Scientific journal
Modern problems of science and education
ISSN 2070-7428
"Перечень" ВАК
ИФ РИНЦ = 1,006

THE DIAGNOSTICS OF LAMBLIASIS WITH IMMUNOENZYME METHOD Y CHILDREN AT THE AGE OF 1 TO 15 IN KBR

Sizhazheva A.M. 1 Khulaev I.V. 1 Malaeva M.B. 2 Shogenova R.S. 1
1 FSEBI HPE «Kabardino-Balkarian State university named by X. M. Berbekov»
2 Health centre «Sindika»
Lambliasis is a widespread parasitic disease of human. According to official statistics in Russia it is registrated about 110000 cases of lambliasis annually, most of them are children about 14 years old (80 %). The research of lambliasis with immunoenzyme method makes up the main part of the work and makes a definite contribution in studying the methods of the diagnostics of lambliasis by children and finding out in blood infested antibodies, specific to antigens of lamblias at the beginning of the infection. By serologic examination in childrens venous blood serum it was defined antibodies to antigens G/lamblia by using test-sistems Lamblia-antibodies-immuneenzyme analysis – Best production ЗАО «Vector- Best». It was made an analysis of results of 2070 patients at the age of 1 to 15 from 2011 to 2014 years. The definition of immunoglobulins of different classes to antigens of lamblia is reasonable to include in complex examination of children, as well as the children, who are often ill. It contributes to more reliable detection of Lambliasis invasion, allows to give a specific treatment in time and then to check its effectiveness.
microflora.
antibody
antigen
immunoenzyme method
lambliasis
Лямблиоз – распространенное паразитарное заболевание человека. В России, по данным официальной статистики, ежегодно регистрируется около 110 000 случаев лямблиоза, из которых большинство (80 %) составляют дети до 14 лет [1, 2, 3, 4]. Эволюционно сложившееся сходство в прохождении части жизненного цикла простейших и гельминтов во внешней среде, а также общность факторов передачи и интенсивность инвазии способствуют частому образованию смешанных паразитоценотических моно-и полиинвазий [2, 3].

Лямблиоз – протозойная инвазия, протекающая преимущественно с поражением тонкой кишки и сопровождающаяся у части больных аллергическими и неврологическими симптомами [4].

Результаты эпидемиологических исследований по распространенности этого заболевания в различных регионах очень вариабельны и зависят от возраста, территории, экономических условий проживания обследуемого населения, сезона года, качества воды, а также от применяемых диагностических методов и настороженности врачей по поводу данной паразитарной инфекции [3, 4].

Актуальность лямблиоза у детей во многом обусловлена тем, что его клинические проявления часто маскируются различными вариантами гастроэнтерологической патологии, включая функциональные нарушения желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), отягощая их течение, синдромы избыточного роста кишечной микрофлоры в тонкой кишке, мальабсорбции, поливитаминной недостаточности, а также развитием аллергических заболеваний – рецидивирующей крапивницей, атопическим дерматитом, гастроинтестинальной формой пищевой аллергии, которые без адекватной терапии приобретают рецидивирующее течение. При этом отсутствие верификации диагноза не позволяет проводить адекватную терапию [4, 5].

Диагностика лямблиоза является трудной задачей: у некоторых больных с длительно текущим лямблиозом антитела в сыворотке крови могут отсутствовать, что свидетельствует о неэффективности механизмов гуморальной защиты. Антитела часто отсутствуют у страдающих лямблиозом детей с лимфатическим типом конституции; распространение практики постановки диагноза лямблиоза без проведения копрологического исследования нельзя считать оправданным [5, 6].

Исходя из сложившейся в стране эпидемиологической ситуации по лямблиозу, его эффективная и своевременная диагностика приобретает особую актуальность. Основным методом, верифицирующим лямблиозную инвазию, является обнаружение цист (статической формы) или трофозоитов (пролиферативной формы) возбудителя в образцах кала или дуоденального содержимого с помощью микроскопа. Однако в литературе встречаются мнения, что микроскопический метод в значительной степени субъективен и многое зависит от правильности проведения всех этапов исследования [7, 8]. Приводятся данные, показывающие, что частота регистрации положительных результатов при использовании микроскопического метода невысока (составляет 2,1 %), а эффективность не превышает 50 % [7, 9]. В качестве более современной альтернативы лабораторная практика предлагает разработанный в конце 90-х годов прошлого века иммуноферментный метод определения антигенов лямблий или специфических антител (АТ) к ним. Наиболее широко на территории России используются ИФТС по определению суммарных АТ (IgA, M, G) к антигенам лямблий (производства НПО «Вектор-Бест», г. Новосибирск), основным компонентом которых являются очищенные основные иммунодоминантные поверхностные белки трофозоитов лямблий с молекулярным весом 70–80 кДа [8, 9].

Целью настоящего исследования являлась оценка микрофлоры кишечника детей с подозрением на лямблиоз.

Задачи исследования:

1. Лабораторная диагностика Лямблиоза иммуноферментным методом.

2. Выявление иммуноглобулинов класса G к антигенам лямблиоза в сыворотке крови.

