Синдром хронического запора является одним из наиболее распространенных и значительно снижающих качество жизни пациента патологических состояний [7]. В последние годы хронические запоры являются одной из актуальных проблем не только взрослой, но и детской гастроэнтерологии [1]. По данным мировой статистики распространённость запоров составляет от 3 до 12 % среди взрослого населения, а в ряде индустриально развитых стран частота их встречаемости доходит до 40-60 %. Среди больных гастроэнтерологического профиля частота запоров составляет примерно 70 % и является одной из наиболее распространённых патологий желудочно-кишечного тракта у детей. У 25 % детей запоры проявляются на первом году жизни, но чаще диагностируются с 2-4 летнего возраста [9].
Согласно современным представлениям, хронический запор можно определить как хроническую задержку опорожнения кишечника, характеризующуюся частотой стула менее 3 раз в неделю и сопровождающуюся хотя бы одним из следующих признаков: чувством неполного опорожнения, небольшим количеством и плотной консистенцией кала и натуживанием не менее 1/4 времени дефекации [4].
Необходимо отметить гетерогенность патологических механизмов хронических запоров, что важно учитывать при назначении адекватного лечения. При лечении запора используются, как не медикаментозные методы лечения (увеличение двигательной активности, нормализация водного баланса и пищевого рациона, занятие спортом и пр.), так и лечение слабительными препаратами. Однако, выбор слабительного препарата затруднен при лечении детей, беременных женщин, больных сахарным диабетом и сердечно-сосудистыми заболеваниями, пациентов пожилого и старческого возраста [4].
В связи с этим, поиск новых эффективных и безопасных лекарственных препаратов, по-прежнему, остается актуальным. Перспективным направлением является создание лекарственных средств на основе крупной морской бурой водоросли ламинарии японской (Laminaria japonica Aresch.). Известно, что бурые водоросли (Fucophycota; Phaeophyta) являются ценным и сравнительно недорогим источником большого числа химических соединений, обладающих выраженной биологической активностью: полисахаридов, аминокислот, непредельных жирных кислот, макро - и микроэлементов, в том числе йода [2]. Наиболее широким спектром фармакологической активности обладают входящие в состав экстракта альгинаты. Известно, что соли альгиновой кислоты увеличивают кишечное содержимое и способствуют ускорению его транзита. Кроме того, альгинаты стимулируют фагоцитоз, являются сильными сорбентами холестерина и жирных кислот, обладают антиатерогенной, иммуномодулирующей, противомикробной, антацидной и кровоостанавливающей активностью.
Целью настоящего исследования явилось изучение слабительной активности новой лекарственной формы ламинарии японской - экстракта сухого.
Материалы и методы
Для исследования использовали сухой экстракт ламинарии японской, который получали в ООО НПО «Биомедицинские инновационные технологии». Показатели качества и технологические характеристики полученного экстракта сухого полностью соответствовали требованиям нормативной документации на данную лекарственную форму.
Эксперименты выполнены на белых лабораторных мышах (n=40) мужского пола, массой 24,9±2,7 г. Подопытных животных содержали в условиях вивария (с естественным режимом освещения; при температуре 22-24о; относительной влажности воздуха 40-50 %) с использованием стандартной диеты (ГОСТ Р 50258-92). Исследования проводили в соответствии с правилами качественной лабораторной практики при проведении доклинических исследований в РФ, а также правилами и Международными рекомендациями Европейской конвенции по защите позвоночных животных, используемых при экспериментальных исследованиях [3, 5]. Перед постановкой эксперимента животные проходили карантин в течение 10-14 дней [6, 8].
Слабительную активность экстракта ламинарии сухого сравнивали с действием настоя слоевищ ламинарии, а также с эффектами слабительных средств - макрогола (форлакс) и бисакодила. Перед началом эксперимента все подопытные животные были разделены на 5 групп. В первую группу вошли мыши, получавшие внутрижелудочно сухой экстракт ламинарии японской в дозе 750 мг/кг (в пересчете на альгиновую кислоту 200 мг/кг). Подопытным животным второй и третьей групп наблюдения однократно внутрижелудочно вводили бисакодил и форлакс в дозе 1мг/кг и 1 г/кг соответственно. Четвертую опытную группу составили мыши, получавшие внутрижелудочно настой из слоевищ ламинарии японской в соотношении 1:10. Животные контрольной группы внутрижелудочно получали изотонический раствор натрия хлорида в том же объеме, что и подопытные мыши.
