Среди заболеваний органов пищеварительной системы одно из важных мест занимает токсическое поражение печени. Этиология токсического поражения печени различна. Известно, что производство ряда растворителей (ацетон, толуол, бензол и др.), бесконтрольное потребление лекарственных средств из группы барбитуратов, антибиотиков, противотуберкулезных лекарственных средств, а также хроническое потребление алкоголя часто являются причиной развития токсического гепатита.
В настоящее время номенклатура гепатопротекторов ограничена, при этом в ряду используемых лекарственных средств большое количество приходится на долю препаратов зарубежного производства. В этой связи поиск отечественных высокоэффективных средств, обладающих гепатопротекторной активностью, является одной из важных задач современной медицины и фармации.
Анализ литературных источников последних лет показывает, что терапия различных форм гепатитов часто осуществляется с использованием средств растительного происхождения. Их лечебный эффект при токсических поражениях печени обусловлен преимущественно фенольными соединениями (флавоноидами, фенолкарбоновыми кислотами, кумаринами и др.), обладающими широким спектром биологического действия, включая мембраностабилизирующее, антиоксидантное, антитоксическое и репаративные свойства [2; 8].
Одним из источников получения средств, обладающих желчегонным и гепатопротекторным действием, может быть кориандр посевной (Coriandrum sativum), в траве которого содержатся флавоноиды (рутин, кверцетин, изокверцетин, кемпферол, гликозиды кверцетина и кемпферола), кумарины (умбеллиферон, скополетин, экулептин), фенолкарбоновые кислоты (феруловая, кофейная, хлорогеновая), органические кислоты (яблочная, янтарная), витамины В1, В2, С, Е, каротиноиды и ряд других веществ [8]. В настоящее время сырье кориандра используют в составе некоторых сборов в качестве эффективных средств для лечения различных заболеваний, в том числе заболеваний печени и желчных путей [4].
Целью наших исследований явилось изучение влияния водных и спиртовых извлечений на желчевыделение и гепатопротекторную активность у животных с экспериментальным гепатозом.
Экстракты из травы кориандра посевного получали в соответствии с требованиями Фармакопеи ХI, используя в качестве экстрагента воду и спирт этиловый 40%-ный. Эксперименты проводились на здоровых обоеполых белых крысах и крысах с четыреххлористым гепатозом. В качестве препарата сравнения использовали аналогично полученные экстракты из кукурузных столбиков с рыльцами. Исследуемые вещества вводили животным перорально в виде водных растворов в дозе 150 мг/ кг, выбранной на основе фармакологического скрининга гепатотоксичности извлечений по В.В. Гацура [3]. Гепатоз у животных вызывали троекратным через день пероральным введением ССI4 в виде 50%-ного масляного раствора из расчета 0,3 мл на 100 г массы тела. Изучение желчеотделения и функционального состояния печени проводилось после двухнедельного введения исследуемых извлечений в вышеуказанной дозе. Для оценки активности изучаемых объектов использовалось определение содержания в крови общего белка, альбуминов, глобулинов, аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, общего холестерина, триглицеридов с помощью автоматического биохимического анализатора ВS-120 (Minzey, Китай) со стандартным набором реактивов (Diasis, Германия). ТБК – активные продукты определяли с помощью диагностического набора «Агат-Мед» на спектрофотометре марки СФ-46 и выражали в ммоль/л [10]. Каталазу определяли спектрофотометрическим методом [5]. Помимо этого, определяли в печени содержание гликогена по реакции с фенолом после щелочного гидролиза гликогена, содержащегося в навеске печени, и выражали в г/кг [9]. Контроль желчевыделения определяли по М.Д. Литвинчук и З.И. Новосилец [6], холестерин и желчные кислоты в желчи по В.П. Мирошниченко [7]. Полученные результаты обрабатывались методом вариационной статистики [1].
При гепатозе желчевыделительная функция печени была понижена (табл. 1). В этих условиях наибольшей желчегонной активностью обладало водное извлечение из травы кориандра посевного, превосходившее аналогичное действие водного извлечения из кукурузных столбиков с рыльцами в 2,2 раза. В связи с уменьшением содержания в желчи желчных кислот без существенного изменения содержания холестерина, отмечалось небольшое снижение величины холято-холестеринового коэффициента (на 9%). Спиртовое извлечение из травы кориандра посевного также повышало желчевыделение как по сравнению с контрольными опытами, так и опытами на животных, получавших спиртовое извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами, но эти изменения носили менее выраженный характер.