Объект исследования: пациенты санатория «Синдика» г. Нальчик, в возрасте от 1 года до 15 лет.

Материалы и методы: диагностика осуществлялась иммуноферментным методом (ИФА), основанным на обнаружении в крови инвазированных антител, специфичных к антигенам лямблий. При серологическом обследовании в сыворотке венозной крови детей определяли антитела к антигенам G/lamblia с использованием тест-систем Лямблия- антитела-ИФА-Бест производства ЗАО «Вектор-Бест».

Проведен анализ данных 2070 пациентов в возрасте от 1 года до 15 лет, в период с 2011 по 2014 г.

Результаты исследования: результаты серологического обследования 2070 ребенка представлены в таблице 1. Наибольшая выявляемость антител к антигенам лямблий наблюдалась в 2013 году. В целом, при определении у 2070 ребенка спе­цифических антител к антигенам лямблий положительный результат был получен у 1217 (58,79 %) человек.

Таблица 1

Выявляемость антител к антигенам лямблиоза у обследованных пациентов по годам

В титре

2011 год

2012 год

2013 год

2014 год

отр.

171

270

278

134

1:100

209

241

103

89

1:200

103

126

57

42

1:400

29

75

29

26

1:800

17

36

10

12

1:1600

7

-

-

2

1:3200

-

3

-

1

всего

536

751

306

477

 

Как видно с таблицы 1, за 4 года в лаборатории было сделано 2070 анализов для иммуноферментного выявления иммуноглобулинов классов A, M, G к антигенам лямблий в сыворотке (плазме) крови. В 2011 г. количество людей, сдавших анализы на обнаружение лямблиоза, составило 536 пациентов, в 2012 г. – 751 обследованный, а за последние два года, соответственно, 477 и 306 пациентов.

Данная таблица и диаграмма 1 показывают количество пациентов, обратившихся в санаторий «Синдика» г. Нальчик  с 2011 по 2014 год, в возрасте от 1 года до 15лет для определения антител к антигенам G/lamblia с использованием ИФА-метода.

Диаграмма 1.

Уровень иммуноглобулинов класса G к антигенам лямблий в сыворотке крови у обследованных пациентов по годам

 

Таблица 2

Общее количество больных за 4 года

титр

количество больных

отр

853

1:100

642

1:200

328

1:400

159

1:800

75

1:1600

9

1:3200

4

всего

2070

 

Из 2070 обследованных для определения антитела к антигенам G/lamblia 853 (41,2 %) человека имели отрицательный результат исследования, у 642 (31,0 %) обратившихся выявлены антитела с титром 1: 100, антитела к антигенам лямблиоза с титром 1:200 обнаружены у 328 (15,84 %) пациентов, результат с титром 1:400 имелись у 159 (7,68 %) человек, а антитела с титром 1:800 обнаружены у 75 (3,62 %) обследованных пациентов, положительный результат с титром 1:1600 выявлен у 9 (0,43 %) пациентов, а с титром 1: 3200 обнаружен у 4 (0,19 %) больных (таблица 2 и диаграмма 2).

Диаграмма 2.

Процентное соотношение обследованных больных по титрам

 

Таблица 3

Выявляемость антител к антигенам лямблиоза у обследованных пациентов по сезонам

В титре

зима

весна

лето

осень

отр.

105

201

356

191

1:100

74

141

321

106

1:200

52

84

122

70

1:400

15

62

50

32

1:800

14

20

21

20

1:1600

4

-

-

5

1:3200

-

-

-

1

 

Как видно из таблицы 3, выявляемость антител у обследованных пациентов приходится на  летний сезон,  а низкий процент положительных результатов приходится на зимний сезон.

Заключение

В диагностике лямблиоза существует ряд проблем. Обычно она проводится на обнаружение цист и трофозоитов в образцах фекалий или дуоденальном содержимом. Эффективность таких методов диагностики составляет 50 %. Иммуноферментная диагностика (ИФА), основанная на обнаружении в крови инвазированного антител, специфичных к антигенам G/lamblia,  выступает как дополнительная диагностика. Установлено, что антитела к антигенам G/lamblia присутствуют в крови в секретах человека практически на всех стадиях заболевания.

Нами отмечено, что по всей группе обследованных нами пациентов, титр 1: 100 иммуноглобулинов класса G встречается чаще всего и составляет 31,0 % случаев.

Серологическое обследование 2070 детей показало, что 1217 (58,79 %) из них имеют в крови антитела к антигенам лямблий.

Таким образом, определение иммуноглобулинов различных классов к антигенам лямблий целесообразно дополнительно включать в комплексное обследование детей, а также часто болеющих детей. Это способствует более надежному выявлению лямблиозной инвазии, позволяет своевременно провести специфическое лечение и в последующем осуществить контроль его эффективности.

Рецензенты:

Жетишев Р.А., д.м.н., профессор, заведующий кафедрой детских болезней, акушерства и гинекологии КБГУ, г. Нальчик;

Алискандиев А.М., д.м.н., профессор ГБОУ ВПО «Дагестанская государственная медицинская академия», г. Махачкала.