Сетевое издание

Современные проблемы науки и образования

ISSN 2070-7428

"Перечень" ВАК

ИФ РИНЦ = 1,006

• Авторы
• Резюме
• Файлы
• Ключевые слова
• Литература

Денисова Я.Е. 1 Чурносов М.И. 1

---

1 ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет»

В статье изучена ассоциация полиморфизма +250 A/G Ltα с формированием хронической истинной экземы. Выявлены особенности ассоциации исследуемого гена-кандидата с возникновением данного заболевания в зависимости от пола. На основании полученных данных можно сделать выводы о том, что аллель +250G Lt α играет важную роль в формировании хронической истинной экземы и является фактором риска развития этого заболевания (OR=1,33). Полученные данные позволяют сделать следующие заключения: во-первых, генетический полиморфизм +250A/G Ltα вовлечен в формирование подверженности к хронической истинной экземы у населения Центрального Черноземья России, во-вторых, выявлены особенности ассоциации исследуемого гена-кандидата с возникновением ХИЭ в зависимости от пола.

Статья в формате PDF

141 KB

фактор риска

лимфотоксин α (+250 A/G Ltα)

генетические факторы

хроническая истинная экзема

1. Клиническая дерматовенерология : руководство для врачей : в 2-х т. / под ред. Ю. К. Скрипкина, Ю. С. Бутова. – Москва : Гэотар- Медиа, 2009. – Т. 2. – 921 с.

2. Оспанова С. А. Совершенствование терапии экземы с учетом эндогенной интоксикации : автореф. дис. канд. мед. наук : 14.00.11 / С. А. Оспанова ; Казах. науч.-исслед. кож.-венерол. ин-т. – Алма-ты, 2008. – 24 с.

3. Павлова О.В. / Экзема: этиология, патогенез, клиника, диагностика и лечение// О.В. Павлова. М.:2010.-64с.

4. McFadden JP, Dearman RJ, White JM, Basketter DA, Kimber I. The Hapten-Atopy hypothesis II: the 'cutaneous hapten paradox'. //Clin Exp Allergy –2011. – Vol.41, №3.– Р. 327-337

5. Muсoz Lejarazu D. Contact dermatitis / D. Muсoz Lejarazu// Alergolуgica –2005. –Vol.19–Р.34-6

6. Novak N, Baurecht H, Schafer T, Rodriguez E, Wagenpfeil S, Klopp N, Heinrich J, Behrendt H, Ring J, Wichmann E, Illig T, Weidinger S (2008) Loss-offunction mutations in the filaggrin gene and allergic contact sensitization to nickel. J Invest Dermatol 128,1430–5

7. Rui F, Bovenzi M, Prodi A, Fortina AB, Romano I, Peserico A. Nickel, cobalt and chromate sensitization and occupation. – Contact Dermatitis. –2010. –Vol.62, №4. – Р. 225-231

8. Sun Y. G. A gastrin-releasing peptide receptor mediates the itch sensation in the spinal cord / Y. G. Sun, Z. F. Chen // Nature. – 2007. – Vol. 448, № 7154. – P. 700-703.

9. Tumor necrosis factor alpha and lymphotoxin alpha haplotypes in idiopathic recurrent pregnancy loss [Text] / W. Zammiti, N. Mtiraoui, R. R. Finan [et al.] // Fertil. Steril. – 2009. – Vol. 91, № 5. – Р. 1903-1908.

В настоящее время принято считать экзему системным полиэтиологическим заболеванием, которое может быть вызвано многими эндогенными и экзогенными факторами, такими как генетическая предрасположенность, вторичный иммунодефицит, дисфункции нервной и эндокринной системы, инфекционно-аллергические процессы [9].

По современным представлениям,  в развитии хронической истинной экземы (ХИЭ) главную роль играют Т-лимфоциты, несущие на своей поверхности специфические рецепторы к антигену и выделяющие ряд про- воспалительных цитокинов: ИЛ-1, ИЛ-2, ФНО-α [3]. Как свидетельствуют результаты ряда исследований [6,8] значимую роль в возникновении, клиническом течении и прогнозе заболевания  играют генетические факторы и, прежде всего, цитокины, среди которых основными являются факторы некроза опухолей и их рецепторы [4]. Однако, следует отметить, что подавляющее число генетических исследований ХИЭ проведено за рубежом и характеризуется противоречивостью полученных данных [5,7].

Целью данной работы явилось изучение роли генетического полиморфизма +250 A/G Ltα в формировании хронической истинной экземы.       

