Особое место в возникновении вышеперечисленных заболеваний занимают реакции свободно-радикального окисления (СРО). Согласно современным представлениям, СРО рассматривается как жизненно необходимое и важное звено метаболизма, нарушение которого является универсальным молекулярным механизмом, причиной и общей закономерностью развития различных по этиологии и механизмам заболеваний [1,7,10,12,18].Участие свободных радикалов во многих физиологических, метаболических и патологических процессах позволяет считать этот процесс необходимым и, в то же время, небезопасным для организма [3,5,7,18].
Известно, что свободные радикалы образуются в процессе жизнедеятельности клеток. Наиболее распространенными из них являются активные формы кислорода (АФК) и радикалы, появляющиеся при перекисном окислении липидов (ПОЛ). Доказано, что в возникновении заболеваний органов дыхания, реакции СРО занимают особое место, так как легкие представляют собой наиболее крупную биологическую мембрану организма, внешняя поверхность которой постоянно контактирует с О2, а также такими активными инициаторами перекисного окисления, как озон и двуокись азота - наиболее распространенными оксидантами атмосферы [3,5, 7,8,18]. Многочисленными исследованиями показано, что в нормально функционирующих клетках содержание продуктов свободнорадикального окисления находится на крайне низком уровне, несмотря на обилие субстратов ПОЛ. Этот факт свидетельствует о наличии совершенной антиоксидантной защитной системы организма. Е.Б.Бурлакова в своих исследованиях (1985) показала универсальность антиоксидантной активности для всех живых тканей. К настоящему времени сложилось представление о единой многофакторной антиокислительной системе, основная функция которой - регуляция свободно-радикальных процессов, протекающих в организме. В нормально функционирующих клетках существуют разнообразные факторы, барьеры, ограничивающие воздействие свободных радикалов [3,4,5,12].
В ткани легкого представлены основные антиокислительные ферменты, такие как церулоплазмин и витамин Е [4,11]. Эти и другие антиоксиданты легочной ткани принимают активное участие в самых различных адаптационных реакциях как системы, так и организма.Так, экспериментально показано значительное повышение активации супероксиддисмутазы (СОД) в пневмоцитах и альвеолярных макрофагах в процессе гиперооксических воздействий [12]. Гипоксия, как известно, приводит к повышенной продукции супероксидного радикала вследствие угнетения конечного акцептора дыхательной цепи цитохромоксидазы [13, 14].
Уменьшение содержания кислорода в тканях, в первую очередь, влияет на процессы ферментативного окисления и клеточного дыхания. Наблюдаемый при этом дефицит энергии, падение уровня макрофагов и дезэнергизация митохондрий являются главным патогенетическим звеном любой формы гипоксии [13,14,16]. При гипоксии прослежена связь между активностью фосфолипаз, скоростью ферментативного гидролиза фосфолипидов, и последующим накоплением продуктов перекисного окисления липидов. В дальнейшем, они становятся причиной последующих структурно-функциональных повреждений. При этом, жирные кислоты разобщают окисление и активируют дальнейший гидролиз фосфолипидов, а лизофосфатазы – преимущественно ингибируют дыхательную цепь [13,14]. Таким образом, в условиях циркуляторной гипоксии обнаруживается нарушение равновесия в системе перекисное окисление / антиоксиданты, что является одной из причин изменения состава липидов в ткани легкого: накопления свободных жирных кислот и лизофосфолипидов, являющихся существенными факторами повреждения легочной ткани при ишемии [13,17,20,37].
К нарушению баланса в организме оксидантныхи антиоксидантных механизмовприводит один из самых агрессивныхфакторовриска возникновения и развития многихзаболеваний - табакокурение (ТБ). Фактор курения как негативный триггер объединяет ряд бронхолегочных заболеваний и, прежде всего, хроническую обструктивную болезнь легких (ХОБЛ) и рак легкого(РЛ), ибо рак практически всегда развивается у многолетних курящихна фоне ХОБЛ.Thatcher TH. et al. (2007), Yang SR., et al. (2007), Rahman I. et al. (2006) установили, что табачный дым, содержащийся в одной затяжке сигареты и проникший в дыхательные пути человека, содержит около 1015 свободных радикалов и около 4700 различных химических соединений. Необходимо подчеркнуть, что размеры отдельных частичек, входящих в состав табачного дыма, менее одного микрона. Размеры частиц позволяют классифицировать их как наночастицы, и это означает, что они проникают в дыхательные пути, свободно проходя альвеоло-капиллярную мембрану (А.Г.Чучалин). Эндотелиальные клетки капилляров малого круга кровообращения подвергаются повреждению и развитию феномена эндотелиальной дисфункции. Табачный дым вызывает не только острое повреждение легочной ткани, но и является непосредственной причиной воспалительного процесса: из просвета сосудов в ткани легких мигрируют макрофаги, нейтрофилы, дендритные клетки и CD+8 T лимфоциты (А.Г.Чучалин)..