Таблица 1 – Влияние курсового введения исследуемых извлечений на желчевыделение у белых крыс с гепатозом
|
№ n/n |
Серии опытов |
Количество желчи за 3 часа опыта, мг/100г массы тела М±m |
Желчные кислоты желчи, мг% М±m |
Холестерин желчи, мг% М±m
|
Холято-холестериновый коэффициент |
|
1 |
Интактные (дист. вода) n=6 |
555,6±81,5 |
157,0±19,9 |
18,5±0,62 |
8,5 |
|
2 |
Контроль (CCl4 + вода) n=7 |
96,1±5,4 |
575,3±2,3 |
8,9±0,08 |
64,6 |
|
3 |
Животные, получавшие кориандра извлечение водное + CCl4 n=9 |
952,0±156,5 Р1<0,001 |
539,9±9,9 Р1<0,01 |
9,1±0,24 Р1<0,05 |
59,4 |
|
4 |
Животные, получавшие кориандра извлечение спиртовое + CCl4 n=9 |
546,7±57,9 Р1<0,001 Р2<0,05 |
116,9±53,4 Р1<0,001 Р2<0,001 |
3,0±1,3 Р1<0,001 Р2<0,001 |
38,9 |
|
5 |
Животные, получавшие кукурузных рылец извлечение водное + CCl4 n=10 |
446,0±71,0 Р1<0,001 Р2<0,01 |
121,1±21,2 Р1<0,001 Р2<0,001 |
88,7±27,8 Р1<0,02 Р2<0,01 |
1,4 |
n – количество опытов;
Р1 – вероятность различия к контролю;
Р2 – вероятность различия к водному извлечению.
Наряду с влиянием на желчевыделение исследуемые извлечения оказали существенное действие и на показатели функционального состояния печени (табл. 2, рис. 1–3).
Таблица 2 – Влияние курсового ведения исследуемых извлечений на показатели функционального состояния печени крыс с четыреххлористым гепатозом
|
№ п/п |
Группы животных |
АлТ крови, Е/л |
Альбу-мины крови, г/л |
Глобули- ны крови, г/л |
Общий билиру- бин крови, мкмоль/л |
ЩФ крови, Е/л |
Общий холес- терин крови, ммоль/л |
Тригли- цериды крови, ммоль/л |
|
1 |
Интактные (дист. вода) n = 9 |
48,5±15,0 |
38,8±1,2
|
46,9±1,8 |
24,3±0,2 |
226,3±22,0 |
1,9±0,2 |
0,8±0,08 |
|
2 |
Контроль (CCl4+вода) n = 7 |
99,1±3,5 Р1˂0,001 |
33,6±1,0 Р1˂0,05 |
39,0±1,8 Р1˂0,05 |
23,7±0,3 Р1˂0,05 |
409,6±60,5 Р1˂0,02 |
2,7±0,3 Р1˂0,05 |
2,0 ± 0,4 Р1˂0,01 |
|
3 |
Кориандра извлечение водное + CCl4, n = 8 |
63,4±6,0 Р1˃0,05 Р2˂0,05 |
32,8±0,7 Р1˂0,05 Р2˃0,05 |
46,2±2,1 Р1˃0,05 Р2˃0,05 |
23,6±1,5 Р1˃0,05 Р2˃0,05 |
233,0±28,1 Р1˃0,05 Р2˂0,05 |
1,6±0,2 Р1˃0,05 Р2˂0,05 |
0,5±0,06 Р1˂0,05 Р2˂0,05 |
|
4 |
Кориандра извлечение спиртовое +CCl4 n = 10 |
115,8±11,6 Р1˂0,05 Р2˃0,05 |
36,0±0,8 Р1˃0,05 Р2˃0,05 |
40,5±2,0 Р1˃0,05 Р2˃0,05 |
24,0±0,8 Р1˃0,05 Р2˃0,05 |
407,0±51,4 Р1˂0,05 Р2˃0,05 |
2,7±0,2 Р1˂0,05 Р2˃0,05 |
1,0±0,1 Р1˃0,05 Р2˂0,05 |
|
5 |
Кукурузных рылец извле- чение водное n = 6 |
53,0±12,8 Р1˃0,05 Р2˂0,05 Р3˃0,05 |
34,0±1,5 Р1˃0,05 Р2˂0,05 Р3˃0,05 |
45,0±4,02 Р1˃0,05 Р2˃0,05 Р3˃0,05 |
25,2±0,3 Р1˂0,05 Р2˂0,05 Р3˃0,05 |
242,5±29 Р1˃0,05 Р2˂0,05 Р3˃0,05 |
2,3±0,5 Р1˃0,05 Р2˃0,05 Р3˃0,05 |
0,5±0,1 Р1˂0,05 Р2˂0,05 Р3˃0,05 |
|
6 |
Кукурузных рылец извле- чение спир- товое +CCl4 n = 6 |
44,2±7,9 Р1˃0,05 Р2˂0,05 Р4˂0,05 |
34,0±0,4 Р1˃0,05 Р2˂0,05 Р4˂0,05 |
44,5±1,6 Р1˃0,05 Р2˂0,05 Р4˃0,05 |
25,0±0,3 Р1˃0,05 Р2˃0,05 Р4˃0,05 |
169,9±29,8 Р1˃0,05 Р2˂0,05 Р4˂0,05 |
2,1±0,1 Р1˃0,05 Р2˃0,05 Р4˂0,05 |
0,7±0,1 Р1˃0,05 Р2˂0,05 Р4˂0,05 |
n – количество опытов;
р1 – вероятность различия к группе интактных животных;
р2 – вероятность различия к контрольной группе животных;
р3 – вероятность различия к группе животных, получавших извлечение кориандра водное;
р4 – вероятность различия к группе животных, получавших извлечение кориандра спиртовое.