Общая продолжительность наблюдения за животными при исследовании слабительной активности составила 24 часа. Через сутки во всех группах животных определяли общее количество кала за время эксперимента, также учитывали размер частиц и консистенцию кала.
Результаты исследования обработаны статистически с применением стандартного пакета программ «Microsoft Office Excel 2007». Размер выборки для сравнительного исследования при 5 % уровне значимости рассчитывали с использованием программы «COMPARE 2 Version 2.57 WinPEPI 11.0». Для ряда выборок вычисляли среднюю арифметическую и среднюю квадратическую ошибки. Определение нормальности распределения переменных проводили на основании гистограмм распределения, величины асимметрии и эксцесса. Для оценки достоверности различий выборок применяли параметрические и непараметрические методы. За достоверное принимали различие при уровне вероятности 95 % и более (p<0,05).
Результаты и обсуждение
В результате проведенного исследования было обнаружено, что при однократном внутрижелудочном введении экстракта ламинарии японской сухого (750 мг/кг) у подопытных мышей наблюдалось выраженное увеличение общего количества и размягчение консистенции каловых масс (таблица 1).
Таблица 1. Влияние экстракта ламинарии японской, бисакодила, форлакса, настоя из ламинарии японской на общее количество кала за сутки
|
№ |
Исследуемый препарат |
Масса кала, г |
|
1. |
Контроль (изотонический раствор натрия хлорида) |
0,4235±0,0794 |
|
2. |
Экстракт ламинарии японской сухой (750 мг/кг) |
0,5949±0,1239* |
|
3. |
Бисакодил (1мг/кг) |
0,7935±0,1349*# |
|
4. |
Форлакс (1г/кг) |
0,5256±0,0799* |
|
5. |
Настой слоевищ ламинарии (750 мг/кг в пересчете на сухое вещество) |
0,4043±0,0564# |
Примечание: * - различия с контролем (изотонический раствор натрия хлорида) достоверны (р<0,05);
# - различия с экстрактом ламинарии японской сухой достоверны (р<0,05).
Было отмечено, что общее количество каловых масс при однократном внутрижелудочном введении экстракта ламинарии японской сухого через 24 часа увеличилось в 1,4 раза (р<0,05). Выявлено, что наибольшей слабительной активностью среди исследованных слабительных средств обладал бисакодил (1 мг/кг). Так, было обнаружено, что общая масса кала у лабораторных животных, получавших бисакодил, была в среднем в 1,9 раза (р<0,05) выше, чем в контроле. Форлакс действовал несколько слабее. В сериях опытов с использованием этого препарата объем каловых масс увеличивался в среднем в 1,2 раза (р<0,05). Достоверных изменений общей массы кала в группе подопытных животных, получавших настой слоевищ ламинарии, не наблюдалось.
Сравнительный анализ активности новой лекарственной формы ламинарии японской, экстракта сухого с действием настоя слоевищ ламинарии японской, показал, что у настоя этой водоросли выраженного слабительного эффекта обнаружено не было, тогда как экстракт ламинарии достоверно увеличивал количество каловых масс, в среднем, в 1,4 раза по сравнению с контролем. Следует отметить, что слабительная активность экстракта ламинарии была в среднем в 1,3 раза (р<0,05) ниже, чем у бисакодила (1 мг/кг), но соответствовала действию форлакса (1 г/кг).
Таким образом, у подопытных животных, получавших экстракт ламинарии японской, наблюдалось выраженное увеличение общего количества каловых масс. Возможно, что слабительный эффект сухого экстракта обусловлен способностью альгинатов удерживать воду, влияя тем самым на осмотическое давление в просвете желудочно-кишечного тракта, электролитный состав кишечного содержимого и массу фекалий, увеличивая их объем и вес, стимулируя, в конечном итоге, моторику желудочно-кишечного тракта. Применение препаратов ламинарии японской не приводит к снижению тонуса кишечной мускулатуры и к привыканию рецепторного аппарата кишечника с последующим увеличением дозы слабительного средства.
Выводы
- При однократном внутрижелудочном введении подопытным мышам экстракт ламинарии японской сухой (750 мг/кг) обладал выраженным слабительным действием. Настой слоевищ ламинарии японской (750 мг/кг в пересчете на сухое вещество) подобного эффекта не оказывал.
- Слабительная активность экстракта ламинарии японской сухого была в среднем в 1,3 раза ниже, чем у бисакодила (1 мг/кг) и соответствовала действию форлакса (1 г/кг).