Обнаружено, что особенно курение ускоряет развитие эмфиземы у лиц с врожденным дефицитом антитрипсина. Это связано с тем, что оксиданты инактивируют ингибиторы протеаз, повышается активность эластазы, которая повреждает органы дыхания, разрушая эластин, белки экстрацеллюлярной мембраны и сурфактанта [18]. Таким образом, оксиданты формируют дисбаланс в системе протеолиз–антипротеолиз. Оксидативному стрессу у больных с ХОБЛ могут также способствовать инфекции дыхательных путей. Прежде всего, инфекции содействуют активации и рекрутированию фагоцитирующих клеток в легкие[18].. Микроорганизмы (Streptococcus pneumonae и Haemophilus influenzae) обнаруживаются у больных с ХОБЛ даже в ремиссии, и они способны активно стимулировать продукцию АФК фагоцитами[18].
Деструкция ткани легких обусловлена и прямым токсичным воздействием АФК. Оксиданты не только повреждают молекулы (белки, липиды, нуклеиновые кислоты), но также опосредуют множество процессов, благоприятствующих развитию ХОБЛ: повреждают фибробласты, снижают активность сурфактанта, стимулируют образование тромбоксана, повышают проницаемость эпителия, ухудшают функцию ресничек и т.д.[18,40,41,62].
Универсальной реакцией на воздействие этих факторов риска является хроническое воспаление – главная причина всех функциональных и морфологических проявлений ХОБЛ. В воспалительном процессе участвуют практически все клеточные элементы, а наибольшее значение придается фагоцитирующим клеткам (нейтрофилы, макрофаги, эозинофилы), которые обладают мощными специализированными системами генерации АФК [18,40,41,62].В конечном итоге,имеющиеся данные позволяют выстроить следующую последовательность окислительных реакций при активации фагоцитирующих клеток. Стимулированный фагоцит продуцирует супероксиды, которые образуют пероксид водорода - Н2О2. И супероксид, и пероксид водорода могут сами принимать участие в модификации макромолекул [18,40,41,62]. Кроме этого, из них образуются более сильные окислители – гидроксил, гипохлорит и пероксинитрит, которые способны повреждать белки, липиды, нуклеиновые кислоты. Модификация белков меняет их антигенные свойства, а окисление липидов (особенно арахидоновой кислоты) приводит к появлению хемоаттрактантов, увеличивающих миграцию фагоцитов [18,40,41,62]. Таким образом, активация фагоцитов самопроизвольно усиливается, и в очагах воспаления может сформироваться порочный круг воспаления. В мокроте и жидкости бронхоальвеолярного лаважа у курящих больных ХОБЛ обычно выявляется повышенное количество нейтрофилов [18,40,41,62]. Подобной аккумуляции клеток есть множество причин. Оксиданты табачного дыма вызывают полимеризацию актина нейтрофилов и снижают их деформируемость [18,40,41,62]. Снижение деформируемости нейтрофилов способствует застреваниюклеток в капиллярах легких и их адгезии к эндотелию сосудов [18,40,41,62]. Адгезия клеток сопровождается активной генерацией АФК. Затем нейтрофилы мигрируют через межэндотелиальные пространства, которые увеличиваются под действием оксидантов [18,40,41,62]. Гигантское скопление активированных нейтрофилов в капиллярной сети альвеол приводит к мощному "оксидативномувзрыву", под действием которого происходит разрушение структурных элементов альвеол и формирование эмфиземы [18,40,41,62].