Если в контрольной группе животных с гепатозом отмечалось значительное повышение содержания в крови триглицеридов, общего холестерина, активности аланинаминотрансферазы, щелочной фосфатазы, ТБК – активных продуктов и уменьшение глобулинов, активности каталазы, а также снижение содержания гликогена в печени, то в опытных группах животных, получавших исследуемые извлечения, отчетливо проявилась нормализация большинства показателей функционального состояния печени, причем эффект в большей мере был выражен у животных, получавших водное извлечение из кориандра посевного.
Рис. 1. Влияние курсового введения исследуемых извлечений на показатели гликогена печени (%) у крыс с четыреххлористым гепатозом (150 мг/кг, рer os)
Рис. 2. Влияние курсового введения исследуемых извлечений на показатели ТБК-активных продуктов крови (%) у крыс с четыреххлористым гепатозом (150 мг/кг, рer os)
Рис. 3. Влияние курсового введения исследуемых извлечений на показатели каталазы крови (%) у крыс с четыреххлористым гепатозом (150 мг/кг, рer os)
Примечание к рис. 1–3.
1 – интактные (животные, получавшие дистиллированную воду);
2 – контроль (животные с гепатозом, получавшие дистиллированную воду);
3 – кориандр посевной (животные с гепатозом, получавшие извлечение водное из травы кориандра посевного);
4 – кориандр посевной (животные с гепатозом, получавшие извлечение из травы кориандра посевного спиртовое);
5 – кукурузные столбики с рыльцами (животные с гепатозом, получавшие извлечение из кукурузных столбиков с рыльцами водное);
6 – кукурузные столбики с рыльцами (животные, с гепатозом, получавшие из кукурузных столбиков с рыльцами извлечение спиртовое);
* – вероятность различия к контрольной группе животных;
@ – вероятность различия к группе интактных животных;
^ – вероятность различия к группе животных, получавших кориандра посевного извлечение водное;
$ – вероятность различия к группе животных, получавших кориандра посевного извлечение спиртовое.
Так, в группе животных, получавших водное извлечение из травы кориандра посевного, в сравнении с контрольной группой животных, достоверно понизилось содержание в крови ТБК-активных соединений на 25,62% (Р ˂ 0,01), триглицеридов на 75% (Р ˂ 0,05), общего холестерина на 40,8% (Р ˂ 0,05), щелочной фосфатазы на 43,1% (Р ˂ 0,05), АлТ на 36,1% (Р ˂ 0,05). Меньший эффект оказали спиртовые извлечения из травы кориандра посевного и извлечения из кукурузных столбиков с рыльцами. Водные извлечения из травы кориандра посевного достоверно повысили содержание гликогена в печени по отношению к контрольной и интактной группам животных на 71,5% и 23,4% соответственно, тогда как водные извлечения из кукурузных столбиков с рыльцами лишь на 54,3% и 6,2%.
Полученные результаты экспериментов позволяют заключить, что извлечения из травы кориандра посевного в сравнении с извлечениями из кукурузных столбиков с рыльцами в большей степени обладают желчегонным и гепатопротекторным действием, причем наибольшей активностью обладает водное извлечение. Выраженность эффекта, по-видимому, обусловлена количественным содержанием действующих веществ в водном и спиртовом извлечениях. В водном извлечении содержание флавоноидов составляло 3,13–3,17%, кумаринов 7,27–7,3%, а в спиртовом извлечении 2,24–2,25% и 2,81–2,85% соответственно [8]. Наблюдавшаяся нормализация метаболических процессов печени связана в определенной степени с уровнем свободно-радикального окисления, о чем свидетельствует параллелизм сдвигов их показателей.
Выводы
Извлечения из травы кориандра посевного (в большей степени – водные) повышают при гепатозе желчевыделение и способствуют нормализации показателей функционального состояния печени.
Рецензенты:
Погорелый Василий Ефимович, доктор биологических наук, профессор кафедры фармакологии и патологии Пятигорского филиала ГБОУ ВПО «ВолгГМУ» Минздрава России, г. Пятигорск.
Доркина Елена Григорьевна, доктор биологических наук, доцент, зав. кафедрой биохимии и микробиологии Пятигорского филиала ГБОУ ВПО «ВолгГМУ» Минздрава России, г. Пятигорск.