Исследование проводили на выборке из 552 индивидуумов, из них 230 больных ХИЭ и 322 человек контрольной группы. В неё включались индивидуумы русской национальности,  являющиеся уроженцами Центрального Черноземья РФ и не имеющие родства между собой. Исследуемую группу мужчин составили 205 человек, из них 84 больных ХИЭ и 121 индивидуум контрольной группы. Группа женщин включала 347 человек, в том числе 146 больных ХИЭ и 201 женщина контрольной группы.

Материалом для исследования послужила венозная кровь в объеме 4-5 мл, взятая из локтевой вены пробанда.  Забор венозной крови осуществлялся в пробирки с консервантом,  содержащим 0,5М раствор ЭДТА (рН=8.0).  Выделение геномной ДНК из периферической крови проведено методом фенольно-хлороформной экстракции.

Анализ локуса  +250 A/G Ltα осуществлялся методом полимеразной цепной реакции  (ПЦР)  синтеза ДНК. ПЦР проводилось на амплификаторе IQ 5 (Bio-Rad)  в режиме real time  с использованием ДНК-полимеразы Thermus aquaticus  производства фирмы  «Силекс-М»  и олигонуклеотидных праймеров и зондов,  синтезированных фирмой  «Синтол». Генотипирование ДНК-маркера осуществлено методом анализа дискриминации аллелей на основе Taq Man зондов.

Результаты исследования. Результаты генотипирования данных индивидуумов по локусу +250А/G Ltα представлены в таблице 1.

Таблица 1

Распределение генотипов, наблюдаемой и ожидаемой гетерозиготности, индекса фиксации полиморфного маркера гена лимфотоксина α среди больных ХИЭ и в контроле

Примечание: ΣN - объем выборки; N₀ - наблюдаемое распределение фенотипов; N_E - ожидаемое распределение фенотипов; χ²_(HWE) - показатель соответствия наблюдаемого распределения ожидаемому, исходя из равновесия Харди-Вайнберга; p - достигнутый уровень значимости для χ²_(HWE) ; H₀ - наблюдаемая гетерозиготность; H_E - ожидаемая гетерозиготность; D - индекс фиксации Райта; t - критерий Стьюдента, характеризующий индекс фиксации

Исследование распределения генотипов изучаемого полиморфного маркера показало, что в контрольной выборке и в группе больных хронической истинной экземой эмпирическое распределение генотипов соответствует теоретически ожидаемому при равновесии Харди-Вайнберга (p>0,05). Уровень аллельного разнообразия по изученному локусу равен 0,41- в контроле и 0,44 среди больных ХИЭ.

При сравнительном анализе распределения частот аллелей и генотипов полиморфного маркера +250 A/G Ltα в контрольной группе и среди больных ХИЭ установлена более высокая концентрация аллеля +250 G Lt α у больных ХИЭ (30,05%) по сравнению с контролем (24,38%, c²=3,93, р=0,048 OR=1,33 95% CI 1,00-1,77) (табл. 2).

Таблица 2

Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов +250A/G Ltα у больных ХИЭ и в контрольной группе (%)

Проведено изучение ассоциации +250A/G Lt α, с формированием хронической истинной экземы в зависимости от пола. Так, распределение аллеля +250G Ltα и генотипа +250GG Ltα у больных ХИЭ составляет 36,25% и 15,00%, соответственно, а у мужчин контрольной группы эти показатели составили 21,49% (c²=9,83, р=0,003, OR=2,08 95% CI 1,30-3,32) и 2,48% (c²=9,20, р=0,003, р_cor=0,009,OR=6,94 95% CI 1,74-32,21), соответственно (таблица 3).

Таблица 3

Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов +250A/G Ltα у больных ХИЭ и индивидуумов контрольной группы мужского пола (%)

Проведенный сравнительный анализ распределения аллелей и генотипов +250A/G Ltα в исследуемых выборках больных ХИЭ женщин и контрольной группы не выявил достоверных различий (таблица 4).

Таблица 3

Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов +250A/G Ltα у больных ХИЭ и индивидуумов контрольной группы женского пола (%)

Получив значимые данные об ассоциации генетического полиморфизма лимфотоксина α с развитием ХИЭ, на следующем этапе работы мы оценили роль наследственной отягощенности в формировании этих ассоциаций. На момент обследования из 230 пациентов отягощенный семейный анамнез  по заболеванию  был выявлен у 80 больных (34,78%), в том числе среди 84 лиц мужского пола наследственный анамнез был отягощен у 27 (11,74%), из 146 лиц женского пола  у 53 (23,04%). 150 больных ХИЭ (65,22%) не имели наследственной отягощенности, в том числе 57 индивидуумов мужского пола (24,78%) и 93 женского (40,43%).

