенных исследований, у пациенток с ПРПО после периода пролонгации беременности в амниотической оболочке отмечены деструктивные изменения: межклеточные пространства трудно различимы, отсутствует щеточный покров (снимок Д). (увеличение в 130 раз).

При проведении электронной микроскопии оболочек с увеличением в 900 раз в этой же группе пациенток отмечается разрушение межклеточных соединений, размеры межклеточных дефектов достигают 5 мкм (снимок З).

Одновременно нами было проведено изучение стереоультраструктуры гладкого хориона в этой же группе пациенток с ПРПО после периода пролонгации беременности. При увеличении в 130 раз было отмечено нарушение клеточных взаимосвязей, ширина дефектов достигала 200 мкм. Внутренняя поверхность хориона покрыта нитями фибрина и деформированными эритроцитами (снимки О, П).

Снимок Д. Увеличение ×130.                      Снимок З. Увеличение ×900.

Пациентка с ПРПО после периода пролонгации беременности.Амниотическая оболочка

При проведении электронной микроскопии с увеличением в 900 раз выявлено полное отсутствие щеточной каймы в области гладкого хориона, сладжированные эритроциты в большом количестве (снимок Р).

Снимок О.                                                                    Снимок П.

Пациентка с ПРПО после периода пролонгации беременности. Хориальная оболочка Увеличение ×130. Стрелкой указаны нити фибрина.

Таким образом, нами впервые была выявлена патогенетическая взаимосвязь между активацией процессов липопероксидации, проявляющейся избыточным накоплением в крови и околоплодных водах МДА, ДК, и развитием дегенеративных процессов в амниотической и хориальной оболочках плода в условиях пролонгации беременности у пациенток с ПРПО.

Снимок Р. Пациентка с ПРПО после периода пролонгации беременности.

Хориальная оболочка. Увеличение×900. Стрелкой указаны сладжированные эритроциты.

Таким образом, нами впервые была выявлена патогенетическая взаимосвязь между активацией процессов липопероксидации, проявляющейся избыточным накоплением в крови и околоплодных водах МДА, ДК, и развитием дегенеративных процессов в амниотической и хориальной оболочках плода в условиях пролонгации беременности у пациенток с ПРПО.

Выводы:

1. Показатели состояния процессов липопероксидации в крови и околоплодных водах могут быть использованы в качестве объективных критериев оценки степени повреждения амниотической и хориальной оболочек плода у пациенток с ПРПО в сроки гестации 22-34 недели.

2. Прогрессирующее нарастание в околоплодных водах и крови беременных содержания промежуточных продуктов липопероксидации при гестации, осложненной преждевременным разрывом плодных оболочек, может быть использовано в качестве косвенных показателей развития деструктивных процессов в амниотической и хориальной оболочках плода, характеризующихся исчезновением щеточной каймы, выпадением нитей фибрина, сладжированием эритроцитов материнской крови, что свидетельствует о начальных проявлениях хориоамнионита, не выявляющихся методом световой микроскопии.

3. Разработанный нами метод пролонгации беременности у пациенток с ПРПО в сроки гестации 22-34 недели при условии проведения клинико-лабораторного контроля за состоянием беременной и плода, на фоне адекватной комплексной терапии не сопровождается развитием тяжелых деструктивных изменений в околоплодных мембранах, что позволяет использовать данный метод для достижения большей морфофункциональной зрелости плода.

Рецензенты:

Василенко Л.В., д.м.н., профессор кафедры акушерства и гинекологии ФПК и ППС ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава РФ, г. Саратов;

Брилль Г.Е., д.м.н., профессор кафедры патологической физиологии им. А.А. Богомольца ГБОУ ВПО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава РФ, г. Саратов.

Библиографическая ссылка