Кроме этого, и эозинофилия периферической крови идентифицируется как фактор риска развития обструкции дыхательных путей [18,40,41,62]. При ХОБЛ обнаруживается увеличение числа эозинофилов в биоптатах бронхов и уровня эозинофильного катионного протеина [18,40,41,62].Обратимость обструкции у больных с тяжелой дыхательной недостаточностью и эмфиземой коррелирует с эозинофилией бронхов. Это позволило предположить, что эозинофилы могут вносить существенный вклад в развитие оксидативного стресса в легких [18,40,41,62].Действительно, in vitro они генерируют больше супероксида, чем нейтрофилы илиальвеолярные макрофаги (АМ). АФК в эозинофилах образуются посредством эозинофильной пероксидазы, которая , в свою очередь,высвобождается из гранул при воздействии оксидантов [18,40,41,62].
Перекисное окисление и деградация белков чаще всего происходят при появлении каталитически активного свободного железа, поэтому железо играет важную роль в развитии ХОБЛ и концентрация железа в АМ курящих повышена в несколько раз [18,40,41,62].Механизмы этого до конца не выяснены, но, по-видимому, одна из причин – наличие железа в табаке (каждая сигарета содержит 0,04 мкг железа). К примеру, выявлена прогрессивная аккумуляция железа с возрастом у курящихмужчин, имеющих большой стаж и интенсивность курения. [18,40,41,62].
Повышенная продукция активных форм кислорода макрофагами и нейтрофилами при хроническом воспалении в бронхах и легких также может привести к развитию бронхолегочной дисплазии с последующей злокачественной трансформацией [1,58]. В связи с этим свободно-радикальное воздействие на клетки рассматривается также как универсальный механизм злокачественного перерождения клеток [1, 55]. Рост опухоли сопровождается изменением показателей антиокислительной активности и окислительного стресса в опухоли, что также отражается на состоянии органов и тканей организма [1,19].Можно отметить следующую направленность изменений редокс-зависимой модификации белков и липидов при наличии опухоли в организме. Многочисленными исследованиями показано, что в самой опухоли происходит снижение интенсивности процессов ПОЛ. В тоже время в плазме и эритроцитах окислительная модификация белков и липидов в целом усиливается. Полученные результаты согласуются с данными литературы, в которых сообщается о возрастании антиоксидантного статуса опухоли и усилении образования свободных радикалов в крови [1]. Одной из основных причин таких разнонаправленных изменений можно назвать поглощение опухолевыми клетками антиоксидантов из окружающей среды, что приводит к увеличению их уровня в опухоли и снижению в организме [1]. Помимо этого, в различных исследованиях сообщается об увеличении активности антиоксидантных ферментов в опухолевых клетках [1,53, 54, 61]. Снижение интенсивности свободнорадикального окисления в ткани опухоли увеличивает неспецифическую резистентность опухоли к действию АФК [1]. Поскольку активные формы кислорода играют определенную роль в развитии апоптоза, можно предположить, что снижение их уровня является одним из вероятных механизмов так называемого "избегания" апоптоза у раковых клеток [1]. Поскольку липоперекиси способны положительно влиять на хемотаксис фагоцитирующих клеток и распознаваться их скевенджер-рецепторами, пониженная интенсивность процессов перекисного окисления липидов может также приводить к уменьшению способности макрофагов и нейтрофилов находить и поглощать опухолевые клетки [1].
На интенсивность процессов свободно-радикального окисления в крови при опухолевом росте, помимо дефицита низкомолекулярных антоксидантов, может влиять множество факторов: сопутствующие воспалительные процессы, гиповентиляция, активность макрофагов и нейтрофилов, различные биологически активные вещества, секретируемые опухолью, продукты распада опухоли и др.[1]. Особое место в развитии окислительных процессов при раке легкого может играть повышенный уровень фактора некроза опухоли, содержание которого положительно коррелирует с уровнем АФК и играет важную роль в развитии паранеопластических синдромов, в особенности кахексии [1,15]. Интересно, что некоторыми авторами наблюдается ряд отличийв характере взаимодействий продуктов редокс-зависимой модификации белков и липидов при плоскоклеточном раке и аденокарциноме легкого[1].