Установлены особенности ассоциаций генетического полиморфизма +250G Lt α  с формированием ХИЭ в зависимости от наследственной отягощенности.

В группе больных ХИЭ, без отягощенного семейного анамнеза, +250A/G Ltα вносит значимый вклад в подверженность к ХИЭ. В этой группе пациентов концентрации генетических вариантов +250G Ltα (32,73%) и +250 GG Ltα (10,80%) достоверно выше, чем в контрольной группе, где эти показатели составили 24,38% (c²=6,48, р=0,01, OR=1,51, 95% CI 1,1-2,08) и 4,04% (c²=6,63, р=0,01, р_cor=0,03, OR=2,88, 95% CI 1,25-6,64), соответственно  (таблица 4).

Таблица 4

Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов +250A/G Ltα у больных ХИЭ с неотягощенным семейным анамнезом и индивидуумов контрольной группы (%)

Среди больных ХИЭ с отягощенным семейным анамнезом, связи с предрасположенностью к ХИЭ с исследуемым генетическим полиморфизмом не обнаружено (таблица 5).

Таблица 5

Сравнительный анализ частот аллелей и генотипов +250A/G Ltα у больных ХИЭ с отягощенным семейным анамнезом и индивидуумов контрольной группы (%)

Выводы. Таким образом, можно заключить, что аллель +250G Lt α  играет важную роль в формировании хронической истинной экземы  и является фактором риска развития этого заболевания (OR=1,33). У мужчин генетический полиморфизм +250A/G Ltα имеет важное этиопатогенетическое значение при хронической истинной экземе, определяя предрасположенность к формированию данного заболевания (фактор риска - +250GG Ltα (OR=6,94), протективный фактор - +250A Ltα (OR=0,48)).

У лиц женского пола полиморфные варианты факторов некроза опухолей и их рецепторов не ассоциированы с развитием хронической истинной экземы. Эти результаты позволяют предположить, что у женщин подверженность к формированию ХИЭ может быть связана или с другими генетическими маркерами, или может определяться в большей степени факторами окружающей среды (частый контакт с водой и химическими моюще-чистящими средствами и др.).

Подверженность к развитию ХИЭ у индивидуумов без отягощенного семейного анамнеза также связана с генетическим полиморфизмом +250А/G Ltα (факторами риска формирования ХИЭ являются генетические варианты +250G Ltα (OR=1,51) и +250GG Ltα (OR=2,88)).

Согласно данным литературы продукт гена Lt α- лимфотоксин α задействован в процессах апоптоза, участвует в развитии первичного иммунитета и защите организма от вирусов, экспрессируется в лимфоцитах и является посредником воспалительных иммуностимулированных ответов [Mentula P., 2005; Кетлинский С.С. и др., 2008]. Ltα вызывает индукцию экспрессии молекул адгезии на лейкоцитах и эндотелиальных клетках, вследствие чего стимулируется приток лейкоцитов из сосудистого русла в очаг воспаления путем трансэндотелиальной миграции [Mathy N. et al., 2000]. Клеточный инфильтрат в очаге воспаления способствует дальнейшему развитию аллергического воспаления. Полиморфный инфильтрат в коже при экземе - результат действия образовавшихся провоспалительных цитокинов, в том числе Ltα [Frezzolini A. et al., 2002].  Как свидетельствуют результаты других работ [Patuzzo С. et al., 2000],  повышенный уровень продукции лимфотоксина α ассоциирован с генетическим вариантом + 250G Ltα, что может обуславливать выраженные клинические проявления при развитии патологического процесса (хронической истинной экземы) в организме, что мы и зарегистрировали в настоящем исследовании.

Итак, полученные данные позволяют заключить, что, во-первых, генетический полиморфизм +250A/G Ltα вовлечен в формирование подверженности к хронической истинной экземы у населения Центрального Черноземья России, во-вторых, выявлены особенности ассоциации исследуемого гена-кандидата с возникновением ХИЭ в зависимости от пола.

Рецензенты:

Новиков О.О., д.фарм.н., профессор, заведующий кафедрой фармацевтической химии и фармакогнозии ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», г. Белгород.

Жилякова Е.Т., д.фарм.н., профессор, заведующий кафедрой фармацевтической технологии ФГАОУ ВПО «Белгородский государственный национальный исследовательский университет», г. Белгород.

Библиографическая ссылка