Данные различия могут быть объяснены особенностями возникновения и развития данных гистологических вариантов рака легкого [1]. Так развитию плоскоклеточного ракалегкого (ПКРЛ) предшествует метаплазия эпителия бронхов, которая возникает как защитная реакция на длительное воздействие на слизистую оболочку экзогенных канцерогенов, при аденокарциноме (АКЛ) большое значение придают гормональным факторам, генетической предрасположенности и способности к метаболической активации канцерогенов внутри организма [1, 24, 60]. Кроме того, одним из характерных признаков ПКРЛ является сопутствующая воспалительная клеточная реакция, которая, как правило, не характерна для аденокарциномы [1, 45,68, 70].
Мелкоклеточный рак легкого (МКРЛ), в отличие от других гистологических вариантов отличается очень высокой скоростью роста опухоли, интенсивным метастазированием и высокой метаболической активностью [1]. Вероятно, при ПКРЛ и АКЛ, в связи с относительно медленным ростом опухоли окислительный стресс, как и общая стрессорная реакция организма, носит хронический характер, что приводит к менее выраженному накоплению продуктов окисления липидов и белков [1]. При МКРЛ также происходит еще большее усиление окислительных процессов, которое вызвано значительно более резко выраженным стрессорным воздействием [1]. Помимо агрессивного течения для МКРЛ характерны многие черты нейроэндокринных опухолей, в частности способность секретировать биологически активные вещества, которые также могут оказывать влияние на образование АФК в организме и активность ферментов антиоксидантной системы [1].
Исследованиями было показано, что в эритроцитах не было обнаружено четкой взаимосвязи изменений уровня исследуемых параметров в зависимости от стадии рака легкого [1]. В плазме крови была выявлена отрицательная корреляция между стадией заболевания и уровнем диеновых конъюгатов, битрозина и быстрореагирующих тиоловых групп белков [1]. Повышенный уровень этих показателей окислительного стресса на ранних стадиях, вероятно, связан с тем, что рак легкого, как правило, развивается на фоне уже имеющегося хронического воспалительного процесса, например при ХОБЛ [1]. Снижение их уровня можно объяснить наличием гиповентиляции, выраженность которой возрастает к более поздним стадиям.
Для некоторых показателей окислительной модификации белков, как в эритроцитах, так и в плазме наблюдается увеличение содержания на II и IV стадиях рака легкого. В эритроцитах такие изменения достоверны для карбонильных производных белков (КПБа) и суммарных тиоловых групп белков, в плазме — для КПБа и триптофана. Содержание КПБк, битирозина и тиоловых групп достоверно возрастает на II стадии, на IV стадии наблюдается тенденция к его увеличению [1].На II стадии рака легкого, растущая опухоль, развивающиеся под ее влиянием изменения структуры и нарушение гомеостаза легкого, а также прогрессивно нарастающие изменения в регионарных лимфатических узлах легких, воспалительная реакция, приводят к истощению антиоксидантов и усилению интенсивности процессов окислительной модификации белков на данной стадии [1]. На III стадии рака легкого главным образом происходит увеличение размеров опухоли, прорастанием ее в близлежащие ткани и дальнейшее распространение лимфогенных метастазов [1]. Происходит усиление общей гипоксии организма за счет нарушения функций легкого, также, возможно, возрастание активности антиоксидантных процессов, которые, в частности, могут быть обусловлены усилением образования низкомолекулярных продуктов фрагментации макромолекул, обладающих антиоксидантными свойствами, что приводит к снижению интенсивности процессов свободно-радикального окисления в организме онкобольного [1]. На IV стадии происходит развитие отдаленных метастазов, чему сопутствуют многочисленные изменения в организме больного раком легкого. По мере роста метастаза, происходит деструкция сосудистой стенки и выход опухоли в окружающие ткани с их прогрессирующим поражением и развитием воспалительных процессов. Данные нарушения приводят к еще более выраженному усилению окислительных процессов в эритроцитах и плазме [1, 42,48]
Таким образом, табакокурение является фактором, с которым связывают процесс биологического старения клеток человеческого организма. Табачный дым нарушает равновесие в системе оксиданты/ антиоксиданты и приводит к формированию окислительного стресса. Высокая продукция активных форм кислорода, а также определенные химические соединения (альдегиды и другие) индуцируют хронический воспалительный процесс дыхательных путей, что может привести в последующем к развитию бронхолегочной дисплазиии злокачественной трансформации.